1. 常規(guī)樣品污染色譜柱清洗與再生方法
2.金屬離子污染色譜柱的清洗
磷酸和0. 1 mol /L檸檬酸對色譜柱上吸附的金屬離子具有較好的清洗效果,因此常被人們用來清洗被金屬離子污染的色譜柱。
3.蛋白質污染色譜柱的清洗
現(xiàn)常用方法是用不含緩沖鹽的流動相
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0. 1%TFA(三)水溶液
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乙腈: 異丙醇( 1:2, V /V,含0. 1% TFA)
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流動相沖洗20倍柱體積。
二、正相色譜柱的清洗與再生
Thermo 公司:硅膠、氧化鋁、極性鍵合相色譜柱按以下方法沖洗: 3- 甲基戊烷或己烷
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三氯乙烷
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乙酸乙脂
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丙酮
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乙醇
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水,然后以這些溶劑逆序沖洗,最后以流動相平衡。
Ag ilent公司:用甲醇: 氯仿( 50:50, V /V )
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乙酸乙酯反沖色譜柱,然后再按正方向用流動相平衡。常規(guī)硅膠或硅膠基質正相色譜柱,也可依次以四氫呋喃、甲醇、四氫呋喃、二氯甲烷和無苯正己烷沖洗40~ 60倍柱體積。
三、離子交換色譜柱的清洗與再生
陰離子交換色譜柱:依利特及Thermo公司推薦用水
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甲醇
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氯仿沖洗。
陽離子交換色譜:首先以水沖洗, 并在沖洗過程中注射4等份200 uL二甲基亞砜,再用四氫呋喃沖洗。
四、體積排阻色譜柱的清洗與再生
流速需低于50%推薦流速,每種溶液沖洗10~ 15倍柱體積即可,更換清洗溶劑時需用3~ 5倍柱體積去離子水將色譜柱沖洗干凈。
通常體積排阻色譜柱上離子性吸附的堿性雜質可用高濃度中性鹽溶液(如0.5mo l/L硫酸鈉溶液)去除; 含有機溶劑(如10~20%的甲醇、乙腈、乙醇等) 的緩沖溶液(如50mmo l /L磷酸鹽緩沖液, pH = 7. 0)可洗脫吸附的疏水性雜質; 吸附的雜質, 可在清洗溶劑中添加尿素、中性表面活性劑( 6~ 8 mo l/L 的尿素或0. 2 ~0.3%的中性表面活性劑)進行洗脫。
五、其他色譜柱的清洗與再生
對受污染的糖醇色譜柱用0. 2 mol /L硝酸鈣溶液作為流動相,在85℃下,流速為0. 2mL /m in,反相沖洗色譜柱24 h,然后在相同條件下用10~ 20倍柱體積水沖洗,可取得較好的再生效果,延長色譜柱使用壽命。
技術參數(shù):
清洗溶劑數(shù)量:六種溶劑可供選擇。
溶劑選擇裝置:六選一溶劑選擇裝置,可承受負壓達-90Kpa,可實現(xiàn)六種溶劑選擇;可擴展為八種溶劑選擇,由Auto Column Cleaning System軟件控制其開啟和關閉
溶劑輸送系統(tǒng):采用電子微處理器,浮動柱塞設計,電子壓力脈動抑制技術,雙柱塞串聯(lián)式往復泵
柱塞清洗:雙柱塞連續(xù)自動清洗
溶劑輸送流速范圍:0.001~4.999 ml/min,增量: 0.001ml/min
溶劑輸送壓力:42Mpa(6000psi)
壓力脈動:<0.1%
溶劑流量精度:±0.5%
溶劑流量重復性:RSD≤0.2%
溶劑輸送系統(tǒng)保護:慢速啟動、停止(低于最小壓力2min)最小壓力可調
溶劑輸送系統(tǒng)的管路連接:1/16”管路連接
溶劑輸送系統(tǒng)控制:操作軟件控制,RS323同步控制,可遠距離控制
色譜柱選擇數(shù)量:最多10支,可自動選擇,
色譜柱選擇閥:10通選擇,含位置辨識感應器
選擇閥壓力:35Mpa(345bar,5000psi)
選擇閥控制:由Auto Column Cleaning System軟件控制
色譜柱規(guī)格:各種液相色譜柱,長度為50mm~250mm均可
控制軟件:軟件整合控制溶劑選擇系統(tǒng)、溶劑輸送系統(tǒng)和色譜柱選擇系統(tǒng),同時能實時反映工作狀態(tài),自動報告清洗再生結果,同時顯示出來,可以生成文本文件,連接打印機可打印報告。
電腦控制:Windows8、Windows7、XP或者Vista操作系統(tǒng)