植物磷酸化蛋白提取試劑盒100T使用說明書產(chǎn)品簡介：

蛋白質(zhì)磷酸化是細胞信號傳遞系統(tǒng)的組成部分,在許多生命活動中扮演重要角色,如基因與代謝活動的調(diào)節(jié),細胞分化,腫瘤形成,細胞周期現(xiàn)象,由生長因子和激素激發(fā)的信號傳遞等。在植物中,已知蛋白磷酸化與光刺激,植物生長激素和熱刺激有關(guān)。近來的研究結(jié)果表明,蛋白磷酸化和蛋白激酶參與植物保衛(wèi)反應(yīng)的啟動。植物病原菌產(chǎn)生的植物毒素,致病過程和蛋白酶抑制因子等均可誘發(fā)植物蛋白質(zhì)的磷酸化反應(yīng)。植物磷酸化蛋白提取試劑盒適用于從各種植物細胞和實體組織中提取磷酸化蛋白。提取過程簡單方便，可在1小時內(nèi)完成。

植物磷酸化蛋白提取試劑盒100T使用說明書實驗操作步驟：
1、液的配制：
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ，其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推；對于細胞懸液每50～100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 （200×），按照每50μL JC-1（200×）加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液（5 ×），混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置：
    把試劑盒中提供的CCCP（10mM ）*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中，稀釋至10uM ，處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ，進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細胞，通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失，JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光；而正常的細胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細胞，CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同，需自行參考相關(guān)文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞：
（1）取 10～60 萬細胞，重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中，細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
（2）加入 0.5mL JC-1 染色工作液，顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
（3）在孵育期間，按照每 1mL JC-1 染色緩沖液（5×）加入 4mL 蒸餾水的比例，配制適量的JC-1 染色緩沖液（1×），并放置于冰浴。
（4）37℃孵育結(jié)束后，600g 4 ℃離心3 ～4 分鐘，沉淀細胞。棄上清，注意盡量不要吸除細胞。
（5）用JC-1 染色緩沖液（1×）洗滌 2 次：加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細胞，600g 4 ℃離心3～4 分鐘，沉淀細胞，棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細胞，600g 4 ℃離心 3～4 分鐘，沉淀細胞，棄上清。
（6）再用適量 JC-1 染色緩沖液（1×）重懸后，用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察，也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
植物磷酸化蛋白提取試劑盒100T使用說明書注意事項
（1）本試劑只適用于實驗，不適用于臨床檢測；
（2）PI（propidium iodide，碘化丙錠）有毒性，能通過皮膚吸收，對眼睛有刺激作用，使用時需戴手套；
（3）Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì)，在操作時請注意避光。在處理和標記時，盡可能在暗處進行。在孵育階段，用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后，在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察；
（4）整個操作過程動作要盡量輕柔，勿用力吹打細胞，盡量在4℃下操作，以免影響細胞狀態(tài)。
（5）在細胞洗滌的后一步，請盡量將上清棄凈，以免PBS殘留，有可能會影響實驗結(jié)果。
（6）為防止熒光衰變，宜在1小時內(nèi)進行流式檢測。
（7）PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高，建議首*行Annexin V-FITC染色，短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
大黃梔子Gardenia sootepensis 5''-O-Syringoylkelampeyoside A 3,4,5-*氧基本基 6-O-[5-O-(4-羥基-3,5-二甲氧基本甲?；?/span>)-D-芹糖-BETA-D-呋喃糖基]-BETA-D-葡萄糖苷 1014974-98-1 C29H38O17 ≥95%

葒草苷OriqntinHPLC≥98%，20mg/支

檳榔減 Arecoline 18513-76-3 20mg HPLC≥98% 用于含量測定

中藥對照藥材山茱萸121495-200401TLC法
1524-88-5 扶氫縮松標準品 100mg

白花前胡醇WhiteQianHuChun8092-18-320mg

Platyphyllonol 闊葉同醇 41137-85-3

Fosfomycin Calcium 標準品 號：25992-22-7 100mg

貝萼皂苷元;Bayogenin 6989-24-8 20mg 訂購|咨詢
郁金(溫郁金) Turmeric(Wen Yujin) 1g

郁金隊照藥材Turmericcontrolmedicine1g

22-Dexy7noclerosterol glucoside 22-DExy7noCLEROSTEROL GLUCOSIDE 143815-99-0

多巴相關(guān)物質(zhì)A標準品27244-64-0 50mg多巴相關(guān)物質(zhì)A標準品

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