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活細胞直接觀察方法2017/6/29

(一)細胞系相差觀察和攝影1．相差裝置的使用相差裝置或顯微鏡都是由兩部分組成，相差聚光器和相差接物鏡。在每個相差接物鏡的光學系統(tǒng)中都有一個光環(huán)透鏡；在聚光器內(nèi)有數(shù)個可轉(zhuǎn)換的相位板，一定倍數(shù)的接物鏡使用...

原代細胞生長周期和傳代比例2017/6/27

原代細胞體外培養(yǎng)技術(shù)中所謂的傳“代”概念并不等于細胞生物學中“親代細胞”與“子代細胞”中“代”的概念。傳代培養(yǎng)的實質(zhì)就是分離后再次培養(yǎng)，進行一次分離再培養(yǎng)稱之為傳一代，傳代數(shù)可以衡量培養(yǎng)物的培養(yǎng)年齡。...

關(guān)于ATCC細胞消化2017/6/22

一、ATCC細胞酶消化法1.胰酶。這是用得Z多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大，從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細胞，在37度條...

對于支原體污染的細胞可以采取補救措施2017/6/20

1.細胞系抗生素排除法：可以用5-10倍于常用量的沖擊法，加入高濃度抗生素后作用24-48小時，再換入常規(guī)培養(yǎng)液，有時可能有效。推薦用量：慶大霉素200ug/ml,四環(huán)素10ug/ml，卡那霉素50u...

原代細胞污染處理流程2017/6/15

原代細胞污染處理流程1、將污染的培養(yǎng)液倒掉，轉(zhuǎn)燒瓶口，加入10mlPBS，適當晃動清洗培養(yǎng)瓶，然后倒掉。轉(zhuǎn)燒瓶口。2、繼續(xù)加入10mlPBS，同樣方法晃動，清洗培養(yǎng)瓶，然后倒掉。3、繼續(xù)加入5mlPB...

實驗中細胞爬片的免疫熒光操作步驟2017/6/13

1.取出ATCC細胞爬片放到35mm或60mm用過的細胞培養(yǎng)皿里，PBS洗三遍。注意：有的時候作的細胞爬片可能比較小，因此夾取的時候要小心，注意反正面，放在皿里洗比較方便，避免了來回夾取，另外洗的時候...

ATCC細胞遷移分析2017/6/8

ATCC細胞自動定時攝影記錄顯示,培養(yǎng)細胞可在附著面上運動,低細胞密度情況下,成纖維細胞的遷移能力Z強（細胞間不發(fā)生接觸）,密集的單層上皮細胞遷移能力Z弱.成纖維細胞以可辨的極性運動方式進行個體移動,...

ATCC細胞培養(yǎng)時玻璃器皿的清洗步驟2017/6/6

ATCC細胞玻璃器皿的清洗步驟：按浸泡→刷洗→浸酸→沖洗等四步程序進行。①浸泡：新購進的玻璃器皿常帶有灰塵，呈弱堿性，或帶有鉛、碑等有害物質(zhì)，故先用自來水浸泡過夜、水洗，然后再用2%~5%鹽酸浸泡過夜...

ATCC細胞破碎的技術(shù)分析2017/6/1

ATCC細胞破碎技術(shù)是指利用外力破壞細胞膜和細胞壁，使細胞內(nèi)容物包括目的產(chǎn)物成分釋放出來的技術(shù)，是分離純化細胞內(nèi)合成的非分泌型生化物質(zhì)（產(chǎn)品）的基礎。結(jié)合重組DNA技術(shù)和組織培養(yǎng)技術(shù)上的重大進展，以前...

細胞培養(yǎng)支原體直接培養(yǎng)法2017/5/25

ATCC細胞原理：直接培養(yǎng)支原體于培養(yǎng)基中，觀察其生長及菌落生成特點：是目Z直接與靈敏之步驟，亦是用來評估其它偵測新步驟之標準步驟。缺點：培養(yǎng)時間長，須3－5星期才能判斷。有些支原體不能在培養(yǎng)基培養(yǎng)出...

細胞系涂片組織標本的制備操作步驟2017/5/23

活檢組織樣品染色可以進行細胞系涂片，如針吸活檢組織、組織刮片或新鮮切割組織：此時，將一薄層的細胞以物理方法固著在潔凈的載玻片上。要想取得理想的染色效果，Z重要的因素是涂成單層細胞。涂片雖不能保持組織結(jié)...

細胞的結(jié)構(gòu)詳解2017/5/18

1.細胞壁（CellWall）ATCC細胞位于植物細胞的Z外層,是一層透明的薄壁。它主要是由纖維素和果膠組成的，孔隙較大，物質(zhì)分子可以自由透過。細胞壁對細胞起著支持和保護的作用。2.細胞膜（CellM...

ATCC細胞在體外培養(yǎng)中所需的條件2017/5/16

1、ATCC細胞無污染環(huán)境培養(yǎng)環(huán)境無毒和無菌是保證細胞生存的首要條件。當細胞放置于體外培養(yǎng)時，與體內(nèi)相比細胞丟失了對微生物和有毒物的防御能力，一旦被污染或自身代謝物質(zhì)積累等，可導致細胞死亡。因此在進行...

原代細胞傳代培養(yǎng)的操作介紹2017/5/9

1.觀察培養(yǎng)基是否正常，原代細胞狀態(tài)如何，細胞密度如何，決定是否傳代。觀察時擰緊蓋子。2.加熱PBS、versene、培養(yǎng)基，(提前做好)瓶子不要倒著放，不要讓液體接觸到瓶塞。3.打開超凈臺(先開風機...

分析原代細胞培養(yǎng)基的緩沖系統(tǒng)選擇及pH變化問題2017/5/4

由于大多數(shù)原代細胞適宜的pH為7.0~7.4，偏離此范圍可能對細胞生長將產(chǎn)生有害的影響。但各種細胞對pH的要求也不*相同，原代培養(yǎng)的細胞一般對pH變動耐受力差，無限細胞系耐受力強。因此，原代培養(yǎng)時，培...