產品屬于：

產品名稱：原代精原細胞培養(yǎng)體系    

產品規(guī)格：100ml/500ml

貨號：FS-01X9978

保存溫度（℃）：2-8℃/-20℃

運輸溫度（℃）：2-8℃/-20℃   
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

注意事項：

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

 Melanoma Cell Adhesion Molecule (MCAM)黑瘤細胞黏附分子(MCAM)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格：48T/96T

 Protein Kinase, AMP Activated Beta 1 (PRKAb1)AMP激活蛋白激β1(PRKAβ1)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格：48T/96T

 Pulmonary Activation Regulated Chemokine (PARC)肺部激活調節(jié)趨化因子(PARC)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格：48T/96T

 Transportin 1 (TNPO1)轉運蛋白1(TNPO1)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格：48T/96T

 Insulin Like Growth Factor Binding Protein 6 (IGFBP6)胰島樣生長因子結合蛋白6(IGFBP6)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格：48T/96T

 Interleukin 12B (IL12B)白介12B(IL12B)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格：48T/96T

 Gonadotropin Releasing Hormone Receptor (GnRHR)促性腺釋放受體(GnRHR)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格：48T/96T

 Progesterone Receptor (PGR)孕受體(PGR)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格：48T/96T

 Kallikrein 1 (KLK1)激釋放1(KLK1)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格：48T/96T

 General Transcription Factor IIF, Polypeptide 1 (GTF2F1)通用轉錄因子ⅡF1(GTF2F1)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格：48T/96T

 TATA Box Binding Protein Associated Factor 2 (TAF2)TATA框結合蛋白關聯(lián)因子2(TAF2)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格：48T/96T

 Phosvitin (PV)卵黃高磷蛋白(PV)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格：48T/96T

 Immunoglobulin G2 (IgG2)免疫球蛋白G2(IgG2)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格：48T/96T

 Suppressors Of Cytokine Signaling 3 (SOCS3)細胞因子信號轉導抑制因子3(SOCS3)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格：48T/96T

 Integrin Alpha M (ITGaM)整合αM(ITGαM)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格：48T/96T

 Integrin Alpha M (ITGaM)整合αM(ITGαM)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格：48T/96T

 B-Cell Activating Factor (BAFF)B-細胞激活因子(BAFF)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格：48T/96T

 High Density Lipoprotein (HDL)高密度脂蛋白(HDL)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格：48T/96T
原代精原細胞培養(yǎng)體系Tankyrase  端粒調控因子抗體規(guī)格: 0.2ml

ART5  二磷腺核糖基轉移5抗體規(guī)格: 0.2ml

ASB13  含錨蛋白重復序列-細胞因子信號抑制物盒蛋白家族13抗體規(guī)格: 0.2ml

ASC2/POP1  感染性蛋白蛋白1抗體規(guī)格: 0.2ml

ATAD3A/B/C  三磷腺家族蛋白3A抗體規(guī)格: 0.2ml

MAP4K6/MINK1  絲裂原活化蛋白激MAP4K6抗體規(guī)格: 0.1ml

ATAD2  三磷腺家族蛋白2抗體規(guī)格: 0.2ml

ASMTL  ASMTL蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml