產(chǎn)品屬于：

產(chǎn)品名稱：MEM（無酚紅）基礎(chǔ)培養(yǎng)基    

英文名稱：MEM（無酚紅）

貨號：FS-02X0004

產(chǎn)品規(guī)格：500ml   

細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

注意事項：

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

 Carbohydrate Antigen 19-9 (CA19-9)糖抗原19-9(CA19-9)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格：48T/96T

 Carbohydrate Antigen 242 (CA242)糖抗原242(CA242)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格：48T/96T

 Activin AB (ACVAB)激活A(yù)B(ACVAB)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格：48T/96T

 Squamous Cell Carcinoma Antigen 2 (SCCA2)鱗狀細胞癌抗原2(SCCA2)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格：48T/96T

 Alpha-2-Plasmin Inhibitor (a2PI)α2-纖溶抑制因子(α2PI)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格：48T/96T

 Tissue Polypeptide Antigen (TPA)組織多抗原(TPA)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格：48T/96T

 Ubiquitin (Ub)泛(Ub)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格：48T/96T

 Pepsinogen A (PGA)胃蛋白原A(PGA)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格：48T/96T

 Pepsinogen C (PGC)胃蛋白原C(PGC)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格：48T/96T

 Prostaglandin E Synthase, Microsomal (PTGES)前列腺E合(PTGES)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格：48T/96T

 Acid Phosphatase 3, Prostatic (ACP3)前列腺性磷(ACP3)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格：48T/96T

 Heat Shock Transcription Factor 4 (HSF4)熱休克轉(zhuǎn)錄因子4(HSF4)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格：48T/96T

 Transforming Growth Factor Beta 1 (TGFb1)轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGFβ1)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格：48T/96T

 Fatty Acid Binding Protein 8, Myelin (FABP8)髓鞘型脂肪結(jié)合蛋白(FABP8)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格：48T/96T

 Collagen Type III (COL3)Ⅲ型膠原(COL3)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格：48T/96T

 Collagen Type IV (COL4)Ⅳ型膠原(COL4)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格：48T/96T

 Elastase 2, Neutrophil (ELA2)中性粒細胞彈性蛋白(ELA2)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格：48T/96T

 Hyaluronic Acid (HA)透明質(zhì)(HA)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格：48T/96T
MEM（無酚紅）基礎(chǔ)培養(yǎng)基RanBP1  RAN結(jié)合蛋白1抗體規(guī)格: 0.2ml

RanBP2  RAN結(jié)合蛋白2/核孔蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml

ASZ1  錨定蛋白樣蛋白1抗體規(guī)格: 0.2ml

GDAP2  脂誘導(dǎo)分化相關(guān)蛋白2抗體規(guī)格: 0.2ml

LRCH1  富含亮重復(fù)家庭蛋白1抗體規(guī)格: 0.2ml

LRCH2  富含亮重復(fù)家庭蛋白2抗體規(guī)格: 0.2ml

LRCH3  富含亮重復(fù)家庭蛋白3抗體規(guī)格: 0.2ml

LRCH4  富含亮重復(fù)家庭蛋白4抗體規(guī)格: 0.2ml