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聯(lián)系我時(shí),請告知來自 儀表網(wǎng)總蛋白提取試劑盒(無去垢劑)100T實(shí)驗(yàn)方法
磷酸化蛋白提取試劑盒100T免費(fèi)代測注意事項(xiàng)
(1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn),不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時(shí)需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時(shí)請注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí),盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個(gè)操作過程動(dòng)作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4℃下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
(5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測。
(7)PI染色時(shí)間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
磷酸化蛋白提取試劑盒100T免費(fèi)代測產(chǎn)品簡介:
磷酸化蛋白提取試劑盒適用于從各種原代或傳代細(xì)胞和各種實(shí)體組織,如腦、脊髓、神經(jīng)結(jié)或纖維、脂肪、肝臟、消化道、腎臟、心臟、肌肉、血管、結(jié)締組織等哺乳動(dòng)物組織中提取磷酸化蛋白。提取過程簡單方便,可在1小時(shí)內(nèi)完成。該試劑盒含有的蛋白酶抑制劑混合物,阻止了蛋白酶對蛋白的降解,為提取高純度的蛋白提供了。本試劑盒含有的*配方能充分保護(hù)磷酸化蛋白的磷酸化,夠溶解細(xì)胞膜包括細(xì)胞質(zhì)膜和核膜。提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白質(zhì)電泳、免疫共沉淀等下游蛋白研究。
磷酸化蛋白提取試劑盒100T免費(fèi)代測實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細(xì)胞懸液每50~100 萬細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對于懸浮細(xì)胞:
(1)取 10~60 萬細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計(jì)檢測或流式細(xì)胞儀分析。
我司磷酸化蛋白提取試劑盒100T免費(fèi)代測本著標(biāo)準(zhǔn)*、質(zhì)量*、服務(wù)*、信譽(yù)*的宗旨,為客戶提供輕松便捷,安全可靠的網(wǎng)上采購模式!我們將竭誠為您服務(wù),咨詢!
柴胡Bupleurum chinense DC. Saikosaponin B1 柴胡皂苷B1 58558-08-0 C42H68O13 ≥98%
DL-薄荷醇DL-mqntholHPLC≥98%;20mg/支
表告依春 Epigoitrin 1072-93-1 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
中藥對照藥材石斛(鐵皮石斛)121501-200501TLC法鑒別
HARMALINE 哈馬靈純度:>95%
154127-19-2 布林佐胺相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 50mg
1-咖非??鼘幩?/span> 1241-87-8 C16H18O9 ≥95% 錄胍 雜質(zhì)D(Y0000182
丙線靈標(biāo)準(zhǔn)品 丙同標(biāo)準(zhǔn)品 標(biāo)準(zhǔn)品
*相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品20mg*相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品
D-四氫藥根堿 13063-54-2 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
虎杖Polygonum cuspidatum Torachrysone 8-O-glucoside 蘆薈大黃素-8-葡萄糖甙 64032-49-1 C20H24O9 ≥98.5%
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供系統(tǒng)適用性*雜質(zhì)100900-200701常溫,避光20mg
8-O-乙酰山梔苷甲酯 8-O-Acetyl shanzhiside metxyl ester 57420-46-9 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
小鼠蛋白激酶Cα(PKCα)ELISA試劑盒 ,英文名: PKCα ELISA Kit
人纖維介素蛋白(fgl2)ELISA檢測試劑盒HumanFibrinogenlikepeptide2,fgl2ELISAKit 96T/48T
大鼠內(nèi)臟脂肪特異性*蛋白酶抑制劑(vaspin)免疫試劑盒 Rat Visceral adipose-specific serine protease inhibitor,vaspin ELISA Kit
英文名稱RatMyosinELISAKit大鼠肌球蛋白(Myosin)規(guī)格:96T/48T
酵母菌SD-TRP/HIS/ADE培養(yǎng)基100毫升
ELISAKitGA人糖化白蛋白規(guī)格:48T/96T
小鼠Toll樣受體9(TLR-9/CD289)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat placenta growth factor (PLGF) ELISA Kit 大鼠胎盤生長因子(PLGF)ELISA試劑盒
HumanC-PeptideELISAKit 人C肽(C-Peptide)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanclusterOfdifferentiation,CD4ELISA試劑盒人CD4分子(CD4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組蛋白脫乙酰化酶11(HDAC11)活性比色法定量檢測試劑盒20次
Humanrheumatoidfactor,RFELISAKit人類風(fēng)濕因子(RF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
磷酸化蛋白提取試劑盒100T免費(fèi)代測人普通急性淋巴細(xì)胞白血病抗原(CALLA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(GLUT1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人葡萄糖氧化酶(GOD)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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