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FDH甲醛脫氫酶檢測試劑盒微量法

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產(chǎn)品型號

品       牌其他品牌

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所  在  地上海市

更新時間:2022-04-11 10:24:18瀏覽次數(shù):374次

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貨號 FS-01S63234
FDH甲醛脫氫酶檢測試劑盒微量法公司正在出售的產(chǎn)品:尖鐮孢胡椒?;停ê房菸。┙M蛋白H3乙?;瘷z測試劑盒
三七組蛋白H3-K4乙?;瘷z測試劑盒
1934-21-0酒石黃組蛋白H3-K14乙?;瘷z測試劑盒
522-12-3標(biāo)準(zhǔn)品組蛋白H3-K18乙?;瘷z測試劑盒

公司產(chǎn)品僅用于科研提供的生化試劑盒,質(zhì)量信得過產(chǎn)品,售后完善。服務(wù)于高校及免疫學(xué)科研單位,竭誠為您提供更周到的服務(wù)更優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品。

產(chǎn)品名稱:FDH甲醛脫氫酶檢測試劑盒微量法

規(guī)格:100/96

檢測方法:微量法

貨號:FS-01S63234
商品介紹:

測定意義

甲醛是一種能與蛋白質(zhì)、核酸和脂類產(chǎn)生非特異性反應(yīng)的活潑化合物,對所有生物都具有很高毒性。甲醛脫氫酶作為含鋅中等鏈醇脫氫酶(ADH)的家庭成員之一,廣泛存在于原核和真核生物中,該酶能利用NAD+作為輔酶,將有毒的甲醛氧化,是甲醛氧化途徑中的關(guān)鍵酶。

測定原理

甲醛脫氫酶催化甲醛和NAD+產(chǎn)生NADH,在340nm處的吸光值會增加,測定340nm處的吸光值變化,可計算得到甲醛脫氫酶的活性。

自備實驗用品及儀器

天平、離心機、酶標(biāo)儀、96孔板、蒸餾水。

試劑的組成和配制:

提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;

試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;

試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;

試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;

試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
QQ截圖20220307153604.png

粗酶液提取:

1、細胞或組織樣品的制備:

培養(yǎng)細胞:先收集細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細胞數(shù)量(104個):提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1ml提取液),超聲波破碎細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1ml提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

2、血清(漿)樣品:直接檢測。

操作步驟:

實驗開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應(yīng)預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高時,應(yīng)對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1.        加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.        棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3.        溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。

4.        每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5.        溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。

6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。

7.       依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8.       用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進行檢測。

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豬腫瘤蛋白p63(TP63)聯(lián)免疫試劑盒裂褶Glucocorticoid Receptor (D8H2) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)

β肌動蛋白(β-actin)聯(lián)免疫試劑盒 香菇(L26)Anti-biotin (D5A7) Rabbit mAb (HRP Conjugate)

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甲狀腺受體相互作用蛋白15抗體Human CSNK2B(Casein kinase II subunit beta) ELISA Kit人28S抗核糖體抗體(28S rRNP)ELISA試劑盒, 28S rRNP ELISA kit

信號轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白亞基6抗體Human MSTN(Growth/differentiation factor 8) ELISA Kit人β2糖蛋白1抗體IgA/G/M(β2-GP1 IgA/G/M)ELISA試劑盒,β2-GP1 I

信號轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白亞基4抗體Human SFRP4(Secreted frizzled-related protein 4) ELISA Kit人16α羥基雌酮1(16-α OHE-1)ELISA試劑盒,16-α OHE-1 ELISA

心肌肌鈣蛋白抗體Human SLC25A20(Mitochondrial carnitine/acylcarnitine carrier protein) ELISA Kit人α淀粉(AMS/AMY)ELISA試劑盒,

CAP1抗體Human ETFβ(Electron transfer flavoprotein subunit beta) ELISA Kit人非神經(jīng)元性烯化(NNE)ELISA試劑盒,

-巨噬集落激因子3抗體Human NEBL(Nebulette) ELISA Kit人抗性磷5b(TRACP-5b)ELISA試劑盒,

 


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