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?;D(zhuǎn)移酶(AAT)微量法檢測(cè)試劑盒
貨號(hào) | GOY-01S6643 |
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【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。避免給您帶來不必要的損失,請(qǐng)仔細(xì)閱讀購(gòu)買說明!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測(cè)方法 | 貨號(hào) |
100管/96樣 | 微量法 | GOY-01S6643 |
商品介紹
測(cè)定意義 AAT是一個(gè)多功能蛋白大家族,主要負(fù)責(zé)催化生物體內(nèi)各種?;腿ヵ;磻?yīng),在基因表達(dá)、代謝和信號(hào)傳導(dǎo)中具有重要作用。 測(cè)定原理: AAT催化乙酰CoA轉(zhuǎn)移乙?;蕉〈?,釋放的CoA還原DTNB生成TNB;TNB在412nm有吸收峰,測(cè)定412 nm吸光度增加速率可計(jì)算AAT活性。 自備儀器和用品: 研缽、冰、臺(tái)式離心機(jī)、可見分光光度計(jì)、1mL玻璃比色皿、恒溫水浴鍋。 |
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
所需的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測(cè)定:
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)
樣本和試劑浪費(fèi)!
1、樣本制備
① 組織樣本:
取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行
勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測(cè)液。
【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進(jìn)行提取
② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本:
先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL
提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);
12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。
【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10
4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測(cè);若渾濁,離心后取上清檢測(cè)。
注意事項(xiàng):
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。
2、對(duì)照管只需要做一管。
3、若對(duì)照管吸光值大于 1,建議將試劑二用蒸餾水稀釋 7 倍后使用(10μL 試劑二原液+60μL蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測(cè)定管大于對(duì)照管,對(duì)照管數(shù)值在什么范圍?對(duì)照管的范圍是 0.4-1。對(duì)照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;
(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間 30min可以延長(zhǎng)到 40min)。對(duì)照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測(cè)定管大于對(duì)照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般
將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋 10倍后再測(cè),通常可以使測(cè)定正常。
大鼠Anti-PFKL Antibody人GDP解離抑制因子1(GDI1)elisa定量檢測(cè)試劑盒
小鼠大內(nèi)皮素Anti-PFKFB1 Antibody人蛋白受體N(PTPRN)elisa定量檢測(cè)試劑盒
小鼠Ⅷ相關(guān)抗原Anti-PFKP Antibody人防御素β1(DEFB1)elisa定量檢測(cè)試劑盒
人前心鈉肽Anti-PGBD1 Antibody人MAX二聚化蛋白1(mxd1)elisa定量檢測(cè)試劑盒
大鼠組蛋白H2bAnti-PGD Antibody人ras同源物基因家族成員a(RHOA)elisa定量檢測(cè)試劑盒
小鼠ⅨAnti-PGF Antibody人α羥基丁酸脫氫(αHBDH)elisa定量檢測(cè)試劑盒
人角蛋白13Anti-PGD Antibody人內(nèi)酰β(LACTβ)elisa定量檢測(cè)試劑盒
大鼠N端前腦鈉素Anti-PHACTR4 Antibody人REST協(xié)阻抑因子3(RCOR3)elisa定量檢測(cè)試劑盒
酰基轉(zhuǎn)移酶(AAT)微量法檢測(cè)試劑盒(S)-(+)-2-哌 99%層粘連蛋白β1抗原
(2-) 97%核纖層蛋白A抗原
N-芐甘氨乙酯 97%凝集素樣氧化型低密度脂蛋白受體
吡-N-氧化物 95%人鼻咽癌癌因多肽抗原
鹽喹那普利 98%淋巴管內(nèi)皮透明質(zhì)受體抗原
(R)-(-)-3- 氨吡咯烷 98%血管緊張素轉(zhuǎn)換(抗原)
氮化鉭 5 μm,99.5% metals basis整合素alpha E2抗原
4'-叔丁-4-丁酰 98%巨噬表面分子抗原
化鋇,二水 99.99% metals basisv-maf 肌腱膜纖維肉瘤癌因同源物A抗原
碳鋇 99.95% metals basis黑色素瘤相關(guān)
氫氧化鋇,八水 AR,98%絲裂原活化蛋白激激1抗原
碳鍶 99.95% metals basis凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激1/絲裂原活化蛋白激激激5抗原
6-溴-2-四氫萘酮 97%抑癌因抗原
間酚 IND蛋白裂解(一種新的癌因)抗原
化氫-乙溶液 化氫含量: 30-40%人巨病UL49抗原
測(cè)定步驟:
1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至450nm。
2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測(cè)定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。
5、 樣本測(cè)定(在96孔板中依次加入下列試劑)
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測(cè)定。
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