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貨號 | FS-01S63347 |
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產(chǎn)品名稱:超氧陰離子清除能力檢測試劑盒微量法
規(guī)格:100管/96樣
檢測方法:微量法
貨號:FS-01S63347
商品介紹:
測定意義 超氧陰離子自由基作為生物體代謝過程中產(chǎn)生的一種自由基,可攻擊生物大分子,如脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、核酸和聚不飽和脂肪酸等,使其交鏈或者斷裂,引起細胞結(jié)構(gòu)和功能的破壞,與機體衰老和病變有很密切的關(guān)系,清除超氧陰離子自由基的研究已經(jīng)得到了廣泛的關(guān)注。 測定原理: AP-TEMED系統(tǒng)產(chǎn)生超氧陰離子,與鹽酸羥胺反應(yīng)生成NO2-,NO2-與對氨基苯磺酸和α-萘胺的作用生成紅色的偶氮化合物,在530nm處有特征吸收峰,樣品對超氧陰離子的清除能力與530nm的吸光值呈負相關(guān)。 自備實驗用品及儀器: 天平、低溫離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋。 |
操作步驟:
實驗開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應(yīng)預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高時,應(yīng)對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。 1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。 2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內(nèi)配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。 3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。 5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。 7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。 8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進行檢測。 |
粗酶液提?。?/span>
1、細胞或組織樣品的制備: 培養(yǎng)細胞:先收集細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細胞數(shù)量(104個):提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1ml提取液),超聲波破碎細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1ml提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。 2、血清(漿)樣品:直接檢測。 |
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
小鼠Sestrin 3蛋白 (SESN3) 試劑盒Human TFR2(Transferrin receptor protein 2) ELISA Kit表面趨化因子受體4相關(guān)蛋白2抗體
小鼠性別決定區(qū)Y框蛋白3(SOX3) 試劑盒Human GP5(Plaet glycoprotein V) ELISA Kit肉棕櫚?;D(zhuǎn)移2抗體
小鼠性結(jié)合球蛋白(SHBG)試劑盒Human KL(Klotho) ELISA Kit肉氧位甲基轉(zhuǎn)移抗體
小鼠唾液結(jié)合球蛋白樣凝集3(SIGLEC3) 試劑盒Human ULBP2(NKG2D ligand 2) ELISA KitIV型膠原α3結(jié)合蛋白抗體
小鼠唾液結(jié)合球蛋白樣凝集12(SIGLEC12)試劑盒 Human SEPT5(Septin-5) ELISA Kit肉棕櫚?;D(zhuǎn)移1B抗體
小鼠信號識別顆粒(SRP10)試劑盒Human TPH2(Tryptophan 5-hydroxylase 2) ELISA Kit膽27α羥化抗體
小鼠信號轉(zhuǎn)導(dǎo)子和轉(zhuǎn)錄激活子1(STAT1)試劑盒Human TPH1(Tryptophan 5-hydroxylase 1) ELISA Kit膽24α7羥化抗體
小鼠信號轉(zhuǎn)導(dǎo)子和轉(zhuǎn)錄激活子2(STAT2)試劑盒Human NDST2(Bifunctional heparan sulfate N-deacetylase/N-sulfotransferase 2) ELISA Kit色P450 4A1抗體
小鼠信號轉(zhuǎn)導(dǎo)子和轉(zhuǎn)錄激活子3(STAT3)試劑盒Human GAS1(Growth arrest-specific protein 1) ELISA Kit色P4504A22抗體(脂肪Ω羥化)
小鼠信號轉(zhuǎn)導(dǎo)子和轉(zhuǎn)錄激活子4(STAT4)試劑盒Human MASP2(Mannan-binding lectin serine protease 2) ELISA Kit周期蛋白依賴性激抑制劑2D抗體
小鼠信號轉(zhuǎn)導(dǎo)子和轉(zhuǎn)錄激活子5A(STAT5A)試劑盒Human APLN(Apelin) ELISA Kit膽24S-羥化
小鼠信號轉(zhuǎn)導(dǎo)子和轉(zhuǎn)錄激活子6B(STAT6B)試劑盒Human TFR2(Transferrin receptor protein 2) ELISA Kit豬瘟病抗體
小鼠信號轉(zhuǎn)導(dǎo)子和轉(zhuǎn)錄激活子6(STAT6)試劑盒Human ITGB1(Integrin beta-1) ELISA Kit色c氧化亞型2抗體
小鼠Smad同源物1(Smad1)試劑盒Human MEP1A(Meprin A subunit alpha) ELISA Kit周期G2抗體
小鼠鳥酰轉(zhuǎn)移(OCT)試劑盒Human BMX(Cytoplasmic tyrosine-protein kinase BMX) ELISA Kit銅藍蛋白抗體
超氧陰離子清除能力檢測試劑盒微量法乙鈣 AR,99%3,5-二芐氧基甲 98%Anti-PEDF /FITC 熒光標記色上皮源性因子抗體IgG
乙鈣 CP,98%3-羥基-2-甲 98%Anti-pEGFR(pTyr1068)/FITC 熒光標記抗磷化表皮生長因子受體抗體IgG
二甲基亞砜 for HPLC, ≥99.7%2-異氧基-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜烷 98%Anti-PEG3/FITC 熒光標記PEG3蛋白抗體IgG
乙 AR,99.0%過氧化氫 3500 units/mg Anti-PEG10 /FITC 熒光標記肝癌高表達基因抗體IgG
雙乙鈉 99%干冰,塊狀,146*88*20Anti-PENK/Enkephalin A/FITC 熒光標記腦啡肽抗體IgG
乙鈉,三水 AR,99%氫氣減壓閥Anti-Peptide YY/PYY/FITC 熒光標記酪酪肽抗體IgG
乙鈉,三水 GR,99.5%芐嘧磺隆 分析標準品Anti-PEPT1/FITC 熒光標記腸道肽轉(zhuǎn)運蛋白1/小肽轉(zhuǎn)運蛋白1抗體IgG
乙鈉,三水 ACS,99.0-101%胃蛋白(豬源) 1:3000Anti-PEPT2 /FITC 熒光標記腸道肽轉(zhuǎn)運蛋白2/小肽轉(zhuǎn)運蛋白2抗體IgG
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