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上海莼試生物技術(shù)有限公司
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當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>細(xì)胞培養(yǎng)>> *細(xì)胞消化液(含EDTA)0.25%;0.02% 100ml實(shí)驗(yàn)方法

*細(xì)胞消化液(含EDTA)0.25%;0.02% 100ml實(shí)驗(yàn)方法

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更新時(shí)間:2017-07-04 13:55:31瀏覽次數(shù):694次

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公司供應(yīng)的*細(xì)胞消化液(含EDTA)0.25%;0.02% 100ml實(shí)驗(yàn)方法品種類(lèi)齊全,檢測(cè)效果好,質(zhì)量保證,歡迎廣大科研用戶!

產(chǎn)品名稱:*細(xì)胞消化液(含EDTA0.25%0.02% 100ml實(shí)驗(yàn)方法
儲(chǔ)存條件:2-8℃保存。

有效期:一年。

注意事項(xiàng):避免反復(fù)凍融。

產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

*消化液是采用高純度、高品質(zhì)的*和EDTA進(jìn)行配制,專(zhuān)門(mén)用于細(xì)胞或組織的消化。本產(chǎn)品經(jīng)過(guò)過(guò)濾除菌,可以直接使用。本產(chǎn)品含0.25% *和0.02% EDTA。 使用方法:根據(jù)需要進(jìn)行貼壁細(xì)胞或組織的消化。

*細(xì)胞消化液(含EDTA0.25%;0.02% 100ml實(shí)驗(yàn)方法使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
27-AAD避光保存及使用。
37-AAD為潛在致癌物,操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測(cè)組織樣本。
*細(xì)胞消化液(含EDTA0.25%;0.02% 100ml實(shí)驗(yàn)方法操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)515min;
3.加入500μL1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對(duì)于貼壁細(xì)胞來(lái)說(shuō),也可直接用蓋玻片來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng),用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對(duì)照組;
2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
3)在500μL 1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
5)避光、室溫反應(yīng)5 min
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm,發(fā)射波長(zhǎng)647 nm7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè),激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
*細(xì)胞消化液(含EDTA0.25%0.02% 100ml實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過(guò)度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2%的BSA可防止消化過(guò)度。如果用含EDTA的*消化時(shí),注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTACa2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心510分鐘,收集細(xì)胞;
3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS4)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心510分鐘,洗滌細(xì)胞;
4)加入300μL 1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
5Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μLAnnexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
6PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μLPI染色。
7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL1×Binding Buffer。
紅根草Salvia prionitis Royleanone 羅列酮 6812-87-9 C20H28O3 95%

白當(dāng)歸速ByckcngqlicinHPLC98%,20mg/

屈菜減 Chelidonine 476-32-4 20mg HPLC98% 用于含量測(cè)定

HPLC法含量測(cè)定鹽酸安普樂(lè)定100652-200401常溫,避光50mg

Andrographolide*內(nèi)酯標(biāo)準(zhǔn)品5508-58-7500mg
148-72-1 肖毛果蕓香堿標(biāo)準(zhǔn)品 200mg

鳳仙花Impetiens balsamina 2-乙酰本 577-56-0 C9H8O3 96% 珠錄噻醇 雜質(zhì)B(Y000008

Rabdoketone B 174819-51-3

Pilocarpine毛果蕓香堿標(biāo)準(zhǔn)品92-13-7 300mg毛果蕓香堿標(biāo)準(zhǔn)品

木通苷B 105471-98-5 HPLC98%;10mg 訂購(gòu)|咨詢
四葉蘿芙木Rauvolfia tetraphylla Peraksine 霹靂蘿芙辛堿 15527-80-7 C19H22N2O2 95%

原兒茶醋Protocctqchuicccid20mg/

Cimicifuga foetida Visnagin 甲氧呋 82-57-5 C13H10O4 (1R-(+-順式-蒎烷;松節(jié)烯168301

中藥對(duì)照藥材牛黃121328-200301TLC法鑒別

3,5-Dimetxoxy-4-xy7noxybenldehyde丁香醛純度:≥97%
小鼠鈣蛋白酶1(CAPN1)ELISA試劑盒 ,英文名: CAPN1 ELISA Kit

人小扁結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體1(AFP-L1)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanalpha-fetoproteinLensculinarisagglutiin1,AFP-L1ELISAKit 96T/48T

大鼠肉毒堿脂酰轉(zhuǎn)移酶(CACT)免疫試劑盒 Rat carnitine-acylcarnitine translocase,CACT ELISA Kit

英文名稱RatEndothelialnitricoxidesynthase3ELISAKit大鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)規(guī)格:96T/48T

肌動(dòng)蛋白聚合作用(polymerization)檢測(cè)試劑盒20

ELISAKitCYFRA21-1人細(xì)胞角蛋白21-1片段規(guī)格:48T/96T
小鼠β細(xì)胞素(BTC)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

The trace of transferrin (MTF) ELISA Kit 人微量轉(zhuǎn)鐵蛋白(MTF)ELISA試劑盒

Humanbonemorphogeneticproteins,BMPsELISAKit 人骨形成蛋白(BMPs)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanCC-chemokinereceptor1,CCR1ELISA試劑盒人CC趨化因子受體1(CCR1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

轉(zhuǎn)基因玉米CBH351(starlink)品系基因檢測(cè)試劑盒20

humanserumdeprivationresponse,SDPRELISAKit人血清剝奪反應(yīng)相關(guān)蛋白(SDPR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
*細(xì)胞消化液(含EDTA0.25%0.02% 100ml實(shí)驗(yàn)方法人鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化因子(ECF)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人輸血傳播病毒/辛型肝炎病毒((TTV)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人舒(*ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人瘦素(leptinELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

 

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