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貨號 | FS-01S63322 |
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產(chǎn)品名稱:FRAP法總抗氧化能力檢測試劑盒微量法
規(guī)格:100管/96樣
檢測方法:微量法
貨號:FS-01S63322
商品介紹:
測定意義 測定對象中各種抗氧化物質(zhì)和抗氧化酶等構(gòu)成總抗氧化水平。在生物學(xué)、醫(yī)學(xué)和藥學(xué)研究中常常檢測血漿、血清、唾液、尿液等各種體液,細(xì)胞或組織等裂解液、植物或中草藥抽提液及各種抗氧化物(antioxidant)溶液的總抗氧化能力。 測定原理: 在酸性環(huán)境下,抗氧化物質(zhì)還原Fe3+-三吡啶三吖嗪(Fe3+-TPTZ)產(chǎn)生藍(lán)色的Fe2+-TPTZ的能力反映了總抗氧化能力。 自備實(shí)驗(yàn)用品: 恒溫水浴鍋、低溫離心機(jī)、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板和蒸餾水。 |
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
粗酶液提?。?/span>
1、細(xì)胞或組織樣品的制備: 培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)胞加入1ml提取液),超聲波破碎細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1ml提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。 2、血清(漿)樣品:直接檢測。 |
操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高時(shí),應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。 1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。 2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。 3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。 5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。 7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。 8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進(jìn)行檢測。 |
小鼠鉤端螺旋體IgG(Lep IgG)試劑盒 Human DPEP1(Dipeptidase 1) ELISA KitCD9蛋白抗體
小鼠白血病抑制因子受體(LIFR)試劑盒Human IFNA8(Interferon alpha-8) ELISA KitCD23/FcεRII抗體
小鼠白三烯C4(LTC4)試劑盒Human PRNP(Major prion protein) ELISA KitCD27抗體
小鼠T活化連接蛋白(LAT)試劑盒Human S100A10(Protein S100-A10) ELISA KitCD30抗體
小鼠脂蛋白脂(LPL)試劑盒Human STAT5B(Signal transducer and activator of transcription 5B) ELISA KitCD43抗體
小鼠脂蛋白a(Lp-a)試劑盒Human FZD4(Frizzled-4) ELISA KitCD48抗體
小鼠脂蛋白相關(guān)磷脂A2(Lp-PL-A2)試劑盒Human UBQLN1(Ubiquilin-1) ELISA KitCD44抗體
小鼠L解(PAL)試劑盒Human NFKB2(Nuclear factor NF-kappa-B p100 subunit) ELISA Kit整合αX抗體
小鼠黃體生成釋放(LHRH)試劑盒Human CCDC82(Coiled-coil domain-containing protein 82) ELISA Kit表面趨化因子受體5抗體
小鼠功能相關(guān)抗原3(LFA-3/CD58)試劑盒Human APOC4(Apolipoprotein C-IV) ELISA KitCD2抗體
小鼠趨化因子(Lptn/XCL1)試劑盒Human S100A2(Protein S100-A2) ELISA KitC-肽抗體
小鼠溶菌(LZM)試劑盒 Human COMT(Catechol O-methyltransferase) ELISA Kit鈣結(jié)合蛋白抗體
小鼠骨涎蛋白 (BSP)試劑盒Human CCT8L1P(Putative T-complex protein 1 subunit theta-like 1) ELISA KitC-反應(yīng)蛋白抗體
小鼠巨噬炎性蛋白1δ(MIP-1δ/CCL15)試劑盒 Human DHFR(Dihydrofolate reductase) ELISA KitC-反應(yīng)蛋白單克隆抗體
小鼠膜鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(FPN)試劑盒Human IFNA10(Interferon alpha-10) ELISA Kit環(huán)腺苷應(yīng)答元件結(jié)合蛋白抗體
FRAP法總抗氧化能力檢測試劑盒微量法異戊酯 97%桂乙酯 96%Anti-Phospho-EEF2 (Thr56) 磷化真核翻譯延長因子2抗體
乙芳樟酯 96%3- 99%Anti-EEF2k 真核延伸因子激2抗體
乙酰 AR,99.0%3- ≥98%, FCCAnti-Phospho-EEF2k (Ser366) 磷化真核延伸因子激2抗體
葉 98%3- GR,99%Anti-EGFR 表皮生長因子受體抗體
芳樟 98%3- 95%Anti-Phospho-EGFR(Ser1046/1047) 磷化表皮生長因子受體抗體
DL-乳 ACS, ≥85%3- ≥95%, FCCAnti-Phospho-EGFR(Thr669) 磷化表皮生長因子受體抗體
月桂 AR,98%異丁氧基乙酯 98%Anti-Phospho-EGFR(Tyr1045) 磷化表皮生長因子受體抗體
丁甲酯 Standard for GC,>99.5% (GC)異丁氧基乙酯 ≥98%, FCCAnti-Phospho-EGFR(Tyr1086) 磷化表皮生長因子受體抗體
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