PDC丙酮酸脫羧酶檢測試劑盒紫外分光光度法-上海撫生實業(yè)有限公司

貨號	FS-01S63227

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產(chǎn)品名稱：PDC丙酮酸脫羧酶檢測試劑盒紫外分光光度法

規(guī)格：50管/48樣

檢測方法：紫外分光光度法

貨號：FS-01S63227

商品介紹：

測定意義

PDC主要存在于酵母中，是乙醇發(fā)酵的關(guān)鍵酶之一，催化丙酮酸脫羧生成乙醛。

測定原理：

PDC催化丙酮酸脫羧生成乙醛，添加乙醇脫氫酶（ADH）來進一步催化 NADH還原乙醛生成乙醇和NAD+；NADH在340 nm有吸收峰，而NAD+沒有；通過測定340 nm光吸收下降速率，來計算PDC活性。

自備儀器和用品：

研缽、冰、臺式離心機、紫外分光光度計、1ml石英比色皿、可調(diào)式移液槍和雙蒸水。

操作步驟:

實驗開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。實驗前應(yīng)預測樣品含量，如樣品濃度過高時，應(yīng)對樣品進行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1. 加樣：分別設(shè)空白孔、標準孔、待測樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。

2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時內(nèi)配制），酶標板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4. 每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl，酶標板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶標板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準確性，底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。在加終止液后立即進行檢測。

粗酶液提?。?/span>

1、細胞或組織樣品的制備：

培養(yǎng)細胞：先收集細胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細胞數(shù)量（104個）：提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細胞加入1ml提取液），超聲波破碎細胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次）；8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1ml提取液），進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。

2、血清（漿）樣品：直接檢測。

試劑的組成和配制：
提取液：液體 100mL×1 瓶，4℃保存；

試劑一：液體 5mL×1 瓶，4℃保存；

試劑二：液體 200μL×1 支，4℃保存；

試劑三：液體 4mL×1 瓶，4℃保存；

試劑四：粉劑×2 瓶，4℃保存。
豬胸腺表達趨化因子(TECK/CCL25)試劑盒 Human WIPI1 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體RTA蛋白抗體

豬周期D2(CCND2)試劑盒 Human XAB2 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體GPR155蛋白抗體

豬血小板反應(yīng)蛋白1(TSP-1)試劑盒 Human MTX2(Metaxin-2) ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體GPR30蛋白抗體

豬卵泡受體(FSHR)試劑盒 Human WIPI2 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體GPR86蛋白抗體

豬髓鞘少突膠質(zhì)糖蛋白(MOG)試劑盒 Human WIT1 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體HM74蛋白抗體

豬強啡肽(Dyn)試劑盒 Human WNK4 ELISA Kit樣蛋白1樣蛋白抗體

豬二肽基肽X (DPP10)試劑盒 Human WNT3(Proto-oncogene Wnt-3) ELISA Kit磷化接頭蛋白Gab 2抗體

豬補體因子I(CFI)試劑盒Human WRAP53 ELISA Kit磷化接頭蛋白Gab2抗體

豬叉頭框蛋白P3(FOXP3)試劑盒Human WDR81 ELISA Kit干擾/維甲誘導凋亡相關(guān)基因抗體

豬ras同源物基因家族成員a(RHOA)試劑盒Human WRN ELISA Kit磷化接頭蛋白Gab 2抗體

豬核孔蛋白160kda(NUP160)試劑盒Human WRNIP1 ELISA Kit多肽N-乙?；肴樘寝D(zhuǎn)移13抗體

豬TATA框結(jié)合蛋白相關(guān)因子1(TAF1)試劑盒Human WDR92 ELISA Kit銜接蛋白γ/γ1-Adaptin抗體

豬前列腺內(nèi)過氧化物合1(PTGS1)試劑盒Human WIT1 ELISA Kit半乳糖瓦爾登轉(zhuǎn)化抗體

豬間隙連接蛋白26(CX26)試劑盒 Human WNK4 ELISA Kit半乳糖凝集10抗體

豬角蛋白17(CK17/KRT17)試劑盒 Human WNT3(Proto-oncogene Wnt-3) ELISA Kit半乳糖激2抗體
PDC丙酮酸脫羧酶檢測試劑盒紫外分光光度法硝鉍(III) 五水合物 AR ,99.0%BOC-D-2- 98%CAP1/Park7/DJ-1 Park7/DJ-1/CAP1抗原

硝鉍(III) 五水合物 ACS,≥98.0%BOC-D-4-溴 98%CAP2(Adenylyl cyclase-associated protein 2) 環(huán)化相關(guān)蛋白CAP-2抗原

硝鉍 CP,99.0%BOC-L-2-溴 98%TGF- Beta2 (Ttansforming Growth Factor – Beta2) 轉(zhuǎn)移生長因子–β2（抗原）

硝鉍(III) 五水合物 ≥99.99% metals basisBOC-L-3,4-二氯 98%TGF- Beta3 (Ttansforming Growth Factor – Beta3) 轉(zhuǎn)移生長因子–β3（抗原）

硝鉍(III) 五水合物 ≥99.995% metals basisBOC-D-3,4-二氯 98%TGF- Beta R2 peptide 轉(zhuǎn)移生長因子β受體2（多肽抗原）

咖啡 98%BOC-L-2-氯 98%Thymosin Alpha-1 胸 α-1 （胸腺Thymosin alpha-1）

咖啡 99%BOC-D-2-氯 98%Caspase-12 半胱蛋白蛋白-12(多肽)

咖啡分析標準品4-溴-2-甲氧基 98%Caspase-12(hunman) 半胱蛋白蛋白-12抗原(人)