10X PBS緩沖液 (pH7.4)500ml免費(fèi)代測(cè)使用注意事項(xiàng)
1．微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測(cè)組織樣本。
產(chǎn)品名稱：10X PBS緩沖液 (pH7.4)500ml免費(fèi)代測(cè)
儲(chǔ)存條件：-20℃保存。存放2-8℃有效期6個(gè)月。

有效期：一年。

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

PBS緩沖液(10X)是采用高純度、高品質(zhì)的原料進(jìn)行配制，用于需要用到PBS緩沖液的各種用途。本產(chǎn)品為10×的溶液，使用前用水10倍稀釋即可。本PBS溶液經(jīng)過除菌處理，可以直接用于細(xì)胞培養(yǎng)過程中細(xì)胞的洗滌或其他常規(guī)用途。1×的本產(chǎn)品pH值為7.4。

10X PBS緩沖液 (pH7.4)500ml免費(fèi)代測(cè)操作方法
1．懸浮細(xì)胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細(xì)胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞；
4．請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi)，進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細(xì)胞；
2．對(duì)于貼壁細(xì)胞來說，也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；
（1）將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng)，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并設(shè)立陰性對(duì)照組；
（2）用PBS洗滌細(xì)胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm，發(fā)射波長(zhǎng)647 nm，7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B．流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè)，激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
10X PBS緩沖液 (pH7.4)500ml免費(fèi)代測(cè)實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時(shí)，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集：離心5分鐘；貼壁細(xì)胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)，否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細(xì)胞；
（3）細(xì)胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細(xì)胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細(xì)胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機(jī)前，補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
旱冬瓜Alnus nepalensis Rubranol (R)-1,7-雙-(3,4-二羥基本基)-5-羥基庚烷 211126-61-3 C19H24O5 ≥98%

香蒲新苷TyphcnqosidqHPLC≥98%，20mg/支

頭翁皂苷A3;頭翁皂甙A3 Anemoside A3 9724-84-1 20mg HPLC≥98% 用于含量測(cè)定

中藥對(duì)照藥材牡丹皮121490-200501TLC法鑒別

GYMNEMAGENIN 匙羹藤新苷元純度：>95%
149845-06-7 甲磺酸沙奎拉韋標(biāo)準(zhǔn)品 200mg

奧沙西半oxezepem50mg

Acantrifoic acid A 654663-85-1

乙醇測(cè)定用內(nèi)標(biāo)對(duì)照溶液標(biāo)準(zhǔn)品(乙睛水溶液)1975-5-85mlX5ampules

半枝蓮堿 176520-13-1 HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢
56211-40-6 *標(biāo)準(zhǔn)品 200mg

原啊片減Protopine130-86-9HPLC≥98%,20mg/支

Helichrysetin 4,2',4'-三輕基-6'-甲氧基查耳同 62014-87-3

抑草生 標(biāo)準(zhǔn)品 號(hào)：132-66-1 100MG

藜蘆醇 1993-3-8 HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢
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