培養(yǎng)操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學(xué)檢測。
中文名稱:麗春紅酸性品紅染色液
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:100ml
貨號:FS-X9957
產(chǎn)品介紹:
用途: 麗春紅酸性品紅染色液是Masson三色染色的有效成分之一,主要用于肌纖維的染色,染色后呈紅色 儲存條件:室溫,避光,12個月 |
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng): 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大??; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng); 5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng); | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
殼菌卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白43抗體Human EIF4A3 兔血栓A2(TXA2)免疫試劑盒
熱帶假絲酵母卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白46抗體Human EIF4B 兔血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)免疫試劑盒
枇杷假尾孢褐斑病卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白63抗體Human EIF4E3 兔血紅氧合1(HMOX1)免疫試劑盒
香菇卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白54抗體Human EIF4E2 兔血管性血友病因子/瑞斯托霉輔因子(VWF)免疫試劑盒
毛簇木霉卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白61抗體Human EIF4EBP2 兔血管生成2(ANG-2)免疫試劑盒
解淀粉芽孢桿菌植物亞種卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白8抗體Human EIF4G1 兔血管內(nèi)皮粘附分子1(VCAM-1/CD106)免疫試劑盒
禽腺病神經(jīng)酰激CERK抗體Human EIF4G3 兔血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)免疫試劑盒
假交替單胞菌分裂周期樣激2抗體Human EIF3E 兔血管緊張Ⅱ(ANG-Ⅱ)免疫試劑盒
豬瘟病分裂周期樣激3抗體Human EIF4H 兔信號肽,CUB域,EGF樣1(SCUBE1)免疫試劑盒
擬青霉17號染色體開放閱讀框49抗體Human EIF3G 兔心肌特異性肌鈣蛋白T(c)免疫試劑盒
蘇云金芽胞桿菌肯尼亞亞種17號染色體開放閱讀框53抗體Human EIF3H 兔心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)免疫試劑盒
四川散斑殼17號染色體開放閱讀框57抗體Human EIF3J 兔纖溶抑制因子(TAFI)免疫試劑盒
柱狀田頭菇17號染色體開放閱讀框64抗體Human EIF3I 兔纖溶抗纖溶復(fù)合物(PAP)免疫試劑盒
耐冷冷桿菌17號染色體開放閱讀框66抗體Human EIF3L 兔色b-245重鏈(CYBB)免疫試劑盒
栗疫菌17號染色體開放閱讀框74抗體Human EIF3K 兔維甲受體應(yīng)答蛋白2(RARRES2)免疫試劑盒
梨葉殼小圓孢菌17號染色體開放閱讀框75抗體Human EIF2C1 兔糖化血紅蛋白A1c(A1c)免疫試劑盒
百慕大公海橄欖菌Pelagibaca│bermudensis 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRSH2攜帶蛋白試劑盒馬鞭草
葡萄座腔菌Botryosphaeria│dothidea (Moug.) Ces. & De Not. 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%,BRSeryl- tRNA合成,質(zhì)試劑盒牡荊油
大西洋假絲酵母Candida│atlantica 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRSalusin Beta試劑盒馬兜鈴C
麗春紅酸性品紅染色液梅花狀青霉 3--4-氨基DPPX-IgG抗體
黃硬皮馬勃 3-硝基-1,2,4-三唑IgLON家族蛋白5抗體
阿維鏈霉 雙乙酰乙酰對苯二豬肉絳蟲
枯草芽孢桿 2-叔丁基-5-抗神經(jīng)節(jié)脂抗體
絳紅產(chǎn)色小單胞 L-纈芐酯鹽鹽抗神經(jīng)節(jié)脂抗體
紅冬孢酵母屬 甘芐酯鹽鹽抗神經(jīng)節(jié)脂抗體
白靈側(cè)耳 3-(1-萘氧基)-1,2-環(huán)氧烷抗神經(jīng)節(jié)脂抗體
Hyalodendriella betulae Crous 4-吡啶-2-甲甲酯抗神經(jīng)節(jié)脂抗體
貪噬 十二烷基甲酯抗神經(jīng)節(jié)脂抗體
香菇 6-氨基-1-甲基離子通道輔助蛋白1
不吸水鏈霉 4-乙氧基-2,3-二氟-6-胞內(nèi)離子通道蛋白1
孟氏假單胞 正丁基縮水甘油磷
枯草芽孢桿 N-甲基二烯基組蛋白脫乙?;?
相思根瘤 2,3-二溴-6-吡啶甲氧基腎上腺
植物乳桿 4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜烷-2-基)-1H-吲唑可溶性髓系觸發(fā)受體-2
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)