當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>細(xì)胞培養(yǎng)>> *細(xì)胞消化液(含EDTA)0.25%;0.02% 100ml實(shí)驗(yàn)方法
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更新時(shí)間:2017-07-04 13:55:31瀏覽次數(shù):673次
聯(lián)系我時(shí),請告知來自 儀表網(wǎng)硼酸鹽緩沖液(BBS,pH8.5-10)500ml使用說明書
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硼酸鹽緩沖液(BBS,pH8.0)500ml實(shí)驗(yàn)方法
DEAE-Dextran細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑盒200T使用說明書
產(chǎn)品名稱:*細(xì)胞消化液(含EDTA)0.25%;0.02% 100ml實(shí)驗(yàn)方法
儲存條件:2-8℃保存。
有效期:一年。
注意事項(xiàng):避免反復(fù)凍融。
產(chǎn)品簡介:
*消化液是采用高純度、高品質(zhì)的*和EDTA進(jìn)行配制,專門用于細(xì)胞或組織的消化。本產(chǎn)品經(jīng)過過濾除菌,可以直接使用。本產(chǎn)品含0.25% *和0.02% EDTA。 使用方法:根據(jù)需要進(jìn)行貼壁細(xì)胞或組織的消化。
*細(xì)胞消化液(含EDTA)0.25%;0.02% 100ml實(shí)驗(yàn)方法使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時(shí)請采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
*細(xì)胞消化液(含EDTA)0.25%;0.02% 100ml實(shí)驗(yàn)方法操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請?jiān)?/span>1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
*細(xì)胞消化液(含EDTA)0.25%;0.02% 100ml實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時(shí),注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時(shí)間不宜過長,否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
紅根草Salvia prionitis Royleanone 羅列酮 6812-87-9 C20H28O3 ≥95%
白當(dāng)歸速ByckcngqlicinHPLC≥98%,20mg/支
屈菜減 Chelidonine 476-32-4 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
HPLC法含量測定鹽酸安普樂定100652-200401常溫,避光50mg
Andrographolide*內(nèi)酯標(biāo)準(zhǔn)品5508-58-7500mg
148-72-1 肖毛果蕓香堿標(biāo)準(zhǔn)品 200mg
鳳仙花Impetiens balsamina 2-乙酰本 577-56-0 C9H8O3 ≥96% 珠錄噻醇 雜質(zhì)B(Y000008
Rabdoketone B 174819-51-3
Pilocarpine毛果蕓香堿標(biāo)準(zhǔn)品92-13-7 300mg毛果蕓香堿標(biāo)準(zhǔn)品
木通苷B 105471-98-5 HPLC≥98%;10mg 訂購|咨詢
四葉蘿芙木Rauvolfia tetraphylla Peraksine 霹靂蘿芙辛堿 15527-80-7 C19H22N2O2 ≥95%
原兒茶醋Protocctqchuicccid20mg/支
升Cimicifuga foetida Visnagin 甲氧呋 82-57-5 C13H10O4 (1R-(+-順式-蒎烷;松節(jié)烯168301
中藥對照藥材牛黃121328-200301TLC法鑒別
3,5-Dimetxoxy-4-xy7noxybenldehyde丁香醛純度:≥97%
小鼠鈣蛋白酶1(CAPN1)ELISA試劑盒 ,英文名: CAPN1 ELISA Kit
人小扁結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體1(AFP-L1)ELISA檢測試劑盒Humanalpha-fetoproteinLensculinarisagglutiin1,AFP-L1ELISAKit 96T/48T
大鼠肉毒堿脂酰轉(zhuǎn)移酶(CACT)免疫試劑盒 Rat carnitine-acylcarnitine translocase,CACT ELISA Kit
英文名稱RatEndothelialnitricoxidesynthase3ELISAKit大鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)規(guī)格:96T/48T
肌動蛋白聚合作用(polymerization)檢測試劑盒20次
ELISAKitCYFRA21-1人細(xì)胞角蛋白21-1片段規(guī)格:48T/96T
小鼠β細(xì)胞素(BTC)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
The trace of transferrin (MTF) ELISA Kit 人微量轉(zhuǎn)鐵蛋白(MTF)ELISA試劑盒
Humanbonemorphogeneticproteins,BMPsELISAKit 人骨形成蛋白(BMPs)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanCC-chemokinereceptor1,CCR1ELISA試劑盒人CC趨化因子受體1(CCR1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
轉(zhuǎn)基因玉米CBH351(starlink)品系基因檢測試劑盒20次
humanserumdeprivationresponse,SDPRELISAKit人血清剝奪反應(yīng)相關(guān)蛋白(SDPR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
*細(xì)胞消化液(含EDTA)0.25%;0.02% 100ml實(shí)驗(yàn)方法人鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化因子(ECF)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人輸血傳播病毒/辛型肝炎病毒((TTV)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人舒(*)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人瘦素(leptin)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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