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貨號(hào)	FS-01S63351

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公司產(chǎn)品僅用于科研提供的生化試劑盒，質(zhì)量信得過產(chǎn)品，售后完善。服務(wù)于高校及免疫學(xué)科研單位，竭誠為您提供更周到的服務(wù)更優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品。

產(chǎn)品名稱：DFR二氫黃酮醇還原酶檢測試劑盒微量法

規(guī)格：100管/48樣

檢測方法：微量法

貨號(hào)：FS-01S63351
商品介紹：

測定意義

二氫黃酮醇還原酶是類黃酮合成途徑中的一個(gè)關(guān)鍵酶，在決定植物的花色、葉色、果色和其他經(jīng)濟(jì)器官的色澤及其營養(yǎng)品質(zhì)方面起著重要作用。

測定原理：

二氫黃酮醇還原酶作用于二氫槲皮素產(chǎn)生兒茶素，可與香草縮合形成紅色化合物，在500nm處有特征吸收峰。

需自備的儀器和用品：

研缽、低溫離心機(jī)、震蕩儀、氮吹儀、可見分光光度計(jì)、1mL玻璃比色皿、水浴鍋、無水乙醇、乙酸乙酯。

操作步驟:

實(shí)驗(yàn)開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測樣品含量，如樣品濃度過高時(shí)，應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1. 加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4. 每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。在加終止液后立即進(jìn)行檢測。

粗酶液提取：

1、細(xì)胞或組織樣品的制備：

培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細(xì)胞加入1ml提取液），超聲波破碎細(xì)胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）；8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1ml提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。

2、血清（漿）樣品：直接檢測。

試劑的組成和配制：
提取液：液體 100mL×1 瓶，4℃保存；

試劑一：液體 5mL×1 瓶，4℃保存；

試劑二：液體 200μL×1 支，4℃保存；

試劑三：液體 4mL×1 瓶，4℃保存；

試劑四：粉劑×2 瓶，4℃保存。
小鼠B活化因子( BAFF/CD257)試劑盒Human TPS(Tryptase) ELISA Kit磷化皮層肌動(dòng)蛋白抗體

小鼠賴酰氧化(LOX)試劑盒 Human TNPO2(Transportin 2) ELISA Kit磷化周期B1抗體

小鼠單核趨化蛋白1(MCP-1)試劑盒Human TPPP(Tubulin Polymerization Promoting Protein) ELISA Kit磷化周期B1抗體

小鼠巨噬炎性蛋白1α(MIP-1α)試劑盒Human TNX(Tenascin X) ELISA Kit磷化cyclin D1抗體

小鼠巨噬炎性蛋白1β(MIP-1β)試劑盒 Human TP/TXA2R(Thromboxane Receptor) ELISA KitCD13肽N抗體

小鼠調(diào)節(jié)正常T表達(dá)和分泌因子(RANTES)試劑盒 Human TP(Thymidine Phosphorylase) ELISA Kit巨噬炎性蛋白MIP-3a抗體

小鼠腫瘤壞死因子受體超家族成員1A(TNFRSF1A)試劑盒Human TP5(Thymopentin) ELISA Kit間隙連接蛋白32抗體

小鼠單核趨化蛋白5(CCL12/MCP-5)試劑盒Human Total P53(Tumor Protein p53) ELISA KitC端結(jié)合蛋白1抗體

小鼠胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子(TARC)試劑盒Human TNKS1(Tankyrase 1) ELISA Kit高分子量角蛋白抗體

小鼠巨噬炎性蛋白3α(MIP-3α)試劑盒Human TNKS2(Tankyrase 2) ELISA Kit22號(hào)染色體開放閱讀框39抗體

小鼠巨噬來源的趨化因子(MDC/CCL22)試劑盒Human TNNC2(Troponin C Type 2) ELISA Kit周期G抗體

小鼠趨化(CHEM)試劑盒Human TNPO1(Transportin 1) ELISA KitCrk p38抗體

小鼠幾丁質(zhì)3樣蛋白1(CHI3L1)試劑盒Human TMSβ10(Thymosin Beta 10) ELISA Kit磷化Crk p38抗體

小鼠白介1受體I(IL-1R1)試劑盒Human TMSβ4(Thymosin Beta 4) ELISA Kit核心結(jié)合因子α1抗體(成骨特異性轉(zhuǎn)錄因子)Cbfα1

小鼠生長調(diào)節(jié)致癌基因α(GROα/CXCL1)試劑盒 Human TCC C5b-9(Terminal Complement Complex C5b-9) ELISA Kit膽囊收縮8抗體
DFR二氫黃酮醇還原酶檢測試劑盒微量法正己 AR,99.0%2-甲基-1-基-2- ≥97%Anti-DVL1 蓬亂蛋白1抗體

己葉酯 98%橡苔 98%Anti-Dynamin 2 動(dòng)力蛋白2抗體

己葉酯 98%，Kosher 甲基庚烯酮 98%Anti-Nadrin Dysbindin抗體

正庚 Standard for GC,>99.5%(GC)二甲基丁葉酯 98%Anti-Dysferlin Dysferlin蛋白抗體

正庚 99%二甲基丁葉酯 ≥98%, FCC, KosherAnti-E2F1 轉(zhuǎn)錄因子E2F-1抗體

正庚分析標(biāo)準(zhǔn)品，99.8%（GC)麥芽 ≥98.5%,natural, FGAnti-E2F2 轉(zhuǎn)錄因子E2F-2抗體

乙正己酯 99%橙花叔 97%, Mixture of cis and transAnti-E2F3 轉(zhuǎn)錄因子E2F-3抗體

乙正己酯 CP，98%橙花叔 ≥97.0%,Mixture of cis and trans, FCCAnti-E2F4 轉(zhuǎn)錄因子E2F-4抗體