當前位置:上海谷研實業(yè)有限公司>>生化檢測試劑盒>>脂肪酸代謝系列>> 肝脂酶(HL)可見分光光度法檢測試劑盒
貨號 | GOY-01S6646 |
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選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | |
規(guī)格 | 50管/24樣 |
檢測方法 | 可見分光光度法 |
貨號 | GOY-01S6646 |
商品介紹:
測定意義
肝酯酶是脂肪分解酶,在肝實質(zhì)細胞中合成,存在于肝臟竇周間隙內(nèi)皮細胞表面和竇周間隙腔面的肝細胞微絨毛表面,可促進脂蛋白中的向類固醇激素轉(zhuǎn)化,血漿中的HL活性增高時,血漿中小顆??蓪е翷DL水平升高,加速動脈粥樣硬化的發(fā)生。
測定原理
肝酯酶水解α-乙酸萘酯產(chǎn)生α-萘酚,可與固藍B鹽形成紫紅色偶氮化合物,在595nm有特征吸收峰,顏色深淺在一定范圍內(nèi)與肝酯酶活性成正相關。
自備實驗用品及儀器
天平、冷凍離心機、研缽、水浴鍋、可見分光光度計、1 mL玻璃比色皿。
實驗方法學:
一、肝素的配制: 市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。 肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。 | 二、血液樣本的收集: 全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。 1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。 2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA。 |
操作步驟:
實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量,如樣品濃度過高時,應對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內(nèi)配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應,此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。
乙酰肝素蛋白多糖2Human SRX1(Sulfiredoxin-1) ELISA Kit2,5-二苯惡唑
肝癌相關抗原hca25aHuman SS18L2 ELISA Kit壬酸
己糖激3抗體Human FZD1(Frizzled-1) ELISA Kit鎳箔
人乙肝病pre S1/S2蛋白抗體Human SSH3 ELISA Kit木香揮發(fā)油
人乙肝病pre S1蛋白抗體Human SRFBP1 ELISA Kit毛兩面針素
己糖激1抗體Human SSR4 ELISA Kit松脂醇二葡萄糖苷
己糖激2抗體Human SRGAP2 ELISA Kit5-羥色鹽酸鹽
熱休克蛋白90α抗體Human SRGAP1 ELISA Kit紅參
肝脂酶(HL)可見分光光度法檢測試劑盒(S)-(+)-1--1,2-乙二 99%核因子/k因結(jié)合核因子 p52/p100抗體CARD7/NALP1 凋亡加強結(jié)構(gòu)域蛋白7抗體
(±)芐氧羰-a-膦酰甘氨酯 97%線粒體復合物NDUFS7蛋白抗體CARD6 凋亡加強結(jié)構(gòu)域蛋白6抗體
(R)-(-)-2- 98%尼曼匹克C2前體蛋白抗體CARD4 凋亡加強結(jié)構(gòu)域蛋白4抗體
L-(-)-3- 98%煙酰腺嘌呤二核苷1抗體CARD17/INCA 凋亡加強結(jié)構(gòu)域蛋白17抗體
D-(+)-3- 98%一氧化氮合成-1抗體(神經(jīng)型)CARD15 凋亡加強結(jié)構(gòu)域蛋白15抗體
(S)-(+)-1--1,2-乙二對磺酯 98%轉(zhuǎn)錄因子相關蛋白NKX6.1抗體CARD14 凋亡加強結(jié)構(gòu)域蛋白14抗體
DL(±)-3-氨-3- 98%造血蛋白1抗體CARD12 凋亡加強結(jié)構(gòu)域蛋白12抗體
Z-L-氨 98%骨巢蛋白抗體CARD11 凋亡加強結(jié)構(gòu)域蛋白11抗體
(S)-(-)-1,2,3,4-四氫-3-異喹啉 98%NUP54抗體CARD10 BCL10結(jié)合蛋白和激活核轉(zhuǎn)錄因子抗體
N-對磺酰甘氨 98%親核素β1抗體CAPZA2/CapZ alpha 2 F肌動蛋白α2亞抗體
O-(四氫-2-)羥 98%谷氨受體NMDAζ1抗體CAPZA1 F肌動蛋白α1亞抗體
(S)-(-)-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-羧 97%谷氨受體NMDAζ2抗體Capsid protein VP1 大鼠細小病H-1株(H-1)抗體(N端)
N-Cbz-L-高絲氨內(nèi)酯 98%神經(jīng)元素2抗體capsid protein 豬圓環(huán)?、蛐鸵職さ鞍?/span>
2-(N-Cbz)-3-(N-Boc)-2,3-二氨 98%抑癌因NDRG3抗體CAPG2/NCAPG2 染色體相關蛋白2抗體
Cbz-beta-氨-L-氨 98%有絲分裂氧化1抗體CAPD3/hCAP-D3 濃縮素2復合亞D3抗體
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