改良Harris蘇木素染色液正在熱銷(xiāo)的產(chǎn)品：TIGAR TIGAR蛋白抗體牛磺 99%
TIMP-1 金屬蛋白組織抑制因子-1抗體?；?USP級(jí)，已通過(guò)培養(yǎng)測(cè)試
TIMP-2 金屬蛋白組織抑制因子-2抗體二二 >98%(GC)
TIMP-3 金屬蛋白組織抑制因子-3抗體二 AR,98%
TIMP-4 金屬蛋白組織抑制因子-4抗體對(duì)苯二 99%
TLK1 調(diào)節(jié)染色體組裝激1抗體1,4
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；
4．將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
中文名稱(chēng)：改良Harris蘇木素染色液
英文名稱(chēng)：
產(chǎn)品規(guī)格：100ml|500ml
貨號(hào)：FS-X10034
產(chǎn)品介紹:
用途： 屬于常規(guī)切片HE染色的明礬蘇木素的一種，適用于細(xì)胞核染色，尤其適用于臨床紙片染色。 注意事項(xiàng)： Harris蘇木素染色中l(wèi)eagene推薦采用該試劑。細(xì)胞核染色的選擇性和保存時(shí)間優(yōu)于Harris蘇木素染色液，對(duì)細(xì)胞核染色較深，染色一般5-8分鐘，存儲(chǔ)太久后，使用時(shí)應(yīng)過(guò)濾。 儲(chǔ)存條件：室溫，12個(gè)月 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min； 2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜； 5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
格氏乳球菌凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白9抗體Human ASGR2(Asialoglycoprotein Receptor 2) 人蘭尼堿受體2(RYR2)免疫試劑盒
脫皮毛球馬勃*膽固氧化抗體Human ASK-1(Apoptosis Signal Regulating Kinase 1) 人蘭尼堿抗體免疫試劑盒
金灰青霉半胱蛋白蛋白14抗體Human AP17(Apelin 17) 人賴酰氧化免疫試劑盒
香菇半胱蛋白蛋白5抗體Human AP13(Apelin 13) 人賴特異性脫甲基5A(JARID1A)免疫試劑盒
黑曲霉豬瘟病抗體Human AP(Allopregnanolone) 人醌NADH脫氫1(NQO1)免疫試劑盒
蒼白桿菌屬豬瘟病抗體Human ANG II R1-Ab(Angiotensin II Receptor 1 Antibody) 人跨膜結(jié)構(gòu)域4亞家族成員11(MS4A11)免疫試劑盒
灰黃鏈霉菌嗜鉻粒蛋白C抗體Human ANG II(Angiotensin II) 人空泡相關(guān)蛋白A(VacA)免疫試劑盒
巴氏醋桿菌煙堿型乙酰受體α10/AChRα10抗體Human ANGPTL1(Angiopoietin Like Protein 1) 人空腸彎曲菌(CJ)抗體(IgM)免疫試劑盒
大腸埃希菌煙堿型乙酰受體α6/AChRα6抗體Human ANGPTL6(Angiopoietin Like Protein 6) 人空腸彎曲菌(CJ)抗體(IgG)免疫試劑盒
釀酒酵母煙堿型乙酰受體α9/AChRα9抗體Human Ang III(Angiotensin III) 人克雷白氏桿菌(klebsiella)免疫試劑盒
木拉克酵母屬煙堿型乙酰受體δ/AChRδ抗體Human Anti-Surv(Anti-Survivin Antibody) 人克拉拉蛋白(CC16)免疫試劑盒
植物乳桿菌凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白8抗體Human ANKRD1(Ankyrin Repeat Domain 1) 人可溶性轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(sTfR)免疫試劑盒
耐熱鹽土生古菌凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白7抗體Human AP(Allopregnanolone) 人可溶性腫瘤壞死因子受體2(sTNF-R2)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌枯草亞種β衣被蛋白抗體Human AP17(Apelin 17) 人可溶性血小板內(nèi)皮粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)免疫試劑盒
紋黑蛋巢半胱蛋白4/11抗體Human ATF-1(Activating Transcription Factor 1) 人可溶性血纖蛋白單體復(fù)合物(SFMC)免疫試劑盒
樟疫霉1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框187抗體Human AP13(Apelin 13) 人可溶性血管內(nèi)皮蛋白C受體(sEPCR)免疫試劑盒
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格：D,99.8%Ⅲ型前膠原肽試劑盒半枝蓮堿
南方鹽單胞菌Halomonas│meridiana 質(zhì)量規(guī)格：for HPLC,≥99.0%Ⅲ型前膠原基末端肽試劑盒白芷屬腦
死谷芽孢桿菌Bacillus│vallismortis 質(zhì)量規(guī)格：for HPLC, ≥99.7%Ⅲ型前膠原基端肽試劑盒Α-波菜甾
改良Harris蘇木素染色液矢野氏鞘氨單胞 3,5-二甲基-4-甲氧基苯乙酮纖維蛋白原β
云芝栓孔 (變色栓) N-甲基高哌-2-酮CD86分子
陰溝腸桿 2-甲基-5-氨基-2H-吲唑PSTAT6
盤(pán)長(zhǎng)孢狀盤(pán)孢 2--2',5'-二氟苯乙酮PASTAT1
大腸埃希 Amberlite XAD-1180N 非離子型多孔樹(shù)脂小泛相關(guān)修飾蛋白2
被孢霉屬 2,5-二氟苯肼核仁蛋白
食物中殼成分速測(cè)卡 17alpha-羥基血清
空腸彎曲桿 2-羥基-5-甲神經(jīng)絲蛋白輕鏈
橘青霉 3-氨基-1-芐基血吸蟲(chóng)IgM抗體
毛柄(金針菇) 2-氟-4-甲氧酰苯鼠相關(guān)蛋白
大腸埃希氏 2,5-二吡啶-4-甲乙酯WNT抑制因子1
干酪乳桿 酮血小板因子4變體
雜色曲霉 2--3-氟苯甲含NLR家族CARD域蛋白3
鉛色青霉 1,4,7,10-四氮雜環(huán)十二烷-1,4,7,10-四乙綠色熒光蛋白
大麗輪枝孢 2,6-二氟苯磺酰,97%巨蛋白抗體
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
