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貨號(hào) | GOY-01S6567 |
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【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細(xì)閱讀購買說明!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測方法 | 貨號(hào) |
100管/96樣 | 微量法 | GOY-01S6567 |
商品介紹
測定意義 TH位于線粒體的內(nèi)膜上,又稱為線粒體復(fù)合體六,催化NADH+NADP+和NAD++NADPH相互轉(zhuǎn)化,調(diào)節(jié)線粒體NAD(H)和NADP(H)平衡。把逆向反應(yīng)稱為TH-2,催化NADPH和NAD+生成NADP+和NADH。 測定原理: NADH和NADPH均在340nm有特征吸收,因此TH催化的轉(zhuǎn)氫反應(yīng)不能導(dǎo)致340nm吸光度發(fā)生變化。用人工合成底物3-乙酰吡啶腺嘌呤二核苷酸(APAD+)替代NAD+,TH-2催化APAD+還原生成APADH,APADH在375nm有特征光吸收,測定375nm光吸收的增加速率,來計(jì)算TH-2活性。 需自備的儀器和用品: 可見分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。 |
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
所需的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)
樣本和試劑浪費(fèi)!
1、樣本制備
① 組織樣本:
取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行
勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。
【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進(jìn)行提取
② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本:
先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL
提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);
12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10
4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。
注意事項(xiàng):
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。
2、對(duì)照管只需要做一管。
3、若對(duì)照管吸光值大于 1,建議將試劑二用蒸餾水稀釋 7 倍后使用(10μL 試劑二原液+60μL蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測定管大于對(duì)照管,對(duì)照管數(shù)值在什么范圍?對(duì)照管的范圍是 0.4-1。對(duì)照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;
(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間 30min可以延長到 40min)。對(duì)照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測定管大于對(duì)照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般
將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋 10倍后再測,通??梢允箿y定正常。
Bacillus thuringiensis狼瘡抗凝IgM抗體檢測試劑盒
Bacillus thuringiensis固調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白裂解激活蛋白抗體檢測試劑盒
Bacillus thuringiensisIκB激-α檢測試劑盒
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Bacillus thuringiensis類白抗原CW7檢測試劑盒
Bacillus thuringiensis神經(jīng)元特異性烯化檢測試劑盒
轉(zhuǎn)氫酶2微量法檢測試劑盒β-萘酚 熒光指示劑, ≥99.0% (GC小鼠β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)免疫試劑盒EBV立即早期因BRLF1抗體SASH1 腫瘤抑制因PEPE1抗體
3,5-二-1-溴 98%小鼠β半糖苷(βGAL)免疫試劑盒腦表達(dá)X連鎖蛋白4抗體SART3 T淋巴識(shí)別的鱗狀癌SART3抗體
酮縮甘油 98%小鼠β氨己糖苷A(β-Hex A)免疫試劑盒B淋巴新型蛋白1抗體SART1 T淋巴識(shí)別的鱗狀癌抗原抗體
3,5-二異酯 97%小鼠β2微球蛋白(BMG/β2-MG)免疫試劑盒核突觸蛋白β抗體SARS S-protein 抗表面S蛋白抗體
N-鄰 99%小鼠β2糖蛋白1抗體IgA/G/M(β2-GP1 IgA/G/M)免疫試劑盒BTRC2蛋白抗體SARS putative orflab polyprotein 抗體
1,2,3,5-四 96%小鼠β1素能受體(β1AR)抗體免疫試劑盒BEND3蛋白抗體SARM1 SARM1蛋白抗體
1,2,3,5-四 分析標(biāo)準(zhǔn)品小鼠α羥丁脫氫(αHBDH)免疫試劑盒BEND4蛋白抗體Sarcomeric Alpha Actinin/ACTN2 α橫紋肌輔肌動(dòng)蛋白/α-SCA抗體
1,3,5-三 99%小鼠α葡萄糖苷(α-glucosidase)免疫試劑盒BEND6蛋白抗體SAPK3/MAPK12 應(yīng)激活化蛋白激3抗體(絲裂原活化蛋白激12)
1,3,5-三標(biāo)準(zhǔn)溶液 0.109mg/ml,體: 異辛烷小鼠α-黑色素激素(α-MSH)免疫試劑盒胎兒阿茲海默病抗原/核小體重塑因子抗體SAP62 剪接體相關(guān)蛋白62抗體
1,2,4,5-四 98%小鼠αS轉(zhuǎn)移(α-GST)免疫試劑盒巴爾得-別德爾綜合征相關(guān)蛋白2抗體SAP/Serum Amyloid P 血清淀粉樣蛋白P成份抗體
1,2,4,5-四標(biāo)準(zhǔn)溶液 0.104mg/ml,體:異辛烷小鼠α甘露糖苷(α Manase)免疫試劑盒巴爾得-別德爾綜合征相關(guān)蛋白5抗體SAMHD1/HDDC1/MOP5 單核蛋白5抗體
1,2,4,5-四 分析標(biāo)準(zhǔn)品小鼠αN已酰氨葡糖苷(αNAG)免疫試劑盒巴爾得-別德爾綜合征相關(guān)蛋白4抗體SAMDC S-腺苷蛋氨脫羧抗體
2,4,6-三 98%小鼠αL巖藻糖苷(AFU)免疫試劑盒巴爾得-別德爾綜合征相關(guān)蛋白7抗體SAMD9 SAMD9蛋白抗體
1,2,4,5-四標(biāo)準(zhǔn)溶液溶劑:小鼠αL艾杜糖苷(IDUA)免疫試劑盒巴爾得-別德爾綜合征相關(guān)蛋白9抗體SAMD7 SAMD7蛋白抗體
2,4-二硝 CP小鼠α2抗纖溶(α2-AP)免疫試劑盒巴爾得-別德爾綜合征相關(guān)蛋白10抗體SAMD3 SAMD3蛋白抗體
測定步驟:
1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至450nm。
2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。
5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑)
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測定。
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