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核黃素轉(zhuǎn)運(yùn)因子1(RFT1)elisa試劑盒
公司采用的全是進(jìn)口原材料研,發(fā)靈敏性高,高效性,*抗體,吸附均勻、吸附性好,回收利用率高、可靠性強(qiáng),無效包退包換,公司提供免費(fèi)代測服務(wù),各種種屬ELISA試劑盒產(chǎn)品齊全,質(zhì)量可靠。
產(chǎn)品名稱 | 核苷二磷酸激酶A(NDPK-A)elisa試劑盒 |
英文名稱 | Nucleoside diphosphokinase A,NDPK-A ELISA kit |
貨號 | GOY-N74939 |
實(shí)驗(yàn)流程:
1. 實(shí)驗(yàn)前標(biāo)準(zhǔn)品、試劑及樣本的準(zhǔn)備;
2. 加樣(標(biāo)準(zhǔn)品及樣本)100µL,37°C孵育1小時(shí);
3. 吸棄,加檢測溶液A100µL,37°C孵育1小時(shí);
4. 洗板3次;
5. 加檢測溶液B100µL,37°C孵育30分鐘;
6. 洗板5次;
7. 加TMB底物90µL,37°C孵育10-20分鐘;
8. 加終止液50µL,立即450nm讀數(shù)。
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樣品收集、處理及保存:
1).細(xì)胞培養(yǎng)上清:適用于檢測體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份。用無菌管收集細(xì)胞上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
2)細(xì)胞:用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次,調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104-106/ml 左右,通過反復(fù)凍融,使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,或者細(xì)胞超聲粉碎,離心取上清液檢測。
3)血清:在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測。
4)血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
5)體液:包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
6.)組織標(biāo)本:切取組織標(biāo)本,稱取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,收集上清進(jìn)行檢測。
樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
7)保存:如果樣品不能立即檢測,應(yīng)將其分裝,-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。血液標(biāo)本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
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檢測程序:
1. 加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100ul ,將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次,向?yàn)V紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0分鐘。
6. 洗板:同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ,置 37℃暗處反應(yīng)15 分鐘。
8. 每孔加入100ul 終止液混勻。
9. 30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450 nm處測吸光值。
核苷二磷酸激酶A(NDPK-A)elisa試劑盒操作步驟:
1)運(yùn)用前,將所有試劑充沛混勻。不要使液體發(fā)生很多的泡沫,防止加樣時(shí)參加很多的氣泡,發(fā)生加樣上的差錯(cuò)。
2)依據(jù)待測樣品數(shù)量加上規(guī)范品的數(shù)量決議所需的板條數(shù)。每個(gè)規(guī)范品和空白孔主張做復(fù)孔。每個(gè)樣品依據(jù)自個(gè)的數(shù)量來定,能運(yùn)用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后參加50ul于反響孔內(nèi)。
3)參加稀釋好后的規(guī)范品50ul于反響孔、參加待測樣品50ul于反響孔內(nèi)。當(dāng)即參加50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,悄悄振動(dòng)混勻,37℃溫育1小時(shí)。
4)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗刷液,振動(dòng)30秒,甩去洗刷液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。假如用洗板機(jī)洗刷,洗刷次數(shù)添加一次。
5)每孔參加80ul的親和鏈酶素-HRP,悄悄振動(dòng)混勻,37℃溫育30分鐘。
6)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗刷液,振動(dòng)30秒,甩去洗刷液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。假如用洗板機(jī)洗刷,洗刷次數(shù)添加一次。
7)每孔參加底物A、B各50ul,悄悄振動(dòng)混勻,37℃溫育10分鐘。防止光照。
8)取出酶標(biāo)板,敏捷參加50ul停止液,參加停止液后應(yīng)當(dāng)即測定成果。
9)在450nm波利益測定各孔的OD值。
正己烷(Standard for GC,>99.5%(GC))Phospho-IKKα/β (Ser176/180) Antibody II甲氧基-2,4,5-三氟甲酸
六烷(Standard for GC, ≥99.5% (GC))IKKγ (DA10-12) Mouse mAb溴代十六烷
1-庚(standard for GC,≥99.5%(GC))IKKγ (DA10-12) Mouse mAb6-氟-2-甲基喹啉
位庚內(nèi)酯(Standard for GC ,>98.5%(GC))FcγRIIB (D8F9C) XP® Rabbit mAb (Mouse Specific) (PE Conjuga)硬脂基溴
(+)-葑酮(standard for GC, ≥99.5% (GC))Phospho-B-Raf (Ser445) Antibody油
二丁(Standard for GC,≥99.5%(GC))Phospho-B-Raf (Ser445) Antibody硅凝膠
(GCS,>99.8%(GC))Phospho-MEK1 (Thr292) (D5L3K) Rabbit mAb溴甲酸甲酯
酸酯(Standard for GC,≥99.7%(GC))Phospho-IKKα/β (Ser176/180) (16A6) Rabbit mAb對基甲酸甲酯
異(Standard for GC,>99.5%)Phospho-IKKα/β (Ser176/180) (16A6) Rabbit mAb3,環(huán)戊烷戊二酰亞
異辛烷(Standard for GC,≥99.5%(GC))Phospho-IKKα/β (Ser176/180) (16A6) Rabbit mAb5-溴吡啶-甲
酸異酯(standard for GC,≥99.5%(GC))Podoplanin (LpMab-12) Mouse mAb2,二氟溴芐
異丁酸(Standard for GC,≥99.5%(GC))β-Canin (L87A12) Mouse mAbalpha-甲基-DL-氨酸
異戊(Standard for GC,>99%(GC))CUL4A Antibody2-溴芴
吲哚(standard for GC,>99.5%(GC))CUL4A Antibody氨基二烷
甲酸異丁酯(Standard for GC)Phospho-Zap-70 (Tyr319)/Syk (Tyr352) Antibody4,6-二甲氧基-2-甲磺?;奏?/span>
庚酸酯(standard for GC,≥99.5%(GC))Phospho-Zap-70 (Tyr319)/Syk (Tyr352) Antibody2-氟-吡啶
辛酸酯(Standard for GC,>99%(GC))Phospho-Zap-70 (Tyr319)/Syk (Tyr352) Antibody1-Boc-羥甲基吡咯烷
異辛(standard for GC, ≥99.5% (GC))Phospho-S6 Ribosomal Proin (Ser235/236) (D57.2.2E) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 700 Conjuga)2-基-4'-甲基聯(lián)
甲基基二硫 97%同源盒蛋白NOBOX抗體乙二丁 for HPLC-GC, ≥99.5% (GC)布魯塞爾德克酵母探針法熒光定量PCR試劑盒基二硫 95%轉(zhuǎn)錄因子NAC1抗體乙二丁 GR,99.5%枝孢霉通用探針法熒光定量PCR試劑盒2-吡基乙硫 98%神經(jīng)生長因子受體抗體乙二丁 AR,99.0%雞胚致死孤兒病探針法熒光定量PCR試劑盒3-甲基-2-丁硫 98%磷酸化KB抑制蛋白激酶ε乙二丁 CP,98.5%衣原體通用探針法熒光定量PCR試劑盒基基三硫 50%磷酸化神經(jīng)纖毛蛋白1抗體乙二乙 分析標(biāo)準(zhǔn)品, ≥99.8% (GC)潰瘍棒桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒2-甲基-3-硫乙酸酯 80%1型神經(jīng)纖維瘤抗體乙酸異酯 ≥99%, FCC, FG鯉皰疹病3型探針法熒光定量PCR試劑盒3-甲基-2-環(huán)己-1- 98%磷酸化1型神經(jīng)纖維瘤抗體乙酸異丁酯 99%中華枝睪吸蟲探針法熒光定量PCR試劑盒3-甲基-2-環(huán)戊-1- 97%中心粒蛋白Nudel抗體甲 99%斑點(diǎn)叉尾鮰病探針法熒光定量PCR試劑盒
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