GOD葡萄糖氧化酶檢測試劑盒可見分光光度法-上海撫生實業(yè)有限公司

貨號	FS-01S63305

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產(chǎn)品名稱：GOD葡萄糖氧化酶檢測試劑盒可見分光光度法

規(guī)格：50管/24樣

檢測方法：可見分光光度法

貨號：FS-01S63305
商品介紹：

測定意義

GOD（EC 1.1.3.4）廣泛存在于動物、和植物中，催化葡萄糖氧化生成葡萄糖酸，并產(chǎn)生H2O2，是生物體中產(chǎn)生活性氧的代謝途徑之一。

測定原理：

GOD催化產(chǎn)生H2O2，過氧化物酶在有氧存在時催化H2O2分解產(chǎn)生的氧又將鄰聯(lián)茴香胺氧化生成有色物質(zhì)，顏色深淺與葡萄糖氧化酶活性成線性關(guān)系。

試驗中所需的儀器和設(shè)備：

可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿/96孔板、研缽、冰、蒸餾水。

試劑的組成和配制：

提取液：液體 100mL×1 瓶，4℃保存；

試劑一：液體 5mL×1 瓶，4℃保存；

試劑二：液體 200μL×1 支，4℃保存；

試劑三：液體 4mL×1 瓶，4℃保存；

試劑四：粉劑×2 瓶，4℃保存。
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粗酶液提?。?/span>

1、細胞或組織樣品的制備：

培養(yǎng)細胞：先收集細胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細胞數(shù)量（104個）：提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細胞加入1ml提取液），超聲波破碎細胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）；8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1ml提取液），進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。

2、血清（漿）樣品：直接檢測。

操作步驟:

實驗開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。實驗前應(yīng)預(yù)測樣品含量，如樣品濃度過高時，應(yīng)對樣品進行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1. 加樣：分別設(shè)空白孔、標準孔、待測樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。

2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時內(nèi)配制），酶標板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4. 每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl，酶標板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶標板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準確性，底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。在加終止液后立即進行檢測。

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GOD葡萄糖氧化酶檢測試劑盒可見分光光度法正丁農(nóng)殘級十八 ≥97.0% (GC)MKK3(MAP Kinase Kinase 3) 絲裂原活化蛋白激MKK3/6抗原

正丁用于分子生物學(xué), ≥99%辛 99%P53(wt-p53) 腫瘤抑制基因抗原（野生型P53）

正丁光譜純, 99.5%十八 ≥99.0% (GC)Mtp53(Mutant type p53) 突變型P53抗原

正丁 ≥99.9%, FCC1,3-二 98%WIG-1(wtp53-induced gene 1) 野生型p53誘導(dǎo)基因1抗原

ACS，≥99.5%聚二烯二甲基氯化銨溶液 Mw <100,000 ,35 wt. % 水溶液，100-200P73 protein P73腫瘤抑制基因抗原

2-丁酮 AR, ≥99%聚二烯二甲基氯化銨溶液Mw 100,000-200,000 ,20 wt. % 水溶液，6p70 S6 Kinase/P70 Beta1 p70S6Kb抗原

2-丁酮 CP,99.0% (劇品)Mw 200,000-350,000 ,20 wt. % 水溶液，250-500 cP (25 °C) PALB2(partner and locaizer of BRCA2) 癌易感基因相關(guān)蛋白2

2-丁酮 for HPLC, ≥99.7%Mw 400,000-500,000 ,20 wt. %水溶液，800-1000 cP (25 °C) PAFR/PTAFR 血小板活化因子受體抗原