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上海莼試生物技術(shù)有限公司
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核蛋白提取試劑盒

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更新時間:2017-07-04 14:08:36瀏覽次數(shù):227次

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公司供應(yīng)的核蛋白提取試劑盒50T實驗方法品種類齊全,檢測效果好,質(zhì)量保證,歡迎廣大科研用戶!

核蛋白提取試劑盒50T實驗方法使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
27-AAD避光保存及使用。
37-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時,細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
產(chǎn)品名稱:核蛋白提取試劑盒50T實驗方法
產(chǎn)品簡介:

提供全套試劑,適用于從各種原代或傳代細(xì)胞和各種實體組織,如腦、脊髓、神經(jīng)結(jié)或纖維、脂肪、肝臟、消化道、腎臟、心臟、肌肉、血管、結(jié)締組織等哺乳動物組織中提取核蛋白和胞漿蛋白。提取過程簡單方便,可在1小時內(nèi)完成。制備的核蛋白和胞漿蛋白不僅純度高,保持天然活性,而且絕少交叉污染。提取的蛋白可用于Western Blotting、轉(zhuǎn)錄活性分析、Gel shift凝膠阻滯實驗、免疫共沉淀、酶活性測定等蛋白研究。

50T實驗方法操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)515min;
3.加入500μL1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請在1 hour內(nèi),進行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
3)在500μL 1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
50T實驗方法實驗步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTACa2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer
2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心510分鐘,收集細(xì)胞;
3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS4)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心510分鐘,洗滌細(xì)胞;
4)加入300μL 1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
5Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μLAnnexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
6PI標(biāo)記:上機前5分鐘再加入5μLPI染色。
7)上機前,補加200μL1×Binding Buffer。
紅花 Carthamus tinctorius Saffower Yellower * 36338-96-2 C43H44O24 98%

濱蒿內(nèi)酯ScopcronqHPLC98%,20mg/

扁塑藤素 Pristimerin 1258-84-0 20mg HPLC98% 用于含量測定

含量測定*100666-200401常溫,避光50mg

草酸*雜質(zhì)A對照品標(biāo)準(zhǔn)品128173-53-510mg
15308-34-6 鹽酸去甲本福林標(biāo)準(zhǔn)品 25mg

華三松Pinus armandii (E)-3-乙酰氧基-5-甲氧基二本 71144-78-0 C17H16O3 98% 鎮(zhèn)痛新;噴他佐心 - 對照譜圖(P005500

(-)-Rhododendrol 杜鵑醇 501-96-2

Digitalis洋地黃標(biāo)準(zhǔn)品8031-42-33g

款冬酮 84625-50-3 HPLC98%;20mg 訂購|咨詢
99-67-2 丙戊酸相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 0.25ml

羽葉頭樹Garuga pinnata none 56973-51-4 C19H22O4 95% 香茅醇0 6681

Rotundic acid 鐵冬青酸 20137-37-5

Trientine xy7nochloride鹽酸三四胺標(biāo)準(zhǔn)品38260-01-4 200mg

沒食子酸乙酯 831-61-8 HPLC98%;20mg 訂購|咨詢
小鼠賴酸tRNA合成酶(KARS)ELISA試劑盒 ,英文名: KARS ELISA Kit

人纖維母細(xì)胞表面抗原(FSP)ELISA檢測試劑盒HumanFibroblastsurfaceprotein,FSPELISAKit 96T/48T

大鼠血小板反應(yīng)蛋白/*敏感蛋白1(TSP-1)免疫試劑盒 Rat thrombospondin 1,TSP-1 ELISA Kit

英文名稱RatTumornecrosisfactorsolublereceptorIELISAKIT大鼠腫瘤壞死因子可溶性受體I(TNFsRI)規(guī)格:96T/48T

干細(xì)胞成脂分化潛力定性染色試劑盒20/100

ELISAKitapo-A1人載脂蛋白A1規(guī)格:48T/96T
小鼠α1微球蛋白(α1-MG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Rat myeloperoxidase specificity of anti neutrophil cytoplasmic antibody IgG (MPO-ANCA IgG)ELISA Kit 大鼠髓過氧化物酶特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體IgG(MPO-ANCA IgG)ELISA試劑盒

Humanluteotropichormone,LHELISAKit *(LH)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanClaracellprotein,CC16ELISA試劑盒人克拉拉細(xì)胞蛋白(CC16)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

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HumanRotavirusantigen,RVAgELISAKit人輪狀病毒抗原(RVAg)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
50T實驗方法人前鐵調(diào)素(Pro-HepcidinELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

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人前列腺特異膜抗原(PSMA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

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