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當(dāng)前位置:上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>生化檢測試劑盒>>脂肪酸代謝系列>> ?;D(zhuǎn)移酶(AAT)可見分光光度法
國產(chǎn)貨號(hào) | GOY-01S6644 |
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商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 酰基轉(zhuǎn)移酶(AAT)可見分光光度法檢測試劑盒 |
規(guī)格 | 25管/24樣 |
檢測方法 | 可見分光光度法 |
貨號(hào) | GOY-01S6644 |
商品介紹:
測定意義
AAT是一個(gè)多功能蛋白大家族,主要負(fù)責(zé)催化生物體內(nèi)各種?;腿ヵ;磻?yīng),在基因表達(dá)、代謝和信號(hào)傳導(dǎo)中具有重要作用。
測定原理:
AAT催化乙酰CoA轉(zhuǎn)移乙?;蕉〈?,釋放的CoA還原DTNB生成TNB;TNB在412nm有吸收峰,測定412 nm吸光度增加速率可計(jì)算AAT活性。
自備儀器和用品:
研缽、冰、臺(tái)式離心機(jī)、可見分光光度計(jì)、1mL玻璃比色皿、恒溫水浴鍋。
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制: 市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。 肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。 | 二、血液樣本的收集: 全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。 1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。 2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA。 |
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
Pseudozyma rugulosa泛素C末端水解L1檢測試劑盒
Pseudozyma rugulosa芳香族L-酸脫羧檢測試劑盒
Pseudozyma rugulosa肥大類胰蛋白檢測試劑盒
Rhodotorula glutinis肥胖抑制素檢測試劑盒
Candida tropicalis肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A檢測試劑盒
Pseudozyma shanxiensis肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白B檢測試劑盒
Pseudozyma hubeiensis肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白C檢測試劑盒
Cryptococcus flavus肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白D檢測試劑盒
?;D(zhuǎn)移酶(AAT)可見分光光度法檢測試劑盒亮藍(lán) 85%Anti-mTOR/FITC 熒光素標(biāo)記雷帕霉素靶蛋白抗體IgG豬脫氫表雄酮硫酯(DHEA-S)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
四鹽 95%Anti-mucin-1/Muc-1/CD227 /FITC 熒光素標(biāo)記粘蛋白-1/上皮膜抗原抗體IgG豬脫氫B(LDHB)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
靛藍(lán) AR,90%Anti-Muc2/FITC 熒光素標(biāo)記粘蛋白-2/上皮膜抗原2抗體IgG豬D-脫氫(D-LDH)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
靛藍(lán) 98%Anti-mucin-3/Muc-3 /FITC 熒光素標(biāo)記粘蛋白-3抗體IgG豬芳硫酯B(ASB)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
麗絲羅丹明B 85%Anti-mucin4/Muc4/FITC 熒光素標(biāo)記粘蛋白-4抗體IgG豬組織多肽抗原(TPA)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
麗絲羅丹明B 85%,用于培養(yǎng)Anti-mucin 5B/Muc5B/FITC 熒光素標(biāo)記粘蛋白-5B抗體IgG豬免疫球蛋白A Fc段受體(FcαR/CD89)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
熒光桃紅B AR,Dye content ≥80 %Anti-MUC5AC/Mucin 5AC /FITC 熒光素標(biāo)記胃粘液素抗體IgG豬β4(TMSβ4)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
熒光桃紅B 高純級(jí),≥97.0 %Anti-MuRF1/Trim63/FITC 熒光素標(biāo)記肌肉特異性泛素蛋白連接1抗體IgG豬前列腺素E合2(PTGES2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
孟加拉玫瑰紅 BRAnti-MTF-1/FITC 熒光素標(biāo)記金屬反應(yīng)轉(zhuǎn)錄因子-1抗體IgG豬去素(NA/NE)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
孟加拉玫瑰紅 90%Anti-MyD88 /FITC 熒光素標(biāo)記髓樣分化蛋白抗體IgG豬骨粘連蛋白(ON)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
孟加拉玫瑰紅 95%Anti-Myelin P0 protein/FITC 熒光素標(biāo)記外周髓脂P0蛋白/P0蛋白抗體IgG豬微管蛋白α3C(TUBα3C)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
日落黃 87%Anti-Myf6/FITC 熒光素標(biāo)記生肌調(diào)節(jié)因子6抗體IgG豬半胱氨酰白三烯受體2(CYSLTR2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
日落黃 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥95% (HPLC)Anti-Myt1/FITC 熒光素標(biāo)記髓鞘轉(zhuǎn)錄因子1抗體IgG豬成纖維生長因子受體4(FGFR4)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
檸檬黃 >95%(HPLC)Anti-Phospho-Myt1 (Ser83) /FITC 熒光素標(biāo)記化髓鞘轉(zhuǎn)錄因子1抗體IgG豬蛋白C(PROC)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
焦銅 電鍍級(jí),99%Anti-MyoD1/Myf3/FITC 熒光素標(biāo)記肌原調(diào)節(jié)蛋白抗體IgG豬I型前膠原羧端原肽(PICP)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。
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