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貨號 | FS-01S63227 |
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產(chǎn)品名稱:PDC丙酮酸脫羧酶檢測試劑盒紫外分光光度法
規(guī)格:50管/48樣
檢測方法:紫外分光光度法
貨號:FS-01S63227
商品介紹:
測定意義 PDC主要存在于酵母中,是乙醇發(fā)酵的關(guān)鍵酶之一,催化丙酮酸脫羧生成乙醛。 測定原理: PDC催化丙酮酸脫羧生成乙醛,添加乙醇脫氫酶(ADH)來進(jìn)一步催化 NADH還原乙醛生成乙醇和NAD+;NADH在340 nm有吸收峰,而NAD+沒有;通過測定340 nm光吸收下降速率,來計(jì)算PDC活性。 自備儀器和用品: 研缽、冰、臺式離心機(jī)、紫外分光光度計(jì)、1ml石英比色皿、可調(diào)式移液槍和雙蒸水。 |
操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高時,應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計(jì)算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。 1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。 2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。 3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。 5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。 7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。 8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進(jìn)行檢測。 |
粗酶液提?。?/span>
1、細(xì)胞或組織樣品的制備: 培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)胞數(shù)量(104個):提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)胞加入1ml提取液),超聲波破碎細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1ml提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。 2、血清(漿)樣品:直接檢測。 |
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
豬胸腺表達(dá)趨化因子(TECK/CCL25)試劑盒 Human WIPI1 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體RTA蛋白抗體
豬周期D2(CCND2)試劑盒 Human XAB2 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體GPR155蛋白抗體
豬血小板反應(yīng)蛋白1(TSP-1)試劑盒 Human MTX2(Metaxin-2) ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體GPR30蛋白抗體
豬卵泡受體(FSHR)試劑盒 Human WIPI2 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體GPR86蛋白抗體
豬髓鞘少突膠質(zhì)糖蛋白(MOG)試劑盒 Human WIT1 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體HM74蛋白抗體
豬強(qiáng)啡肽(Dyn)試劑盒 Human WNK4 ELISA Kit樣蛋白1樣蛋白抗體
豬二肽基肽X (DPP10)試劑盒 Human WNT3(Proto-oncogene Wnt-3) ELISA Kit磷化接頭蛋白Gab 2抗體
豬補(bǔ)體因子I(CFI)試劑盒Human WRAP53 ELISA Kit磷化接頭蛋白Gab2抗體
豬叉頭框蛋白P3(FOXP3)試劑盒Human WDR81 ELISA Kit干擾/維甲誘導(dǎo)凋亡相關(guān)基因抗體
豬ras同源物基因家族成員a(RHOA)試劑盒Human WRN ELISA Kit磷化接頭蛋白Gab 2抗體
豬核孔蛋白160kda(NUP160)試劑盒Human WRNIP1 ELISA Kit多肽N-乙?;肴樘寝D(zhuǎn)移13抗體
豬TATA框結(jié)合蛋白相關(guān)因子1(TAF1)試劑盒Human WDR92 ELISA Kit銜接蛋白γ/γ1-Adaptin抗體
豬前列腺內(nèi)過氧化物合1(PTGS1)試劑盒Human WIT1 ELISA Kit半乳糖瓦爾登轉(zhuǎn)化抗體
豬間隙連接蛋白26(CX26)試劑盒 Human WNK4 ELISA Kit半乳糖凝集10抗體
豬角蛋白17(CK17/KRT17)試劑盒 Human WNT3(Proto-oncogene Wnt-3) ELISA Kit半乳糖激2抗體
PDC丙酮酸脫羧酶檢測試劑盒紫外分光光度法硝鉍(III) 五水合物 AR ,99.0%BOC-D-2- 98%CAP1/Park7/DJ-1 Park7/DJ-1/CAP1抗原
硝鉍(III) 五水合物 ACS,≥98.0%BOC-D-4-溴 98%CAP2(Adenylyl cyclase-associated protein 2) 環(huán)化相關(guān)蛋白CAP-2抗原
硝鉍 CP,99.0%BOC-L-2-溴 98%TGF- Beta2 (Ttansforming Growth Factor – Beta2) 轉(zhuǎn)移生長因子–β2(抗原)
硝鉍(III) 五水合物 ≥99.99% metals basisBOC-L-3,4-二氯 98%TGF- Beta3 (Ttansforming Growth Factor – Beta3) 轉(zhuǎn)移生長因子–β3(抗原)
硝鉍(III) 五水合物 ≥99.995% metals basisBOC-D-3,4-二氯 98%TGF- Beta R2 peptide 轉(zhuǎn)移生長因子β受體2(多肽抗原)
咖啡 98%BOC-L-2-氯 98%Thymosin Alpha-1 胸 α-1 (胸腺Thymosin alpha-1)
咖啡 99%BOC-D-2-氯 98%Caspase-12 半胱蛋白蛋白-12(多肽)
咖啡 分析標(biāo)準(zhǔn)品4-溴-2-甲氧基 98%Caspase-12(hunman) 半胱蛋白蛋白-12抗原(人)
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