植物花色苷檢測(cè)試劑盒微量法-上海撫生實(shí)業(yè)有限公司

貨號(hào)	FS-01S63341

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公司產(chǎn)品僅用于科研提供的生化試劑盒，質(zhì)量信得過產(chǎn)品，售后完善。服務(wù)于高校及免疫學(xué)科研單位，竭誠(chéng)為您提供更周到的服務(wù)更優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品。

產(chǎn)品名稱：植物花色苷檢測(cè)試劑盒微量法

規(guī)格：100管/96樣

檢測(cè)方法：微量法

貨號(hào)：FS-01S63341
商品介紹：

測(cè)定意義

花色苷是一類易溶于極性溶劑的天然色素，屬黃酮類化合物。花色苷廣泛存在于植物的根、莖、葉、花和果實(shí)中，使其呈現(xiàn)由紅到紫等不同顏色，是植物主要的呈色物質(zhì)。

測(cè)定原理：

采用pH示差法測(cè)定花色苷含量，當(dāng)pH為1.0時(shí)花色苷在530nm處有最大吸收峰,而當(dāng)pH為4.5時(shí),花色苷轉(zhuǎn)變?yōu)闊o色查爾酮形式,在530處無吸收峰, 利用此特性分別測(cè)定在不同pH下的530nm和700nm處的吸光度值。pH示差法減少了溶液pH和溶劑差異的影響，排除了其他非花色苷類物質(zhì)對(duì)檢測(cè)結(jié)果的干擾。

需自備的儀器和用品：

可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽和蒸餾水。

操作步驟:

實(shí)驗(yàn)開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量，如樣品濃度過高時(shí)，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍，計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1. 加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl（在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液（同檢測(cè)A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度（OD值）。在加終止液后立即進(jìn)行檢測(cè)。

粗酶液提取：

1、細(xì)胞或組織樣品的制備：

培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細(xì)胞加入1ml提取液），超聲波破碎細(xì)胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）；8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1ml提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。

2、血清（漿）樣品：直接檢測(cè)。

試劑的組成和配制：
提取液：液體 100mL×1 瓶，4℃保存；

試劑一：液體 5mL×1 瓶，4℃保存；

試劑二：液體 200μL×1 支，4℃保存；

試劑三：液體 4mL×1 瓶，4℃保存；

試劑四：粉劑×2 瓶，4℃保存。
小鼠八聚體結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子2(OBTF2)試劑盒Human UBE3A(Ubiquitin-protein ligase E3A) ELISA KitC型凝集結(jié)構(gòu)域家族9成員A抗體

小鼠嗅質(zhì)蛋白4(OLFM4)試劑盒Human ENTPD1(Ectonucleoside triphosphate diphosphohydrolase 1) ELISA Kit腦鈣粘蛋白12抗體

小鼠內(nèi)凝集蛋白1(ITLN1)試劑盒 Human MAPK8(Mitogen-activated protein kinase 8) ELISA Kit鈣粘蛋白20抗體

小鼠癌蛋白誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄物3(OIT3)試劑盒Human CHIA(Acidic mammalian chitinase) ELISA Kit鈣粘蛋白29抗體

小鼠抑瘤M(OSM)試劑盒Human AVPR1B(Vasopressin V1b receptor) ELISA KitCD200受體抗體

小鼠食欲A/阿立新A(OXA)試劑盒Human LILRB2(Leukocyte immunoglobulin-like receptor subfamily B member 2) ELISA Kit鈣粘蛋白26抗體

小鼠鳥脫羧(ODC)試劑盒Human HOGA1(Probable 4-hydroxy-2-oxoglutaRate aldolase, mitochondrial) ELISA Kit鈣粘蛋白14抗體

小鼠孤腓肽(OFQ/N)試劑盒 Human UNC5C(Netrin receptor UNC5C) ELISA Kit鈣激活氯離子通道蛋白3抗體

小鼠核因子κB抑制蛋白α(IκBα)試劑盒Human SUSD2(Sushi domain-containing protein 2) ELISA KitCD200受體抗體

小鼠骨鈣(OC/BGP)試劑盒Human MTPAP(Poly(A) RNA polymerase, mitochondrial) ELISA Kit彈性蛋白1抗體

小鼠破骨相關(guān)受體(OSCAR)試劑盒Human ZNF654(Zinc finger protein 654) ELISA Kit干生長(zhǎng)因子受體/表面分化抗原抗體

小鼠破骨分化因子(ODF)試劑盒 Human ERN1(Serine/threonine-protein kinase/endoribonuclease IRE1) ELISA KitCD99樣蛋白2抗體

小鼠骨粘連蛋白(ON)試劑盒Human COQ10A(Coenzyme Q-binding protein COQ10 homolog A, mitochondrial) ELISA Kit鈣粘蛋白相關(guān)蛋白CTNNA3抗體

小鼠骨保護(hù)配體(OPGL)試劑盒Human PIN1(Peptidyl-prolyl cis-trans isomerase NIMA-interacting 1) ELISA Kit緊密連接蛋白15抗體

小鼠卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)試劑盒Human CES5A(Carboxylesterase 5A) ELISA Kit緊密連接蛋白12抗體
植物花色苷檢測(cè)試劑盒微量法蕈型乙酰膽受體（抗原）Anti-ARMCX1 Antibody陳皮炭Chen Pitan

C-肽（C肽）Anti-ARL2BP Antibody人工虎骨Artificial?bones

鈣結(jié)合蛋白（抗原）Anti-ARMCX2 Antibody白薇Bai Wei

腺苷受體A3抗原Anti-ARMCX3 Antibody全葉青蘭All Ye Qinglan

巨噬來源的趨化因子αV多肽Anti-ARNT2 Antibody土鱉蟲（冀地鱉）Woodlouse?（Hebei?Eupolyphaga sinensis）

磷化腺苷單磷活化蛋白激α1抗原Anti-ARPP21 Antibody紫草（新疆紫草）Gromwell?（Lithospermum?Xinjiang）

環(huán)腺苷應(yīng)答元件結(jié)合蛋白（抗原）Anti-ARPP21 Antibody黃根Huang Gen

磷化環(huán)腺苷應(yīng)答元件結(jié)合蛋白（多肽）Anti-ARRDC2 Antibody猴棗Hou Zao

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