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ATCC細(xì)胞的凍存注意事項(xiàng)和簡(jiǎn)便方法2017/3/7

ATCC細(xì)胞注意事項(xiàng)：1.使用DMSO前，不需要進(jìn)行高壓滅菌，它本身就有滅菌的作用。高壓滅菌反而會(huì)破華它的分子結(jié)構(gòu)，以至于降低冷凍保護(hù)效果。在常溫下，DMSO對(duì)人體有害，故在配制時(shí)戴上手套操作。2.不...

血細(xì)胞的分離技術(shù)操作方法2017/3/2

（一）材料與試劑1．抗凝劑（1）肝素：肝素是含硫酸基的粘多糖，常用其鈉鹽或鉀鹽，它能阻止凝血酶原轉(zhuǎn)化為凝血酶，進(jìn)而抑制纖維蛋白原形成纖維蛋白，從而阻止血液凝固。常用的肝素溶液濃度為1000U/ml，市...

ATCC細(xì)胞培養(yǎng)方法分析2017/2/28

1.ATCC細(xì)胞玻璃吸管和玻璃培養(yǎng)瓶的消毒:1)高壓蒸汽滅菌15分鐘以上;2)干烤消毒140度2小時(shí)以上;2.無(wú)菌工作臺(tái)先清洗后用75%酒精擦拭干凈,紫外線照射40分鐘以上;各種培養(yǎng)板照射3小時(shí)以上;...

細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中預(yù)防污染可從以下幾方面著手2017/2/23

（一）細(xì)胞系從操作者做起1、操作者責(zé)任心要強(qiáng)，要細(xì)心穩(wěn)重，操作技術(shù)要熟練。進(jìn)無(wú)菌室前要用肥皂洗手或用5%新潔爾滅浸泡5分鐘，按規(guī)定穿隔離衣。進(jìn)入后關(guān)好門，坐下來(lái)盡量少走動(dòng)。工作開(kāi)始要先用75%酒精棉球...

原代細(xì)胞體外培養(yǎng)細(xì)胞的分型2017/2/21

原代細(xì)胞體外培養(yǎng)細(xì)胞的分型（一）原代細(xì)胞貼附型：大多數(shù)培養(yǎng)細(xì)胞貼附生長(zhǎng)，屬于貼壁依賴性細(xì)胞，大致分成以下四型：1、成纖維細(xì)胞型：胞體呈梭型或不規(guī)則三角形，中央有卵圓形核，胞質(zhì)突起，生長(zhǎng)時(shí)呈放射狀。除真...

脂質(zhì)體介導(dǎo)DNA轉(zhuǎn)染技術(shù)分析2017/2/16

脂質(zhì)體介導(dǎo)DNA轉(zhuǎn)染技術(shù)分析脂質(zhì)體介導(dǎo)是目前條件下Z方便的轉(zhuǎn)染方法之一，適用于把DNA轉(zhuǎn)染入懸浮或貼壁培養(yǎng)細(xì)胞中，其轉(zhuǎn)染率高，優(yōu)于磷酸鈣法，比它高5～100倍，能把DNA和RNA轉(zhuǎn)染到各種細(xì)胞株。用L...

胰蛋白酶溶液的配制方法與消毒2017/2/14

胰蛋白酶溶液的配制方法與消毒胰蛋白酶的作用是使細(xì)胞系間的蛋白質(zhì)水解從而使細(xì)胞離散。不同的組織或者細(xì)胞對(duì)胰酶的作用反應(yīng)不一樣。胰酶分散細(xì)胞的活性還與其濃度、溫度和作用時(shí)間有關(guān)，在pH為8.0、溫度為37...

SHG-44細(xì)胞的轉(zhuǎn)染操作方法2017/2/9

SHG-44細(xì)胞的轉(zhuǎn)染操作方法(1)轉(zhuǎn)染當(dāng)天，加入脂質(zhì)體/DNA混合物之前的短時(shí)間內(nèi)，更換1ml新鮮的有血清或無(wú)血清培養(yǎng)基。(2)準(zhǔn)備不同比例的DOSPER/DNA混合物，以確定每個(gè)細(xì)胞系的比例。①溶...

正常肺細(xì)胞培養(yǎng)操作方法2017/2/7

正常肺細(xì)胞培養(yǎng)操作方法取出小鼠細(xì)胞系正常肺組織,在預(yù)冷的PBS液中盡量除去氣管、支氣管、血管組織,將小鼠肺組織上面的血污用PBS清洗后,剪成1mm3小塊,用0.25%的胰酶溶液清洗一次,繼續(xù)用0.25...

細(xì)胞株免疫組化染色基本技術(shù)及注意事項(xiàng)2017/1/24

細(xì)胞株免疫組化染色基本技術(shù)及注意事項(xiàng)①根據(jù)課題的內(nèi)容選用動(dòng)物，選用配套的Ab。如Ab-I鼠抗人的抗體，細(xì)胞株與其他種屬間無(wú)交叉，則不能用其他動(dòng)物，而且Ab-Ⅱ必須是羊抗鼠，若PAP法Ab-Ⅲ必須來(lái)源于...

原代細(xì)胞周期測(cè)定操作步驟2017/1/21

原代細(xì)胞周期測(cè)定操作步驟[實(shí)驗(yàn)器材]1．儀器原代細(xì)胞倒置顯微鏡，CO2培養(yǎng)箱，普通冰箱，超凈工作臺(tái)，低速冷凍離心機(jī)，顯微數(shù)碼攝影系統(tǒng)．水浴鍋。2．材料與試劑(1)非無(wú)菌材料酒精棉球，離心管架，血細(xì)胞計(jì)...

原代細(xì)胞傳代培養(yǎng)法操作注意事項(xiàng)2017/1/19

原代細(xì)胞傳代培養(yǎng)法操作注意事項(xiàng)原理原代細(xì)胞在培養(yǎng)瓶長(zhǎng)成致密單層后，已基本上飽和，為使細(xì)胞能繼續(xù)生長(zhǎng)，同時(shí)也將細(xì)胞數(shù)量擴(kuò)大，就必須進(jìn)行傳代(再培養(yǎng))。傳代培養(yǎng)也是一種將細(xì)胞種保存下去的方法。同時(shí)也是利用...

細(xì)胞減數(shù)分裂的具體過(guò)程2017/1/17

細(xì)胞減數(shù)分裂的具體過(guò)程這種原代細(xì)胞分裂形式是隨著配子而出現(xiàn)的，凡是進(jìn)行有的動(dòng)、植物都有減數(shù)分裂過(guò)程。減數(shù)分裂與正常的有絲分裂的不同點(diǎn)，在于減數(shù)分裂時(shí)進(jìn)行2次連續(xù)的核分裂，細(xì)胞分裂了2次，其中染色體只分...

細(xì)胞株培養(yǎng)的基本技術(shù)2017/1/12

細(xì)胞株培養(yǎng)的基本技術(shù)為了減少污染對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)的影響，必須建立細(xì)胞凍存庫(kù)。當(dāng)需要做實(shí)驗(yàn)時(shí)從主細(xì)胞庫(kù)中復(fù)蘇細(xì)胞建立工作細(xì)細(xì)胞株庫(kù)。每一個(gè)凍存標(biāo)本都應(yīng)明確記錄細(xì)胞的性質(zhì)、代數(shù)及有無(wú)污染。同時(shí)還應(yīng)建立規(guī)范的檢測(cè)...

原代細(xì)胞懸液標(biāo)本制備實(shí)驗(yàn)步驟2017/1/10

原代細(xì)胞懸液標(biāo)本制備實(shí)驗(yàn)步驟(1)取材：原代細(xì)胞收集對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞于離心管中，800～1000r／min離心10min，棄上清，彈指法混勻細(xì)胞。沿管壁加入2．0％～2．5％冷戊二醛，輕輕吹打，4℃固定...