尿沉渣染色液(Sternheimer法)正在熱銷的產(chǎn)品：mucin3/Muc3 粘蛋白-3抗體鞣花 96%
mucin 5B/Muc5B 粘蛋白-5B抗體沒食子酯 98%
mucin4/Muc4(human) 粘蛋白-4抗體熒光 IND
MuRF1/Trim63 肌肉特異性泛蛋白連接1抗體檸檬鐵 AR
MyD88 髓樣分化蛋白抗體檸檬鐵 培養(yǎng)級
NIPP1/ARD1 核抑制蛋白1抗體硫
產(chǎn)品介紹:
用途： 尿沉渣染色檢查 注意事項： 染色后紅細(xì)胞呈紅色或無色，白細(xì)胞呈深藍(lán)、淡藍(lán)或無色。 儲存條件：4℃，避光，12個月 |
中文名稱：尿沉渣染色液(Sternheimer法)
英文名稱：
產(chǎn)品規(guī)格：50ml|100ml
貨號：FS-X9925
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min； 2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜； 5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
污黑腐皮殼螺旋一環(huán)一螺旋蛋白5抗體Human GPR107 小鼠白活化黏附因子(ALCAM)免疫試劑盒
綠色鏈霉菌二磷3核抗體Human GPR108 小鼠白三烯E4(LTE4)免疫試劑盒
微小桿菌腦蛋白絲/蘇激29抗體Human GPR116(G-protein coupled receptor 116) 小鼠白三烯D4(LTD4)免疫試劑盒
靈芝智力發(fā)育調(diào)節(jié)相關(guān)蛋白BRWD3抗體Human GPR123 小鼠白三烯C4(LTC4)免疫試劑盒
水溶性非食用色快速篩查盒生物抗體Human GP repeat 小鼠白三烯B4(LTB4)免疫試劑盒
蟬擬青霉Bax相互作用因子1抗體Human GPAA1 小鼠白介9(IL-9)免疫試劑盒
高地芽孢桿菌表皮生長因子反應(yīng)蛋白2抗體Human GPATCH2 小鼠白介8(IL-8/CXCL8)免疫試劑盒
平菇BCL2相關(guān)X蛋白抗體Human GPBP1 小鼠白介7(IL-7)免疫試劑盒
蠟樣芽孢桿菌Bcl2樣凋亡蛋白13抗體Human GPATCH4(G patch domain-containing protein 4) 小鼠白介6(IL-6)免疫試劑盒
金黃殼囊孢菌Bcl2樣凋亡蛋白14抗體Human GTF2A2 小鼠白介-5(IL-5)免疫試劑盒
斑玉蕈Bcl2蛋白修飾因子抗體Human GTF2E1 小鼠白介4(IL-4)免疫試劑盒
金針菇（毛柄金錢菌、冬菇）骨形態(tài)發(fā)生蛋白11抗體Human GTF2F1 小鼠白介35(IL-35)免疫試劑盒
大腸埃希菌BCL2樣15促凋亡蛋白抗體Human GSG1L 小鼠白介33(IL-33)免疫試劑盒
藍(lán)色犁頭霉骨堿性磷抗體Human GSDMD 小鼠白介31(IL-31)免疫試劑盒
葡萄座腔菌磷化T淋巴連接蛋白抗體Human GSPT1 小鼠白介3(IL-3)免疫試劑盒
金耳、 黃木耳磷化T淋巴連接蛋白抗體Human GSPT2 小鼠白介2受體β(IL2rb/CD122)免疫試劑盒
固氮菌Azotobacter│sp. 質(zhì)量規(guī)格：BRβ膠原交聯(lián)試劑盒人參皂Rk3
輪枝孢Verticillium│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BRβ-肌動蛋白試劑盒人參炔
詹氏桿菌Propionibacterium│jensenii 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRβ-黑色激試劑盒肉豆寇單甘油酯
尿沉渣染色液(Sternheimer法)云芝栓孔 (變色栓) 十八烷基乙烯基尿鎘-金屬硫蛋白
假單胞 3-硝基-4-羥氨基氨基肽
羅伊氏乳桿 二乙二單乙烯基補(bǔ)體因子H相關(guān)蛋白3
大斑凸臍蠕孢 4-(3-吡啶基)苯頻哪酯磷糖異構(gòu)1
喜乳糖擬泡囊擔(dān)孢酵母 7-氨基庚白分化抗原CD109
谷棒桿Ⅲ型 3-溴-6--2-吡啶甲球蛋白重鏈可變區(qū)
大腸埃希 順-2-已烯-1-Igκ鏈V-I區(qū)HK102
黑附球 3-甲基-2-硝基三氟甲苯凝膠溶
無花果曲霉 叔丁基二苯基硅烷基三氟甲磺酯α黑色
銹赤蠟黃鏈霉 3-溴-5-三氟甲苯受體相互作用蛋白
膜醭假絲酵母 5-溴-2--3-吡啶CXC趨化因子受體7
堿線屬 3-羥基十六烷CXC趨化因子受體4
Rhizobium multihospitium 基溴化鎂(約的四溶液,約2mol/L)14-3-3蛋白beta
甘蔗生節(jié)棱孢 4--1-14-3-3蛋白gamma
根瘤 3-羥基-2-萘甲酰基-鄰-乙氧基苯14-3-3epsilon
