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當(dāng)前位置:上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒>>脂肪酸代謝系列>> 脂氧合酶 (LOX)微量法檢測(cè)試劑盒
貨號(hào) | GOY-01S6641 |
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測(cè)定步驟:
1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至450nm。
2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測(cè)定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。
5、 樣本測(cè)定(在96孔板中依次加入下列試劑)
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測(cè)定。
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。避免給您帶來(lái)不必要的損失,請(qǐng)仔細(xì)閱讀購(gòu)買說(shuō)明!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測(cè)方法 | 貨號(hào) |
100管/48樣 | 微量法 | GOY-01S6641 |
商品介紹
測(cè)定意義 LOX廣泛存在于動(dòng)植物組織中,催化不飽和脂肪酸氧化反應(yīng),導(dǎo)致膜脂過(guò)氧化。在生物體的生長(zhǎng)發(fā)育、成熟衰老及逆境脅迫過(guò)程中具有重要作用。 測(cè)定原理: LOX催化氧化,氧化產(chǎn)物在280nm處有特征吸收峰;測(cè)定280nm吸光度增加速率,來(lái)計(jì)算LOX活性。 自備儀器和用品: 研缽、冰、臺(tái)式離心機(jī)、紫外分光光度計(jì)、1mL石英比色皿、可調(diào)式移液槍和蒸餾水。 |
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
所需的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測(cè)定:
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)
樣本和試劑浪費(fèi)!
1、樣本制備
① 組織樣本:
取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行
勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測(cè)液。
【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進(jìn)行提取
② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本:
先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL
提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);
12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。
【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10
4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測(cè);若渾濁,離心后取上清檢測(cè)。
注意事項(xiàng):
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。
2、對(duì)照管只需要做一管。
3、若對(duì)照管吸光值大于 1,建議將試劑二用蒸餾水稀釋 7 倍后使用(10μL 試劑二原液+60μL蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測(cè)定管大于對(duì)照管,對(duì)照管數(shù)值在什么范圍?對(duì)照管的范圍是 0.4-1。對(duì)照管吸光值過(guò)低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;
(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間 30min可以延長(zhǎng)到 40min)。對(duì)照管吸光值過(guò)高可能是試劑二未按操作說(shuō)明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測(cè)定管大于對(duì)照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般
將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋 10倍后再測(cè),通常可以使測(cè)定正常。
人球蛋白E Fc段受體ⅡAnti-LILRB5 Antibody小鼠異質(zhì)型核糖核蛋白A1(HNRPA1)elisa定量檢測(cè)試劑盒
大鼠抗紅抗體Anti-LILRB2 Antibody小鼠高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)elisa定量檢測(cè)試劑盒
人球蛋白G Fc段受體ⅢAnti-LILRB1 Antibody小鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(MHC-Ⅲ/H-2Ⅲ)elisa定量檢測(cè)試劑盒
魚卵黃高磷蛋白Anti-LILRB4 Antibody小鼠新生甲狀腺素(NN-T4)elisa定量檢測(cè)試劑盒
兔核因子κB亞基p65親和肽Anti-LIM Kinase Antibody小鼠糖化血紅蛋白(HbA1c)elisa定量檢測(cè)試劑盒
乙型肝炎二對(duì)半全套Anti-LIMK2 Antibody小鼠己糖激(HK)elisa定量檢測(cè)試劑盒
大鼠CD3分子Anti-LMO3 Antibody小鼠胰島素受體β(INSR-β)elisa定量檢測(cè)試劑盒
小鼠抗小核糖核蛋白/Sm抗體Anti-LMO4 Antibody小鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白(IFABP/FABP2)elisa定量檢測(cè)試劑盒
脂氧合酶 (LOX)微量法檢測(cè)試劑盒多效唑 分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99%(HPLC)Mouse Anti-rabbit IgG/ Biotin 化小鼠抗兔IgG豬組織蛋白B(CTSB)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
多效唑標(biāo)準(zhǔn)溶液100μg/ml,u=2%,溶劑:Mouse Anti-Goat IgG/ Biotin 化小鼠抗羊IgG豬神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子受體3型(NTRK3)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
多效唑標(biāo)準(zhǔn)溶液10μg/ml,u=2%,溶劑:Mouse Anti-Goat IgM/ Biotin 化小鼠抗羊IgM豬鳥苷環(huán)化激活因子2B(GUCA2B)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
二戊樂靈 分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%Mouse Anti-human IgG/ Biotin 化小鼠抗人IgG豬糖化依賴的黏附分子(GlyCAM1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
二戊樂靈標(biāo)準(zhǔn)溶液100μg/ml,u=2%,溶劑:酮Mouse Anti-human IgM/ Biotin 化小鼠抗人IgM豬二級(jí)淋巴組織趨化因子(SLC/CCL21)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
二戊樂靈標(biāo)準(zhǔn)溶液10μg/ml,u=2%,溶劑:酮Mouse Anti-rabbit IgM/ Biotin 化小鼠抗兔IgM豬絲氨蛋白33(PRSS33)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
猛殺威 分析標(biāo)準(zhǔn)品,98.5%Rabbit Anti-bov IgG/Biotin 化兔抗牛IgG豬蛋白激抑制劑α(PKIα )聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
咪鮮 分析標(biāo)準(zhǔn)品,95.5%Rabbit Anti-bov IgM/Biotin 化兔抗牛IgM豬孕酮和adipoQ受體家族成員Ⅶ(PAQR7)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
咪鮮標(biāo)準(zhǔn)溶液100μg/ml,u=2%,溶劑:Rabbit Anti-chicken IgG/Biotin 化兔抗雞IgG豬S轉(zhuǎn)移α5(GSTα5)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
咪鮮標(biāo)準(zhǔn)溶液10μg/ml,u=2%,溶劑:Rabbit Anti-chicken IgM/Biotin 化兔抗雞IgM豬氨氨肽(AAP)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
嘧霉 分析標(biāo)準(zhǔn)品,98.5%Rabbit Anti-dog IgG/Biotin 化兔抗狗IgG豬III型膠原α1(COL3α1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
甜菜寧 分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%Rabbit Anti-Goat IgG/Biotin 化兔抗羊IgG豬失調(diào)癥蛋白質(zhì)2(ATXN2)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
戊菌隆 分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.5%Rabbit Anti-goat IgM/Biotin 化兔抗羊IgM豬性神經(jīng)鞘脂(ASM)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
嘧肟草 分析標(biāo)準(zhǔn)品,98%Rabbit Anti-guinea pig IgG/Biotin 化兔抗豚鼠IgG豬平滑肌肌動(dòng)蛋白α2(ACTα2)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
菊酯標(biāo)準(zhǔn)溶液 100μg/ml,u=4%,體:正己烷Rabbit Anti-guinea pig IgM/Biotin 化兔抗豚鼠IgM豬XIII A1多肽(F13A1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
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