本產(chǎn)品線性范圍寬，96孔板中，在12個至10萬個細胞范圍內(nèi)有良好的線性關系。不同細胞的檢測數(shù)量上限會有顯著不同。如果檢測的細胞數(shù)量不超過3萬，也可使用性價比更高但線性范圍略窄的CellTiter-Lumi™發(fā)光法細胞活力檢測試劑盒(C0065)。
本產(chǎn)品的性能達到甚至在有些方面優(yōu)于國外同類產(chǎn)品。本產(chǎn)品的性能和用途與Promega公司的CellTiter-Glo ^® Luminescent Cell Viability Assay(簡稱CellTiter-Glo^®或CTG)和CellTiter-Glo ^® 2.0 Assay(簡稱CellTiter-Glo ^®2.0或CTG2.0)基本相同，本產(chǎn)品的檢測效果及與國外同類產(chǎn)品Competitor P及Competitor P2.0的檢測效果比較參見圖1，在發(fā)光強度和對于某些細胞的線性范圍有顯著的優(yōu)勢。
本產(chǎn)品發(fā)光強度高。對于相同的細胞樣品，本產(chǎn)品的發(fā)光效果比國外同類產(chǎn)品Competitor P或Competitor P2.0強約40-99%，實測效果的差異會因細胞種類的不同有所不同，例如對于NIH3T3和HeLa細胞的檢測，CTL Plus的發(fā)光效果比國外同類產(chǎn)品Competitor P或Competitor P2.0強約60-99%；而對于Jurkat細胞的檢測，CTL Plus的發(fā)光效果則比國外同類產(chǎn)品Competitor P或Competitor P2.0強約40-50% (圖1D)。
本產(chǎn)品檢測靈敏度高，線性范圍寬，可以在12個至10萬個細胞范圍內(nèi)呈現(xiàn)良好的線性關系。使用本產(chǎn)品檢測細胞數(shù)量僅為25個/孔時，發(fā)光強度可達空白孔的2倍左右。對于某些細胞，例如HeLa細胞等，CTL Plus有非常的線性范圍，標準曲線的斜率在12-400個細胞和在12-100,000個細胞范圍內(nèi)基本相同(圖1A、1B，斜率分別為43.434和43.890)，但國外同類產(chǎn)品Competitor P標準曲線的斜率在12-400個細胞和在12-100,000個細胞范圍內(nèi)發(fā)生了非常顯著變化(圖1A、1B，斜率分別為29.493和20.765)。本產(chǎn)品與國外同類產(chǎn)品Competitor P、Competitor P2.0的檢測效果比較參見圖1。

圖1. 本產(chǎn)品CellTiter-Lumi™ Plus Luminescent Cell Viability Assay Kit (CTL Plus)和國外同類競爭產(chǎn)品Competitor P、Competitor P2.0對不同細胞的檢測效果。圖A-C為CTL Plus和Competitor P對不同數(shù)量HeLa細胞在白色96孔板中的檢測效果，圖D為CTL Plus、Competitor P和Competitor P2.0對10萬個/孔NIH3T3、HeLa和Jurkat細胞在白色96孔板中的檢測效果。實際讀數(shù)會因細胞種類、檢測儀器等的不同而存在差異，圖中數(shù)據(jù)僅供參考。

本產(chǎn)品操作簡單，讀數(shù)穩(wěn)定，檢測速度快，完成檢測僅需約10分鐘。本產(chǎn)品比常見的MTT、alamarBlue、Calcein-AM、WST-1、CCK-8等其它細胞活力測定方法更加簡單快捷。只需把試劑盒提供的單一即用型試劑CellTiter-Lumi™ Plus發(fā)光法檢測試劑與培養(yǎng)細胞等體積混合，反應10分鐘后即可進行化學發(fā)光檢測。無需洗滌細胞，也無需更換或去除培養(yǎng)液。并且化學發(fā)光非常穩(wěn)定，在反應開始后的10分鐘內(nèi)無顯著變化，30分鐘內(nèi)的下降不超過10%。
本產(chǎn)品穩(wěn)定性好。本試劑盒中的CellTiter-Lumi™ Plus發(fā)光法檢測試劑穩(wěn)定性好，反復凍融5次對檢測效果基本無影響，反復凍融10次檢測效果下降不超過10%。本產(chǎn)品4℃保存3天對檢測效果無顯著影響，4℃保存7天檢測效果下降不超過10%。室溫保存1天，仍可保留80%以上的檢測效果。37℃保存1天，可保持60%以上的檢測效果。本產(chǎn)品即使僅保留約50%的檢測效果，仍可以滿足各種常規(guī)檢測。
本產(chǎn)品使用靈活便捷。本產(chǎn)品不僅適合少量樣品的檢測，也非常適合大量樣品的高通量篩選(high-throughput screening)檢測。
ATP，作為最重要的能量分子，在細胞的各種生理、病理過程中起著重要作用。ATP是細胞新陳代謝的一個重要指標，也是具有代謝活性細胞的重要標志性分子，并和活細胞數(shù)目成良好的線性關系。因此，ATP含量能很好地反應活細胞的數(shù)目，即本試劑盒可以通過測定ATP含量來進行細胞計數(shù)或檢測細胞活力。
本試劑盒通過ATP檢測細胞活力的原理參見圖2。借助ATP依賴的螢光素酶催化的螢光素發(fā)光反應，ATP可以通過測定化學發(fā)光來進行定量。由于ATP含量能很好地反映活細胞的數(shù)目，而ATP含量和發(fā)光強度成正比，這樣就可以簡單地通過化學發(fā)光強度來計算出細胞活力或細胞數(shù)目。

圖2. 發(fā)光試劑盒檢測ATP的原理圖。

碧云天各種細胞增殖和細胞毒性檢測試劑盒的比較和選擇，請參考試劑盒使用說明書。
對于96孔板，推薦使用100μl細胞培養(yǎng)液和100μl的檢測試劑，總體積為200μl，此時本試劑盒每10ml可以進行100次檢測。對于384孔板，推薦使用25μl細胞培養(yǎng)液和25μl的檢測試劑，總體積為50μl，此時本試劑盒每10ml可以進行400次檢測。也可以用其它體積的試劑進行檢測，但細胞培養(yǎng)液和檢測試劑體積的比例須為1:1。雖然有數(shù)據(jù)顯示適當減少檢測試劑的用量也很可能會得到較好的結果，但對于細胞數(shù)量偏多、細胞數(shù)量特別少或者重復性要求比較高的情況，建議按照推薦用量進行檢測。
包裝清單：

保存條件：

-20℃避光保存，至少一年有效。
注意事項：
發(fā)光法細胞活力檢測試劑盒的檢測試劑中含有螢光素酶，反復凍融會導致其逐漸失活。盡管經(jīng)測試本試劑反復凍融5次對于其檢測效果無顯著影響，為取得良好的使用效果，次解凍后可適當分裝保存，但需注意分裝的容器不能有ATP污染。反復凍融過程中，可能會導致檢測試劑中出現(xiàn)少量沉淀，此時宜平衡至室溫，并盡量溶解。如仍有殘留的不溶物，可以離心去除后使用，經(jīng)測試不會影響后續(xù)的檢測效果。
待測藥物的溶劑含量較高時可能會干擾螢光素酶反應，從而影響化學發(fā)光信號?？梢酝ㄟ^設置含有溶劑的細胞培養(yǎng)液對照孔排除溶劑的干擾。經(jīng)測試，最終反應體系中DMSO含量在2%以內(nèi)不會對反應產(chǎn)生影響。
檢測時需使用白色或黑色的96孔板或384孔板。如果使用普通透明的96孔板或384孔板，相鄰孔之間會產(chǎn)生相互干擾。
使用說明中提供了檢測ATP標準品的方法，實際檢測細胞活力時通常并不需要檢測ATP標準品。
本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學研究用，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

常見問題：
1.Luminometer和熒光分光光度計有何不同？
熒光分光光度計檢測的樣品本身不能發(fā)光，樣品需要由特定波長的激發(fā)光激發(fā)，然后才能產(chǎn)生熒光并被熒光分光光度計檢測。Luminometer檢測的樣品本身可以發(fā)光，不需要激發(fā)光進行激發(fā)。也就是說luminometer是檢測化學發(fā)光(螢光)的儀器。有些型號的熒光分光光度計也具有l(wèi)uminometer的功能，即也可以檢測化學發(fā)光。您所使用的熒光分光光度計能否用于化學發(fā)光的測定請仔細閱讀該儀器的說明書。
2. 可以進行螢光素酶報告基因檢測的儀器是否就可以用于本試劑盒的檢測？
是。螢光素酶報告基因的檢測原理和本試劑盒的原理相同，可以用相同的儀器測定。