Z-LETD-FMK(Caspase 8 抑制劑)正在熱銷的產(chǎn)品：HHV8/ORF50/FITC 熒光標(biāo)記人類皰疹病8抗體IgG壬酮
HHV8/ORF K2/FITC 熒光標(biāo)記人類皰疹病8抗體IgG壬酮 99%
HIF-1 Alpha/FITC 熒光標(biāo)記缺氧誘導(dǎo)因子1α 抗體IgG壬酮 GCS,≥99.5% (GC)
HIF-1 Beta/ARNT1/FITC 熒光標(biāo)記缺氧誘導(dǎo)因子1β
產(chǎn)品介紹:
英文名稱：Caspase 8 Inhibitors Ac-IETD-FMK 產(chǎn)品規(guī)格：20μl 濃度：5mM in DMSO 分子式：C30H44FN4O11 分子量：655.7 純度：≥95% (TLC) 儲存：-20℃，有效期6個月 |
中文名稱：Z-LETD-FMK(Caspase 8 抑制劑)
英文名稱：Caspase 8 Inhibitors Ac-IETD-FMK
產(chǎn)品規(guī)格：20μl
貨號：FS-X10220
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min； 2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜； 5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
醋桿菌科乙酰肝2抗體Human SGPP1(Sphingosine-1-phosphate phosphatase 1) 大鼠花生四烯5脂氧合(Alox5)免疫試劑盒
彎孢菌人血清抗體Human Synaptotagmin-11 大鼠花生四烯12-脂氧合,白型(Alox12l/Alox12/Alox15)免疫試劑盒
粉紅單端孢血紅氧合 1/熱休克蛋白32抗體Human SYTL2 大鼠花生四烯(AA)免疫試劑盒
紋孢青霉磷化HER3受體抗體Human TACC1 大鼠紅生成受體(EPOR)免疫試劑盒
繩狀青霉磷化組蛋白去乙?；?/span>4/5/7抗體Human C4B(Complement C4-B) 大鼠紅生成(EPO)免疫試劑盒
傳染性法氏囊病病異染色質(zhì)蛋白1-γ抗體Human TACC3 大鼠橫紋肌輔肌動蛋白α (sm Actinin-α )免疫試劑盒
發(fā)酵乳桿菌組蛋白H1抗體Human TACC2 大鼠黑色抗體(MC Ab)免疫試劑盒
紐纏叢梗孢組蛋白去乙酰化1抗體Human Syntaxin 3 大鼠核因子-κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)免疫試劑盒
孟氏假單胞菌HAUS3蛋白抗體Human Syntaxin 2 大鼠核因子κB(NF-κB)免疫試劑盒
假單胞菌屬熱休克蛋白93抗體Human SYN1 大鼠和肽(copeptin)免疫試劑盒
松生擬層孔菌磷化組蛋白去乙?；?/span>3抗體Human SYN2 大鼠含免疫球蛋白樣環(huán)和上皮生長因子樣域酪激2(Tie-2)免疫試劑盒
蘇云金芽孢桿菌組蛋白H2B抗體Human SYNGAP1 大鼠含免疫球蛋白樣環(huán)和上皮生長因子樣域酪激1(Tie-1)免疫試劑盒
運動發(fā)酵單胞菌運動亞種短鏈L-3羥烷基脫氫抗體Human SYNJ1 大鼠過氧化脂質(zhì)/乳過氧化物(LPO)免疫試劑盒
諾卡氏菌屬組蛋白去乙酰化9抗體Human Synaptogyrin-4 大鼠過氧化物體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ)免疫試劑盒
黃單胞菌組蛋白去乙?；?/span>10抗體Human Synaptogyrin 1 大鼠過氧化物體增殖物激活受體β(PPAR-B/PPARD)免疫試劑盒
嗜熱脂肪地球芽胞桿菌HOXB4抗體Human Synaptojanin 2 大鼠過氧化物體增殖物激活受體α(PPAR-α)免疫試劑盒
細(xì)極鏈格孢Alternaria│tenuissima 質(zhì)量規(guī)格：1000μg/ml,溶劑：川續(xù)斷皂乙
木霉Trichoderma│sp. 質(zhì)量規(guī)格：1000μg/ml,基體:1.0mol/L HNO3京尼平
檸檬色赤桿菌Erythrobacter│citreus 質(zhì)量規(guī)格：standard for GC特女貞
Z-LETD-FMK(Caspase 8 抑制劑)卷枝毛霉 2-氨基-4-基吡啶Ca2+ATP
釀酒酵母 2-乙基-N-TNFSF14
運動節(jié)桿 2-氨基-5-基吡啶過氧化物
發(fā)酵性酵母 N-甲基-3-苯基-3-羥基鈣調(diào)磷
鹽水球 3--4-甲氧基芐鹽鹽Slingshot同源物
唐菖蒲青霉 乙基乙炔鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激激
發(fā)根根瘤 4-溴甲酯鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激1D
毛栓孔 S-Boc-2-巰基-4,6-二甲基嘧啶鈣調(diào)依賴蛋白激II
盤長孢* 2-溴-4,6-二單絲蛋白激1
庫氏類芽孢桿 1-甲?；?3-甲磺酰基-2-咪唑烷酮鈣調(diào)依賴蛋白激IV
鱗蓋紅菇 2,5-二甲基噻唑組蛋白去乙?；?/span>
有柄靈芝 2-溴-5-甲基噻唑前列腺A1
普通鏈孢囊 2-甲基-4-基噻吩II型膠原
根瘤 苯并呋喃-2-甲γ-氨基丁運載蛋白1
厚垣孢普可尼亞 1-甲基-4-咪唑甲內(nèi)皮轉(zhuǎn)化2
