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更新時間:2017-07-04 14:09:43瀏覽次數(shù):139次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)磷酸化蛋白提取試劑盒100T免費代測注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態(tài)。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
磷酸化蛋白提取試劑盒100T免費代測產(chǎn)品簡介:
磷酸化蛋白提取試劑盒適用于從各種原代或傳代細胞和各種實體組織,如腦、脊髓、神經(jīng)結(jié)或纖維、脂肪、肝臟、消化道、腎臟、心臟、肌肉、血管、結(jié)締組織等哺乳動物組織中提取磷酸化蛋白。提取過程簡單方便,可在1小時內(nèi)完成。該試劑盒含有的蛋白酶抑制劑混合物,阻止了蛋白酶對蛋白的降解,為提取高純度的蛋白提供了。本試劑盒含有的*配方能充分保護磷酸化蛋白的磷酸化,夠溶解細胞膜包括細胞質(zhì)膜和核膜。提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白質(zhì)電泳、免疫共沉淀等下游蛋白研究。
磷酸化蛋白提取試劑盒100T免費代測實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
我司磷酸化蛋白提取試劑盒100T免費代測本著標準*、質(zhì)量*、服務(wù)*、信譽*的宗旨,為客戶提供輕松便捷,安全可靠的網(wǎng)上采購模式!我們將竭誠為您服務(wù),咨詢!
柴胡Bupleurum chinense DC. Saikosaponin B1 柴胡皂苷B1 58558-08-0 C42H68O13 ≥98%
DL-薄荷醇DL-mqntholHPLC≥98%;20mg/支
表告依春 Epigoitrin 1072-93-1 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
中藥對照藥材石斛(鐵皮石斛)121501-200501TLC法鑒別
HARMALINE 哈馬靈純度:>95%
154127-19-2 布林佐胺相關(guān)物質(zhì)A標準品 50mg
1-咖非??鼘幩?/span> 1241-87-8 C16H18O9 ≥95% 錄胍 雜質(zhì)D(Y0000182
丙線靈標準品 丙同標準品 標準品
*相關(guān)物質(zhì)C標準品20mg*相關(guān)物質(zhì)C標準品
D-四氫藥根堿 13063-54-2 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
虎杖Polygonum cuspidatum Torachrysone 8-O-glucoside 蘆薈大黃素-8-葡萄糖甙 64032-49-1 C20H24O9 ≥98.5%
羽扇烯同Lupqnonq1617-70-220mg
迷迭香酸 Rosmarinic acid 20283-92-5 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
供系統(tǒng)適用性*雜質(zhì)100900-200701常溫,避光20mg
8-O-乙酰山梔苷甲酯 8-O-Acetyl shanzhiside metxyl ester 57420-46-9 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
小鼠蛋白激酶Cα(PKCα)ELISA試劑盒 ,英文名: PKCα ELISA Kit
人纖維介素蛋白(fgl2)ELISA檢測試劑盒HumanFibrinogenlikepeptide2,fgl2ELISAKit 96T/48T
大鼠內(nèi)臟脂肪特異性*蛋白酶抑制劑(vaspin)免疫試劑盒 Rat Visceral adipose-specific serine protease inhibitor,vaspin ELISA Kit
英文名稱RatMyosinELISAKit大鼠肌球蛋白(Myosin)規(guī)格:96T/48T
酵母菌SD-TRP/HIS/ADE培養(yǎng)基100毫升
ELISAKitGA人糖化白蛋白規(guī)格:48T/96T
小鼠Toll樣受體9(TLR-9/CD289)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat placenta growth factor (PLGF) ELISA Kit 大鼠胎盤生長因子(PLGF)ELISA試劑盒
HumanC-PeptideELISAKit 人C肽(C-Peptide)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanclusterOfdifferentiation,CD4ELISA試劑盒人CD4分子(CD4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組蛋白脫乙?;?/span>11(HDAC11)活性比色法定量檢測試劑盒20次
Humanrheumatoidfactor,RFELISAKit人類風(fēng)濕因子(RF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
磷酸化蛋白提取試劑盒100T免費代測人普通急性淋巴細胞白血病抗原(CALLA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白1(GLUT1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人葡萄糖氧化酶(GOD)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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