當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>細(xì)胞培養(yǎng)>> 支原體去除試劑10ml售后服務(wù)
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更新時間:2017-07-04 13:59:57瀏覽次數(shù):121次
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支原體去除試劑10ml售后服務(wù)儲存條件:2-8℃保存。
有效期:一年。
產(chǎn)品簡介:
支原體是一種大小僅為0.2~0.3μm,無細(xì)胞壁,可透過一般過濾膜(0.22-0.45μm)的原核生物,在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,支原體感染發(fā)生率達(dá)到63%,因而細(xì)胞培養(yǎng)過程中被支原體污染是一個世界性的難題。當(dāng)細(xì)胞(特別是傳代細(xì)胞)被支原體污染后,細(xì)胞內(nèi)的DNA、RNA及蛋白表達(dá)發(fā)生改變,而細(xì)胞的生長率一般并未發(fā)生顯著的影響,因而細(xì)胞被支原體污染一般難以察覺,嚴(yán)重時會導(dǎo)致細(xì)胞生長緩慢,狀態(tài)不好。細(xì)胞被支原體污染后,不論從外觀上有無變化,均會嚴(yán)重的影響各種實驗
支原體去除試劑10ml售后服務(wù)實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細(xì)胞懸液每50~100 萬細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對于懸浮細(xì)胞:
(1)取 10~60 萬細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細(xì)胞儀分析。
支原體去除試劑10ml售后服務(wù)注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標(biāo)記時,盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4℃下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
(5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進(jìn)行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
麥冬Ophiopogon japonicus (Thunb) Ker-Gawl. Ruscogenin 魯斯可皂苷元 472-11-7 C27H42O4 ≥98%
貝母辛PqIMISINq10mg/支
鮮減;蘚減;鮮安 Dictamnine 484-29-7 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
中藥對照藥材花生紅衣121491-200401TLC法鑒別
HYPOPHYLLANTHIN 次葉下珠素純度:>95%
1501-84-4 *標(biāo)準(zhǔn)品 300mg
二輕楊梅速Twoxy7nogenmyricetin700-1-0HPLC≥98%,20mg/支
Erysenegalensein E ERYSENEGALENSEIN E 154992-17-3
Progesterone 孕酮標(biāo)準(zhǔn)品57-83-0 200mg
柯伊利素-7-O-葡萄糖苷 19993-32-9 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
中華粗榧Cephalotaxus sinensis Tsugafolin none 66568-97-6 C17H16O5 ≥95%
鳶尾皇速Tqctorigqnin248-77-620mg
七葉膽苷XVII;七葉膽皂苷XVII Gypenoside XVII 80321-69-3 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
標(biāo)準(zhǔn)試劑酪蛋白140601-200522效價測定
安五脂素 Anwuligan 107534-93-0 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
小鼠顆粒體蛋白(GRN)ELISA試劑盒 ,英文名: GRN ELISA Kit
人腺苷酸環(huán)化酶1(AC-1)ELISA檢測試劑盒Humanadenylylcyclase1,AC-1ELISAKit 96T/48T
大鼠血栓前體蛋白(TpP)免疫試劑盒 Rat thrombus precursor protein,TpP ELISA Kit
英文名稱RatAdiponectinELISAKit大鼠脂聯(lián)素(ADT)規(guī)格:96T/48T
肝脂酶活性比色法定量檢測試劑盒20次
ELISAKitFFA人游離脂肪酸規(guī)格:48T/96T
小鼠β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human vitamin D (VD) ELISA Kit 人維生素D(VD)ELISA試劑盒
Humananti-spermantibody,AsAbELISAKit 人抗抗體(AsAb)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanChlamydiatrachomatis,CISA試劑盒人沙眼衣原體(CT)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
轉(zhuǎn)基因玉米T25品系基因檢測試劑盒20次
Humansecretoryleukocyteproteaseinhibitor,SLPIELISAKit人分泌性白細(xì)胞蛋白酶抑制因子(SLPI)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
支原體去除試劑10ml售后服務(wù)人神經(jīng)肽Y(NP-Y)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人神經(jīng)肽A(NKA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人神經(jīng)髓鞘蛋白1(p1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人神經(jīng)髓鞘蛋白(p2)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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