H2O2過氧化氫可見分光光度法-上海撫生實(shí)業(yè)有限公司

貨號(hào)	FS-01S63296

公司產(chǎn)品僅用于科研提供的生化試劑盒，質(zhì)量信得過產(chǎn)品，售后完善。服務(wù)于高校及免疫學(xué)科研單位，竭誠為您提供更周到的服務(wù)更優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品。

規(guī)格：50管/48樣

檢測方法：可見分光光度法

貨號(hào)：FS-01S63296
商品介紹：

測定意義

H2O2是生物體內(nèi)最常見的活性氧分子，主要由SOD和XOD等催化產(chǎn)生，由CAT和POD等催化降解。H2O2不僅是重要的活性氧之一，也是活性氧相互轉(zhuǎn)化的樞紐。一方面，H2O2可以直接或間接地氧化細(xì)胞內(nèi)核酸，蛋白質(zhì)等生物大分子，并使細(xì)胞膜遭受損害，從而加速細(xì)胞的衰老和解體；另一方面H2O2也是許多氧化應(yīng)急反應(yīng)中的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子。

測定原理：

H2O2與硫酸鈦生成黃色的過氧化鈦復(fù)合物，在415nm有特征吸收。

需自備的儀器和用品：

可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿/96孔板、丙酮60mL、濃鹽酸10mL、研缽和冰。

試劑的組成和配制：

提取液：液體 100mL×1 瓶，4℃保存；

試劑一：液體 5mL×1 瓶，4℃保存；

試劑二：液體 200μL×1 支，4℃保存；

試劑三：液體 4mL×1 瓶，4℃保存；

試劑四：粉劑×2 瓶，4℃保存。
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粗酶液提?。?/span>

1、細(xì)胞或組織樣品的制備：

培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細(xì)胞加入1ml提取液），超聲波破碎細(xì)胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）；8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1ml提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。

2、血清（漿）樣品：直接檢測。

操作步驟:

實(shí)驗(yàn)開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測樣品含量，如樣品濃度過高時(shí)，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1. 加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4. 每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。在加終止液后立即進(jìn)行檢測。

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小鼠兒茶抑（CAT）elisa試劑盒免費(fèi)代測貝氏葡萄座腔梨專化型Monkey TSP1 (Thrombin Sensitive Protein 1) ELISA Kit

小鼠凝集樣氧化低密度脂蛋白受體1（LOX-1）elisa試劑盒運(yùn)輸綠色木霉Monkey NRG-3 (Neuregulin 3) ELISA Kit

小鼠半乳凝1（GAL1）elisa試劑盒運(yùn)輸大杯傘Monkey MYOG (Myogenin) ELISA Kit

小鼠左右決定因子1（LEFTY1）elisa試劑盒售后服務(wù)纖維單胞屬M(fèi)onkey GTF2B (General Transcription Factor IIB) ELISA Kit

小鼠組織金屬蛋白抑制因子4（TIMP4）elisa試劑盒進(jìn)口試劑島青霉Monkey C4BPβ (C4 Binding Protein Beta) ELISA Kit
H2O2過氧化氫檢測試劑盒可見分光光度法溴甲菲 95%亞硝-15N 豐度:99atom％;化學(xué)純度:≥98.5％CDl4(Human cluster Of differentiation) ELISA Kit 人CD14分子

2,3-二氯甲 98.0%間二-15N2 豐度:10atom％;化學(xué)純度:≥98.5％AIF(Human apoptosis inducing factor) ELISA Kit 人凋亡誘導(dǎo)因子

二硫代甘 97%間二-15N2 豐度:99atom％;化學(xué)純度:≥98.5％LCA/CD45(Human leukocyte common antigen) ELISA Kit 人白共同抗原

2,2-二氟-1,3-二甲基-咪唑烷 97%豐度：10atom％；化學(xué)純度：≥98.5％CD4(Human cluster Of differentiation) ELISA Kit 人CD4分子

N,N-二甲基烯基 98%豐度：99atom％；化學(xué)純度：≥98.5％P-cad(Human Placenta Cadherin) ELISA Kit 人P鈣黏蛋白/胎盤鈣黏蛋白

2-(2-乙基)二二乙酯 98% 豐度：99atom％；化學(xué)純度：≥98.5％KGF(Human Keratinocyte Growth Factor) ELISA Kit 人角化生長因子

1-乙基吡鹽鹽 98%豐度：10atom％；化學(xué)純度：≥98.5％PDGF-BB(Human Plaet-Derived Growth Factor-BB) ELISA kit 人血小板衍生生長因子BB

聚乙烯亞 M.W. 70,000, 50%水溶液豐度：10atom％；化學(xué)純度：≥98％ CXCL16(Human CXC-chemokine ligand 16) ELISA Kit 人CXC趨化因子配體16

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