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當(dāng)前位置:上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒>>脂肪酸代謝系列>> 磷脂酶A2(PLA2)微量法檢測(cè)試劑盒
脂肪酶(LPS)可見(jiàn)分光光度法檢測(cè)試劑盒
?;D(zhuǎn)移酶(AAT)微量法檢測(cè)試劑盒
?;D(zhuǎn)移酶(AAT)可見(jiàn)分光光度法
貨號(hào) | GOY-01S6659 |
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測(cè)定步驟:
1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至450nm。
2、 試劑三的稀釋?zhuān)簩⒃噭┤谜麴s水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測(cè)定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。
5、 樣本測(cè)定(在96孔板中依次加入下列試劑)
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測(cè)定。
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。避免給您帶來(lái)不必要的損失,請(qǐng)仔細(xì)閱讀購(gòu)買(mǎi)說(shuō)明!
產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 檢測(cè)方法 | 貨號(hào) |
100管/48樣 | 微量法 | GOY-01S6659 |
商品介紹
測(cè)定意義 磷脂酶A2(EC3.1.1.4)是磷脂sn-2位脂?;饷福瑥V泛存在于動(dòng)植物組織、細(xì)菌、細(xì)胞核分泌物中,參與脂肪消化,成熟、細(xì)胞信號(hào)傳遞、脂質(zhì)過(guò)氧化修復(fù)、宿主反應(yīng)等生理過(guò)程,在控制體內(nèi)磷脂類(lèi)物質(zhì)平衡、調(diào)節(jié)機(jī)體新陳代謝、參與疾病的病理進(jìn)程等方面發(fā)揮著及其重要的作用。 測(cè)定原理 磷脂酶A2作用于2-硫代十六酰乙基磷酸(HEPC)產(chǎn)生游離巰基,與DTNB反應(yīng)生成黃色物質(zhì),在412nm處有特征吸收峰。 自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器 天平、超速冷凍離心機(jī)、研缽、可見(jiàn)分光光度計(jì)、微量石英比色皿。 |
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
所需的儀器和用品:
可見(jiàn)分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測(cè)定:
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)
樣本和試劑浪費(fèi)!
1、樣本制備
① 組織樣本:
取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行
勻漿(或使用各類(lèi)常見(jiàn)勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測(cè)液。
【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進(jìn)行提取
② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本:
先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL
提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);
12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。
【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10
4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測(cè);若渾濁,離心后取上清檢測(cè)。
注意事項(xiàng):
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。
2、對(duì)照管只需要做一管。
3、若對(duì)照管吸光值大于 1,建議將試劑二用蒸餾水稀釋 7 倍后使用(10μL 試劑二原液+60μL蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測(cè)定管大于對(duì)照管,對(duì)照管數(shù)值在什么范圍?對(duì)照管的范圍是 0.4-1。對(duì)照管吸光值過(guò)低可能是(1)試劑二或試劑四沒(méi)有現(xiàn)配現(xiàn)用;
(2)沒(méi)有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間 30min可以延長(zhǎng)到 40min)。對(duì)照管吸光值過(guò)高可能是試劑二未按操作說(shuō)明書(shū)稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測(cè)定管大于對(duì)照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般
將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋 10倍后再測(cè),通??梢允箿y(cè)定正常。
視網(wǎng)膜感光外節(jié)膜蛋白1抗體Anti-CXCR4 Antibody惰性解油螺旋品牌
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環(huán)指蛋白133抗體Anti-CXCR4 Antibody埃切畢赤酵母品牌
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磷脂酶A2(PLA2)微量法檢測(cè)試劑盒5-氟胞嘧核苷 97%mIgM(Human membrane IgM) ELISA Kit 人表面膜免疫球蛋白M兔骨保護(hù)素(OPG)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
核苷 99%mIgD(Human membrane IgD) ELISA Kit 人表面膜免疫球蛋白D兔端錨聚合1 (TNKS1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
核苷 99.5%,用于培養(yǎng)KIR(Human killer cell immnoglobulin-like receptor) ELISA Kit 人殺傷免疫球蛋白樣受體兔軟骨寡聚質(zhì)蛋白(COMP)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
次 99%KLR(Human killer cell lectin-like receptor) ELISA Kit 人殺傷凝集素樣受體兔糖原合成激3α(GSK3α)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
5--2'-脫氧尿苷 99%APC(Human activated protein C) ELISA Kit 人活化蛋白C兔血小板激活因子(PAF)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
98%Human Protein C ELISA Kit 人蛋白C兔白介素16(IL-16)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
5-尿苷 99%PF-3(Human plaet factor 3) ELISA Kit 人血小板因子3兔質(zhì)金屬蛋白2(MMP-2)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
N4-乙酰胞嘧 98%F1+2(Human prothrombin fragment 1+2) ELISA kit 人原片段F1+2兔Runt相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子2(RUNX2)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
2',3'-異叉腺苷 98%MBP/MBL(Human Mannma binding protein/mannan binding lectin) ELISA Kit 人甘露糖結(jié)合蛋白/甘露糖結(jié)合凝集素兔輔肌動(dòng)蛋白α2 (ACTN2)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
98%MAC(Human membrane attack complex) ELISA Kit 人膜攻擊復(fù)合物兔周期素依賴(lài)性激9(CDK-9)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
1-乙酰-2,3,5-三酰氧-1-beta-D-呋喃核糖 98%EL(Human EuglobulinLysis) ELISA Kit 人優(yōu)球蛋白兔神經(jīng)纖維網(wǎng)蛋白1(NRP1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
β-胸苷 99%f-Hb(Human free haemoglobin) ELISA Kit 人游離血紅蛋白兔相關(guān)血漿蛋白2(PAPPA2)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
四乙酰核糖 98%PRM1(Human Protamine 1) ELISA Kit 人1兔L氨解氨(PAL)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
阿糖尿苷 98%HbCO(Human carboxyhemoglobin) ELISA Kit 人一氧化碳血紅蛋白兔中期因子(MK)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
尿嘧 99%PAIg(Human plaet-associated immunoglobulins) ELISA Kit 人血小板相關(guān)免疫球蛋白兔接觸蛋白2(CNTN2)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
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