產(chǎn)品屬于：

產(chǎn)品名稱：Medium M3基礎(chǔ)培養(yǎng)基    

英文名稱：Medium M3

貨號：FS-02X0006

產(chǎn)品規(guī)格：500ml   
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

注意事項：

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

 Complement 1 Inhibitor (C1INH)補體1抑制因子(C1INH)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格：48T/96T

 Prostaglandin F Receptor (FP)前列腺F受體(FP)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格：48T/96T

 Prostaglandin E Receptor 2 (EP2)前列腺E受體2(EP2)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格：48T/96T

 Apolipoprotein C1 (APOC1)載脂蛋白C1(APOC1)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格：48T/96T

 Maltase Glucoamylase, Intestinal (MGA)麥芽糖糖化(MGA)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格：48T/96T

 Procollagen II C-Terminal Propeptide (PIICP)Ⅱ型前膠原羧基端原(PⅡCP)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格：48T/96T

 Annexin A5 (ANXA5)膜聯(lián)蛋白A5(ANXA5)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格：48T/96T

 Beta-2-Microglobulin (b2M)β2-微球蛋白(β2M)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格：48T/96T

 Transferrin Receptor 2 (TFR2)轉(zhuǎn)鐵蛋白受體2(TFR2)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格：48T/96T

 Centromere Protein H (CENPH)著絲粒蛋白H(CENPH)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格：48T/96T

 Linker For Activation Of T-Cell (LAT)T-細胞激活連接蛋白(LAT)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格：48T/96T

 Anti-SSB/La Antibody (Anti-La)抗SSB/La抗體(Anti-La)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格：48T/96T

 Centromere Protein E (CENPE)著絲粒蛋白E(CENPE)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格：48T/96T

 Connexin 43 (CX43)間隙連接蛋白43(CX43)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格：48T/96T

 Talin (TLN)踝蛋白(TLN)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格：48T/96T

 Calnexin (CNX)鈣聯(lián)蛋白(CNX)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格：48T/96T

 B-Cell Activation Factor Receptor (BAFFR)B-細胞激活因子受體(BAFFR)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格：48T/96T

 Histone H2A (H2A)組蛋白H2A(H2A)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格：48T/96T
Medium M3基礎(chǔ)培養(yǎng)基MARCH4  膜相關(guān)環(huán)指蛋白4抗體規(guī)格: 0.2ml

MARCH5  膜相關(guān)環(huán)指蛋白5抗體規(guī)格: 0.2ml

MARCH6  膜相關(guān)環(huán)指蛋白6抗體規(guī)格: 0.2ml

MARCH7/Axotrophin  膜相關(guān)環(huán)指蛋白7抗體規(guī)格: 0.2ml

MARCH8  膜相關(guān)環(huán)指蛋白8抗體規(guī)格: 0.2ml

MARCH9  膜相關(guān)環(huán)指蛋白9抗體規(guī)格: 0.2ml

MARCH10  膜相關(guān)環(huán)指蛋白10抗體規(guī)格: 0.2ml

MARCH11  膜相關(guān)環(huán)指蛋白11抗體規(guī)格: 0.2ml