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更新時間:2017-07-04 13:58:51瀏覽次數(shù):302次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)硼酸鹽緩沖液(BBS,pH8.5-10)500ml使用說明書
硼酸鹽緩沖液(BBS,pH8.4)500ml售后服務(wù)
DEAE-Dextran細胞轉(zhuǎn)染試劑盒200T使用說明書
產(chǎn)品名稱:細胞凍存液100ml使用說明書
儲存條件:-20℃保存。
有效期:6個月。
注意事項:注意微生物污染。
產(chǎn)品簡介:
細胞凍存液是采用優(yōu)質(zhì)進口胎牛血清和DMSO原料進行配制,含90%胎牛血清和10% DMSO,用于普通細胞的凍存。
細胞凍存液100ml使用說明書使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
細胞凍存液100ml使用說明書操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內(nèi),進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導(dǎo)細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
細胞凍存液100ml使用說明書實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
Rubimaillin 大葉茜草素 55481-88-4 C17H16O4 ≥95%
哈巴俄苷Hcrpcgosidq20mg/支
頭翁素;銀蓮花素,頭翁腦 Anemonin 90921-11-2 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
供溶出度檢查*100655-200401常溫,避光100mg
Gibberellic Acid赤霉酸標(biāo)準(zhǔn)品1977-6-5200mg
149-32-6 赤蘚糖醇標(biāo)準(zhǔn)品(N/A) 1000mg
催吐蘿芙木定Mitoridine3911-19-120mg
Alpinetin 三姜素 36052-37-6
扶噻草胺 標(biāo)準(zhǔn)品 號:142459-58-3 100mg
*;Hesperidin 520-26-3 20mg 訂購|咨詢
鉤藤Uncaria sessilifructus Trieetonamine xy7nochloride 2,2,6,6-四甲基派啶酮鹽酸鹽 33973-59-0 C9H18ClNO ≥95%
原啊片減Protopinq130-86-920mg
木蘭花減;唐松草減,玉蘭減,洋玉蘭減 magnoflorine 88273 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
檢查用5-鄰本乙酰丙酸100904-200601常溫,避光30mg
a-香附酮 α-Cyperone 473-08-5 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
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