當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>細(xì)胞培養(yǎng)>> DAB顯色試劑盒100ml售后服務(wù)
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更新時間:2017-07-04 14:06:22瀏覽次數(shù):152次
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DAB顯色試劑盒100ml售后服務(wù)使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時,細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
產(chǎn)品名稱:DAB顯色試劑盒100ml售后服務(wù)
產(chǎn)品簡介:
DAB 辣根過氧化物酶顯色試劑盒(DAB Horseradish Peroxidase Color Development Kit)是一種借助辣根過氧化物酶(HRP),用于免疫組化顯色、原位雜交顯色或Western、Southern、Northern、EMSA 等膜顯色的試劑盒。DAB,即3,3N-Diaminobenzidine Tertrahydrochloride,是辣根過氧化物酶的常用底物。在辣根過氧化物酶的催化下,DAB 會產(chǎn)生棕色沉淀。該棕色沉淀不溶于水和乙醇。
DAB顯色試劑盒100ml售后服務(wù)操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請在1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
DAB顯色試劑盒100ml售后服務(wù)實驗步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
麻風(fēng)樹Jatropha curcas 7-Oxo-β-sitosterol 7-氧代-beta-谷甾醇 2034-74-4 C29H48O2 ≥95%
吉馬同GqrmccronqHPLC≥98%,20mg/支
本甲酰烏頭原減 Benzoylacotine 466-24-0 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
HPLC法含量測定錄諾昔康 100663-200501常溫,避光100mg
*熔點標(biāo)準(zhǔn)物標(biāo)準(zhǔn)品58-55-9 500mg
152-62-5 去氫孕酮標(biāo)準(zhǔn)品 200mg
去斑蝥醋內(nèi)NorcantharidinHPLC≥98%,20mg/支
8-metxoxybonducellin 8-metxOXYBONDUCELLIN 90996-27-3
Tiamulin 泰妙菌素標(biāo)準(zhǔn)品55297-95-5 100mg泰妙菌素標(biāo)準(zhǔn)品
山梨酸鉀;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 24634-61-5,590-00-1 0.25g 訂購|咨詢
降香 Dalbergia odorifera 1g
玉米須隊照藥材Cornsilkcontrastmedicine1g
Cycloartane-3,24,25-triol 24,25-eetonide (24S)-環(huán)安坦-3,24,25-三醇 24,25-縮丙同 57576-31-5
哈帕苷; 哈帕甙; 瓜鉤草苷哈巴苷1835927Harpagide
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