支原體去除試劑5ml實驗方法甜茶RubussuavissimusSLee Rubusoside 懸鉤子苷 64849-39-4 C32H50O13 ≥98%

滌奧司明DiosminHPLC≥98%，20mg/支

頭翁皂苷B4;頭翁皂甙B4 Anemoside B4 129741-57-7 20mg HPLC≥98% 用于含量測定

含量測定枸櫞酸*100656-200501常溫，避光100mg

*相關(guān)物質(zhì)D標(biāo)準(zhǔn)品57327-92-1 30mg

產(chǎn)品名稱：支原體去除試劑5ml實驗方法
儲存條件：2-8℃保存。

有效期：一年。

產(chǎn)品簡介：

支原體是一種大小僅為0.2~0.3μm，無細胞壁，可透過一般過濾膜（0.22-0.45μm）的原核生物，在細胞培養(yǎng)過程中，支原體感染發(fā)生率達到63%，因而細胞培養(yǎng)過程中被支原體污染是一個世界性的難題。當(dāng)細胞（特別是傳代細胞）被支原體污染后，細胞內(nèi)的DNA、RNA及蛋白表達發(fā)生改變，而細胞的生長率一般并未發(fā)生顯著的影響，因而細胞被支原體污染一般難以察覺，嚴(yán)重時會導(dǎo)致細胞生長緩慢，狀態(tài)不好。細胞被支原體污染后，不論從外觀上有無變化，均會嚴(yán)重的影響各種實驗的支原體去除試劑5ml實驗方法使用注意事項
1．微量試劑取用前請 離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時請采取防護措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測活細胞，流式細胞儀檢測時，細胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測組織樣本。
支原體去除試劑5ml實驗方法操作方法
1．懸浮細胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞；
4．請在1 hour內(nèi)，進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細胞；
2．對于貼壁細胞來說，也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導(dǎo)細胞凋亡；
（1）將細胞于蓋玻片上生長，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細胞凋亡，并設(shè)立陰性對照組；
（2）用PBS洗滌細胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm，發(fā)射波長647 nm，7-AAD熒光信號呈紅色。
B．流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測，激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
支原體去除試劑5ml實驗方法實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細胞收集。懸浮細胞收集：離心5分鐘；貼壁細胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時間不宜過長，否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細胞；
（3）細胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機前，補加200μL的1×Binding Buffer。
150-13-0 安本價酸標(biāo)準(zhǔn)品 200mg

藤皇微球菌Micrococcusluteus凍干粉

Cuniloside B CUNILOSIDE B 1187303-40-7

Tolnaftate托酯標(biāo)準(zhǔn)品2398-96-1 200mg托酯標(biāo)準(zhǔn)品

粗莖甲;Crassicauline 79592-91-9 20mg 訂購|咨詢
云南蘿芙木Rauvolfia yunnanensis Serpentine 蛇紋石素 18786-24-8 C21H21N2O3 ≥99%

鳶尾皇速TqctorigqninHPLC≥98%，20mg/支

地黃苷D;地黃苷D Rehmannioside D 81720-08-3 20mg HPLC≥98% 用于含量測定

含量測定扶馬西尼100727-200601常溫，避光100mg

Allopurinol*標(biāo)準(zhǔn)品315-30-0250mg
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