TAN單寧酶檢測(cè)試劑盒微量法-上海撫生實(shí)業(yè)有限公司

貨號(hào)	FS-01S63345

商品介紹：

測(cè)定意義

單寧酶全稱(chēng)是單寧酯酰水解酶(Tannase，EC 3.1.1.20)，它可以水解沒(méi)食子酸單寧中的酯鍵和縮酚羧鍵，生成沒(méi)食子酸和葡萄糖。

測(cè)定原理：

使用抗氧化劑沒(méi)食子酸丙酯（PG）作為單寧酶酶促反應(yīng)的底物，在270nn下測(cè)定底物PG反應(yīng)前后的光密度變化,計(jì)算單寧酶酶活力。

需自備的儀器和用品：

紫外分光光度計(jì)、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿、研缽、冰、蒸餾水。

試劑的組成和配制：

提取液：液體 100mL×1 瓶，4℃保存；

試劑一：液體 5mL×1 瓶，4℃保存；

試劑二：液體 200μL×1 支，4℃保存；

試劑三：液體 4mL×1 瓶，4℃保存；

試劑四：粉劑×2 瓶，4℃保存。

公司產(chǎn)品僅用于科研提供的生化試劑盒，質(zhì)量信得過(guò)產(chǎn)品，售后完善。服務(wù)于高校及免疫學(xué)科研單位，竭誠(chéng)為您提供更周到的服務(wù)更優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品。

產(chǎn)品名稱(chēng)：TAN單寧酶檢測(cè)試劑盒微量法

規(guī)格：100管/48樣

檢測(cè)方法：微量法

貨號(hào)：FS-01S63345
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操作步驟:

實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量，如樣品濃度過(guò)高時(shí)，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋?zhuān)允瓜♂尯蟮臉悠贩显噭┖械臋z測(cè)范圍，計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1. 加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl（在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液（同檢測(cè)A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度（OD值）。在加終止液后立即進(jìn)行檢測(cè)。

粗酶液提?。?/span>

1、細(xì)胞或組織樣品的制備：

培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬(wàn)細(xì)胞加入1ml提取液），超聲波破碎細(xì)胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）；8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱(chēng)取約0.1g組織，加入1ml提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。

2、血清（漿）樣品：直接檢測(cè)。

小鼠Toll樣受體5（TLR-5）elisa試劑盒進(jìn)口試劑錐形赤褶菇2-2Porcine STAT5A (Signal Transducer and Activator of Transcription 5A) ELISA Kit

小鼠p53（p53）elisa試劑盒圖片胡頹子殼囊孢Porcine GPC2 (Glypican 2) ELISA Kit

小鼠基質(zhì)金屬蛋白3（MMP3）elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法根瘤Porcine CD30L (Cluster of Differentiation 30 Lligand) ELISA Kit

小鼠ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白A1（ABCA1）elisa試劑盒免費(fèi)代測(cè)黑木耳(黑29)Porcine LRP (Lung Resistance-Related Protein) ELISA Kit

大鼠同型半胱（Hcy）elisa試劑盒進(jìn)口試劑枯草芽孢桿枯草亞種Porcine SAA (Serum Amyloid A) ELISA Kit

大鼠脫氧吡/脫氧吡啉（DPD）elisa試劑盒免費(fèi)代測(cè)溶桿Porcine NXF1 (Nuclear RNA Export Factor 1) ELISA Kit

大鼠細(xì)胞間粘附分子3（ICAM-3）elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法假單胞屬Porcine GLUT4 (Glucose Transporter 4) ELISA Kit

大鼠胰蛋白原激活肽（TAP）elisa試劑盒運(yùn)輸?shù)矸郛a(chǎn)色鏈霉Porcine CA12 (Carbonic Anhydrase XII) ELISA Kit

大鼠脂蛋白磷脂A2（Lp-PL-A2）elisa試劑盒保存枯草芽孢桿枯草亞種Porcine PLA2G2D (Phospholipase A2, Group II D) ELISA Kit

大鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白C（SP-C）elisa試劑盒售后服務(wù)氈毛青霉Porcine ALCAM (Activated Leukocyte Cell Adhesion Molecule) ELISA Kit

0.25% Trypsin-EDTA （1X）, Penol Red（Gibco）枯草芽孢桿枯草亞種Porcine GLP-2 (Glucagon Like Peptide 2) ELISA Kit

胚肺二倍體細(xì)胞；HL紅球Porcine RLR (Retinoic Acid Inducible Gene/RIG-Like Receptor) ELISA Kit

EB病轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞；KMY0905貝葉多孔Porcine BAD (Bcl2 Associated Death Promoter) ELISA Kit

檸檬（CA）含量測(cè)試盒50管/48樣價(jià)格黑曲霉Porcine PKCζ (Protein Kinase C Zeta) ELISA Kit

焦磷：果糖-6-磷-1-磷轉(zhuǎn)移（PFP）測(cè)試盒100管/96樣規(guī)格白黃小脆柄菇Porcine C5a (Complement Component 5a) ELISA Kit
TAN單寧酶檢測(cè)試劑盒微量法硝鍶 99.99% metals basisFumitremorgin C 98%Anti-DCX/FITC 熒光標(biāo)記雙皮質(zhì)抗體IgG

碳鍶 SP灰黃霉 97%Anti-Phospho-Doublecortin (Ser297) /FITC 熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠等磷化雙皮質(zhì)抗體IgG

氟化鍶 SP格爾德霉 98%Anti-D-DIMER/FITC 熒光標(biāo)記交聯(lián)纖維蛋白二聚體抗體IgG

氟化鍶 99.99% metals basis除莠霉A 95%Anti-DDAH-II /FITC 熒光標(biāo)記雙甲基精水解2抗體IgG

鉬鈉 99.99% metal basisKazusamycin A 95%,70% 甲溶液Anti-DDB1/FITC 熒光標(biāo)記損傷DNA結(jié)合蛋白1抗體IgG

亞硝鈉 SP來(lái)普霉A 95%,甲溶液Anti-DDB2/FITC 熒光標(biāo)記損傷DNA結(jié)合蛋白2抗體IgG

無(wú)水硫鈉 SP來(lái)普霉B 5 μg/mL in methanol: water (7:3),95%Anti-DDC/FITC 熒光標(biāo)記多巴脫羧抗體IgG

二水 SP（劇品）嗜熱菌酵母 98%Anti-DEC-205/CD205/Ly75/FITC 熒光標(biāo)記CD205抗體IgG