當前位置:上海谷研實業(yè)有限公司>>生化檢測試劑盒>>脂肪酸代謝系列>> ATP檸檬酸裂解酶(ACL)微量法檢測試劑盒
貨號 | GOY-01S6663 |
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商品介紹
測定意義 ACL(EC4.1.3.8)是脂肪酸合成中的關鍵酶,其催化產(chǎn)生的乙??捎糜谥舅岷铣珊吞兼溠娱L、黃酮類物質合成、氨基酸合成等。 測定原理: ACL在ATP和存在的情況下催化檸檬酸裂解為乙酰、草酰乙酸、腺苷二磷酸和磷酸鹽。蘋果酸脫氫酶進一步催化草酰乙酸和NADH生成蘋果酸和NAD+,在340nm測定NADH減少速率,計算ACL活性。 需自備的儀器和用品: 紫外分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水 |
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細閱讀購買說明!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測方法 | 貨號 |
100管/96樣 | 微量法 | GOY-01S6663 |
所需的儀器和用品:
可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:
建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗
樣本和試劑浪費!
1、樣本制備
① 組織樣本:
取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進行
勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。
【注】:若增加樣本量,可按照組織質量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進行提取
② 細菌/細胞樣本:
先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL
提取液,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次);
12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
【注】:若增加樣本量,可按照細菌/細胞數(shù)量(10
4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。
注意事項:
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時在冰上放置。
2、對照管只需要做一管。
3、若對照管吸光值大于 1,建議將試劑二用蒸餾水稀釋 7 倍后使用(10μL 試劑二原液+60μL蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數(shù)值在什么范圍?對照管的范圍是 0.4-1。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;
(2)沒有按順序加試劑;(3)反應時間不夠,可以延長反應時間(反應時間 30min可以延長到 40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應倍數(shù)。
若出現(xiàn)測定管大于對照管,可能是樣本中雜質的影響太大,為了降低雜質的影響一般
將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋 10倍后再測,通??梢允箿y定正常。
測定步驟:
1、 酶標儀預熱30min以上,調節(jié)波長至450nm。
2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內用完)。
5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑)
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測定。
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ATP檸檬酸裂解酶(ACL)微量法檢測試劑盒正癸 CP,98%Tn-C(Tenascin-C)C-Terminus 腱糖蛋白-C(固生蛋白)C端抗原猴腫瘤蛋白p63(TP63)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
二二氧硅烷 97%TNF-alpha 腫瘤壞死因子-α抗原猴胃泌素34(GT-34)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
十氫萘 98%TNF- Beta(Tumor Necrosis Factor- Beta) 腫瘤壞死因子-β抗原猴神經(jīng)絲蛋白3(NEF3)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
十氫萘 Standard for GC,>99.7%(GC,cis+trans)TNFAIP1(Tumor necrosis factor-alpha-induced protein 1) 腫瘤壞死因子α誘導蛋白1抗原猴N-乙酰半糖-6-硫酯(GAS)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
十氫萘 99%TP53(tumor protein p53; Li-Fraumeni syndrome) 抗腫瘤P53抗原猴BTG3關聯(lián)核蛋白(BANP)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
異辛 >99.0% (GC)TP I (topoisomerase I ) 拓普西異構Ⅰ抗原猴免疫球蛋白G Fc段低親和力受體IIIa(FcγR3A)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
1,2-乙二硫 97%TOPO II Alpha/DNA TP II Alpha (DNA topoisomerase II Alpha) DNA拓普西異構Ⅱ抗原猴微精蛋白β(MSMβ)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
甘油 ≥99.5%(GC)TPH (Trptophan Hydroxylase) 色氨羥化(多肽)猴增殖相關蛋白2G4 (PA2G4)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
正己 AR,99.0%TRA16 (Testicular orphan nuclear receptor-4 (TR4)-associated protein) 激素受體相關蛋白/孤兒素受體相關蛋白(抗原)猴軸突生長誘向因子4(Ntn4)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
1,6-己二 98%TRADD(TNF receptor 1 associated via death domain) 有死亡區(qū)的腫瘤壞死因子受體1相關蛋白抗原猴游離狀腺原氨(fT3)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
六亞二異酯 99%TRAF1 腫瘤壞死因子受體相關因子1抗原猴腦鈉素/腦鈉肽(BNP)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
異丁 99%TRAF2/TNF-R2 (TNF receptor-associated factor 2) 腫瘤壞死因子受體相關因子2抗原猴脂質運載蛋白2(LCN2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
異佛爾酮二異酯 99%TRAF3/CD40bp (CD40 binding protein) 腫瘤壞死因子受體相關蛋白3抗原猴Smad同源物7 (Smad7/MADH7)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
新戊二 99%TRAF6 (TNF receptor-associated factor 6) 腫瘤壞死因子受體相關因子6抗原猴BCL2修飾因子(BMF)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
壬 97%TRAIL/Apo2L (tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand) 腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體/凋亡素2配體抗原猴補體1q(C1q)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
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