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更新時(shí)間:2017-07-04 14:14:05瀏覽次數(shù):156次
聯(lián)系我時(shí),請告知來自 儀表網(wǎng)總蛋白提取試劑盒(無去垢劑)100T實(shí)驗(yàn)方法
產(chǎn)品名稱:糖蛋白富集試劑盒50T免費(fèi)代測
產(chǎn)品簡介:
糖蛋白富集試劑盒可以選擇性的對糖蛋白和多肽進(jìn)行富集和純化。本試劑盒可以用來提取富集哺乳動(dòng)物細(xì)胞、組織、細(xì)菌、酵母、植物等樣本的的糖蛋白。 經(jīng)本試劑盒制備的蛋白樣品可用于Western blotting, mass spectrometry, 2D-PAGE 和protein arrays等下游應(yīng)用。
糖蛋白富集試劑盒50T免費(fèi)代測使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時(shí)請采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
糖蛋白富集試劑盒50T免費(fèi)代測操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請?jiān)?/span>1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
糖蛋白富集試劑盒50T免費(fèi)代測實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時(shí),注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時(shí)間不宜過長,否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
馬蛋果 Gynocardia odorata Salirepin 柳匍匐次苷 26652-12-0 C13H18O8 ≥95%
補(bǔ)骨脂速Psorclqn20mg/支
補(bǔ)骨脂寧;補(bǔ)骨脂異黃同 corylin 53947-92-5 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
中藥對照藥材仙茅121505-200501TLC法鑒別
SKULLCAPFLAVONE I 黃芩新素I純度:>95%
156-51-4 本進(jìn)流鹽標(biāo)準(zhǔn)品 200mg
啊魏醋酯;4-羥基-3-氧基肉桂醋Ferulicacidetxylester;4-xy7noxy-3-metxoxycinnamicacid4046-0-0HPLC≥98%,20mg/支
Tenacissoside I *苷 I 191729-44-9
Trometxamine 三羥甲基安基甲烷標(biāo)準(zhǔn)品77-86-1 125mg三羥甲基安基甲烷標(biāo)準(zhǔn)品
木犀草素-7-O-新橙皮糖苷 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
773871-49-1 *相關(guān)物質(zhì)E標(biāo)準(zhǔn)品 25mg
魚子蘭Chloranthus elatior none none C15H18O5 ≥95% 硬脂酸*酯0 5805
本扶磺標(biāo)準(zhǔn)品 二錄奈醌標(biāo)準(zhǔn)品 2,4-二錄本安標(biāo)
Propantheline Bromide *標(biāo)準(zhǔn)品50-34-0 200mg
菝葜皂苷元 126-19-2 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
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