亞甲基藍-酸性品紅染色液正在熱銷的產(chǎn)品：OAT-3 陰離子轉(zhuǎn)運蛋白-3抗體總銀杏(C13:0,C15:1,C17:2,C15:0,C17:1) ≥90%
OAT4L/URAT1 尿鹽重吸收轉(zhuǎn)運子1抗體6--1-己 95%
Ghrelin/GHRP 生長激釋放肽抗體辛二 99%
OCLN/Occludin 緊密連接蛋白抗體辛二 99%
claudin 5 緊密連接蛋白-5抗體N-氨?；?9
產(chǎn)品介紹:
用途： 骨組織染色 儲存條件：室溫，避光，12個月 |
中文名稱：亞甲基藍-酸性品紅染色液
英文名稱：
產(chǎn)品規(guī)格：2×50ml|2×100ml
貨號：FS-X9947
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min； 2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜； 5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
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哈茨木霉Trichoderma│harzianum 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRTrem樣轉(zhuǎn)錄因子1試劑盒尿
核盤菌Sclerotinia│sclerotiorum 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRTraf2結(jié)合蛋白試劑盒
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魯氏接合酵母 2-溴-5-Ⅰ型膠原原羧基端交聯(lián)肽
枯草芽孢桿 3-氟-4-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)苯雙解絲蛋白1
白鮑魚菇 二甲醋酯原顆粒膜糖蛋白
曲霉 4--2,6-二氟苯甲黑轉(zhuǎn)鐵蛋白
稀奇鏈霉 4-三氟甲基-2-羥基喹啉強啡肽A1-13
白色假絲酵母* 2,3,5-三-4-吡啶甲分泌型卷曲相關蛋白4
小青霉 5-嘧啶甲IgG1 Fc片段
薄層 3,5-二甲苯新蝶呤
細疣籃狀 4-溴-3-白三烯A4
亮白曲霉 1-Cbz-吡咯烷巨噬激1
金龜子綠僵 2,4,6-三苯異酯血管內(nèi)皮生長因子受體3
蠟狀芽孢桿 1-(2-溴乙基)-3-氟苯胃饑餓
折疊馬賽 1-甲基吡唑-3-甲尿香草杏仁
棘孢木霉 5-甲基吡唑-3-甲甲酯油酰乙
