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脂蛋白酯酶(LPL)可見分光光度法

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更新時間:2022-04-27 11:11:53瀏覽次數(shù):136次

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elisa檢測試劑盒
ATCC細(xì)胞
標(biāo)準(zhǔn)品
生化試劑
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培養(yǎng)基
感覺態(tài)細(xì)胞
PCR檢測試劑盒
細(xì)胞培養(yǎng)與轉(zhuǎn)染
質(zhì)粒
熒光定量PCR試劑盒
試劑盒
進口elisa試劑盒
科研抗體
科研菌種
生化檢測試劑盒
科研細(xì)胞
貨號 GOY-01S6662
脂蛋白酯酶(LPL)可見分光光度法檢測試劑盒公司正在出售的產(chǎn)品:81740-07-0白花前胡乙 規(guī)格: HPLC≥98%;10mg
4136-37-2蘇 規(guī)格: 20mg
158196-34-0柚皮-7-O-醛;Narin 規(guī)格: 10mg
油 規(guī)格: 1g
桑白皮 規(guī)格: 2g
卡嗪;Dacarbazine 規(guī)格: 20mg
485-72-3刺芒柄花 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/vial

28.png

商品屬性:

產(chǎn)品名稱

脂蛋白酯酶(LPL)可見分光光度法檢測試劑盒

規(guī)格

50管/24樣

檢測方法

可見分光光度法

貨號

GOY-01S6662

商品介紹:

測定意義

脂蛋白酯酶是脂肪細(xì)胞、心肌細(xì)胞、骨骼肌細(xì)胞、乳腺細(xì)胞及巨噬細(xì)胞等實質(zhì)細(xì)胞合成的一種酶,可催化甘油三脂水解為脂肪酸和單酸甘油酯,以供組織氧化供能和貯存,并在不同的組織表現(xiàn)出不同的生理意義。

測定原理

脂蛋白酯酶水解4-硝基苯棕櫚酸酯產(chǎn)生4-硝基,在400nm有特征吸收峰。

自備實驗用品及儀器

天平、冷凍離心機、研缽、水浴鍋、可見分光光度計、1 mL玻璃比色皿。

實驗方法學(xué):

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50100μl濕潤管壁,可抗凝人血35ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?/span>0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50100μl,可抗凝鼠血24ml。

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔510分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使25ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置12小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA。

選擇抗凝的注意點:

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

用于測定。

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脂蛋白酯酶(LPL)可見分光光度法檢測試劑盒乙二二 CP ,99%PE-Cy5.5標(biāo)記的羊抗小鼠IgM

乙二二 光譜純, ≥99.5%PE-Cy7標(biāo)記的羊抗小鼠IgM

乙二二 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.7% (GC)PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗小鼠IgM

乙二二 for HPLC, 99.5%PE-Cy7標(biāo)記的兔抗小鼠IgM

二乙二二  >99.0%(GC)PE標(biāo)記的羊抗小鼠IgM

二乙二二 standard for GC, ≥99.5% (GC)PE-Cy3標(biāo)記的羊抗小鼠IgM

二乙二二 ≥99.5% (GC)PE-CY5標(biāo)記的羊抗小鼠IgM

二乙二二 無水級, 99.5%APC標(biāo)記的羊抗小鼠IgM

二乙二二 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.7% (GC)PE-Cy3標(biāo)記的兔抗小鼠IgM

二乙二二 光譜級, ≥99%PE-CY5標(biāo)記的兔抗小鼠IgM

聚乙二二 average Mn ~250Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗小鼠IgM

四乙二二 99%堿性(AP)標(biāo)記的兔抗小鼠IgM

氧化 99.99% metals basis堿性(AP)標(biāo)記的羊抗小鼠IgM

氧化 99.999% metals basis辣根過氧化物標(biāo)記的兔抗豬IgG

氧化 AR,98%,200目膠體金標(biāo)記的兔抗豬IgG

操作步驟:

實驗開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應(yīng)預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高時,應(yīng)對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1.        加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.        棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3.        溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。

4.        每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5.        溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。

6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。

7.       依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8.       用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。

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