caspase8抑制劑(Z-IETD-FMK)正在熱銷的產(chǎn)品：LHRH(Human Luteinizing Hormone-Releasing Hormone) ELISA Kit 人黃體生成釋放激羧纖維 M.W. 250000 (DS=1.2) ,1500-3100mPa.s
8-iso-PG(Human 8-iso prostaglandin) ELISA Kit 人8異前列腺羧纖維 M.
產(chǎn)品介紹:
Z-IETD-FMK是選擇性和細胞可滲透的胱天蛋白酶(caspase8)抑制劑。 注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！ 號：210344-98-2 純度：98.0% 分子量：654.68 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
英文名稱：Z-IETD-FMK
產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|1mg|5mg
貨號：FS-X10775
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大?。?/span> 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min； 2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜； 5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學(xué)檢測。
松口蘑熒光PE-Cy3標記兔IgG(流式同型對照)Anti-KCNAB3 Antibody人剛地弓形蟲(T.gondii)
貝葉多孔菌(親和純化) 兔IgMAnti-KCNAB1 Antibody人剛地弓形蟲(T.gondii)
赤芝熒光PE標記兔IgG(流式同型對照)Anti-KCNC2 Antibody人抗副流感病IgG抗體(anti-PIV IgG )
芽孢桿菌屬熒光Cy5標記兔IgG(流式同型對照)Anti-KCNC4 Antibody人抗副流感病IgG抗體(anti-PIV IgG )
交鏈孢屬熒光APC標記兔IgG(流式同型對照)Anti-KCNF1 Antibody人大皰性類天皰瘡抗體(BP)
膠孢鏈霉親和標記兔抗人IgGAnti-KCNG2 Antibody人大皰性類天皰瘡抗體(BP)
勒仔樹根瘤菌PE標記鏈霉親和Anti-KCNG3 Antibody人腸病(Enterovirus)
根癌土壤桿菌（可訂購）堿性磷標記鏈霉親和Anti-KCNH1 Antibody人腸病(Enterovirus)
藤黃微球菌辣根過氧化物標記鏈霉親和Anti-KCNH3 Antibody人包蟲抗體IgG
燕麥鐮孢金標記鏈霉親和(10nm/15nm)Anti-KCNIP1 Antibody人包蟲抗體IgG
產(chǎn)黃纖維單胞菌辣根過氧化物標記親合Anti-KCNH5 Antibody人百日咳(PT)
碳樣小單孢菌辣根過氧化物標記兔抗HRPAnti-KCNH7 Antibody人百日咳(PT)
轉(zhuǎn)基因玉NK603質(zhì)粒分子標準物質(zhì)辣根過氧化物標記兔抗人IgAAnti-KCNIP1 Antibody人白色念珠菌(C.albicans)
蘇云金芽孢桿菌辣根過氧化物標記的蛋白AAnti-KCNIP3 Antibody人白色念珠菌(C.albicans)
釀酒酵母辣根過氧化物標記牛血清白蛋白Anti-KCNJ10 Antibody人流行性乙型腦炎抗體IgG(JE IgG)
乳乳球菌乳亞種辣根過氧化物標記人胰島蛋白Anti-KCNIP3 Antibody人流行性乙型腦炎抗體IgG(JE IgG)
RAS蛋白樣激活劑1抗體多形魯氏酵母人卵巢上皮細胞
Ras相關(guān)結(jié)構(gòu)域蛋白質(zhì)2抗體魯氏酵母人急性髓系白血病細胞
食道癌抑制生長蛋白抗體羅斯酵母人急性T淋巴細胞白血病細胞
環(huán)指蛋白139抗體洛格酵母正常人皮膚成纖維細胞
caspase8抑制劑(Z-IETD-FMK)釀酒酵母 水解乳蛋白骨橋
斡氏假單胞 營養(yǎng)瓊脂（NA）骨特異性堿性磷
子午線假單胞 乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基（高PH值）骨特異性堿性磷B
高雄山蟲草 HBI沙門氏生化鑒定條(GB)過氧化氫
枯草芽孢桿 HBI沙門氏生化鑒定條(SN)過氧化物還原2
ATCC 49479 HBI副溶血性弧生化鑒定條(GB)還原型
綠色木霉 HBI副溶血性弧生化鑒定條(SN)核因子κB
Ag10（蘑菇） HBIO157生化鑒定條（GB）環(huán)磷鳥
甘瓜發(fā)光桿 HBI志賀氏生化鑒定條(GB)環(huán)磷腺
土壤貪噬 HBI變形桿生化鑒定條(GB)環(huán)氧合2
糞腸球 HBI單增李斯特氏生化鑒定條(SN)緩激肽
葡萄座腔 HBI單增李斯特氏生化鑒定條(GB)氧化
大腸埃希氏 HBI蠟樣芽孢桿生化鑒定條(GB)黃體生成
擬莖點霉屬 3%堿性蛋白胨水顆?；钚匝醮?/span>
假單胞 馬鈴薯葡萄糖瓊脂（PDA）顆粒肌鈣蛋白I
