T4 DNA Ligase（T4連接酶）
商品屬性：
產(chǎn)品分類 | 規(guī)格 | 貨號 |
克隆載體及相關(guān)產(chǎn)品 | 500U | BJ-PJ6551 |
商品介紹：
濃 度： 5U/μl
產(chǎn)品概述：
在有Mg2+和ATP存在的條件下，T4 DNA Ligase能催化雙鏈 DNA或RNA上相鄰的5′-磷酸末端和3′-羥基末端形成磷酸二酯鍵。該酶不僅能夠催化雙鏈DNA的平末端或粘性末端之間的連接，還可以修復(fù)雙鏈 DNA、RNA 或 DNA/RNA 雜交雙鏈中的單鏈切刻，但不能催化單鏈 DNA 之間的連接。
保存條件：-20℃保存。
酶儲存緩沖液：
10 mM Tris-HCl (pH 7.5) ，50mM KCl，1mM DTT， 0.1mM EDTA，50% (v/v) glycerol。
5 × T4 DNA Ligase Buffer
250 mMTris-HCl (pH 7.5)， 50mM MgCl2，50mM DTT， 5mM ATP，連接促進(jìn)劑。
來 源：純化于攜帶T4 DNA ligase 基因 的E. coli 菌株。
抑制劑和熱失活：
大于200mM的NaCl或KCl可以強(qiáng)烈抑制連接酶活性。65℃加熱 10分鐘或70℃加熱5分鐘即可失活。
單位定義：
在37℃，20分鐘內(nèi)交換1 nmole 的32PPi所需要的酶量定義為一個(gè)Weiss單位。本產(chǎn)品酶1U(Weiss Unit)相當(dāng)于200個(gè)粘性末端單位。在T4 DNA 連接酶反應(yīng)緩沖液中，16℃條件下，30分鐘能夠使50%的經(jīng)Hind III消化的λDNA 片段連接所需要的酶量為一個(gè)粘性末端單位。
質(zhì)量控制：
藍(lán)白斑分析實(shí)驗(yàn)表明白斑數(shù)小于2%;過量T4 DNA Ligase 混合超螺旋質(zhì)粒檢測實(shí)驗(yàn)表明無核酸酶檢出；SDS-PAGE檢測重組蛋白純度大于99%。
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