操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量Trypsin-EDTA solution,略蓋過細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來,吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過長,未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品貨號 |
Tivozanib | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg | FS-X11018 |
產(chǎn)品介紹:
Tivozanib(AV-951;KRN951)是有效,選擇性的VEGFR1/2/3抑制劑,IC50值分別為0.21,0.16,and0.24nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! 號:475108-18-0 別名:AV-951;KRN951 純度:99.46% 分子量:454.86 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會增加空白吸收,從而影響檢測結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
黑曲霉Pseudomonas mendocina大鼠組織蛋白去乙?;?HD)
根瘤菌Pseudomonas mendocina大鼠E選擇(E-Selectin/CD62E)
黑孢霉屬Pseudomonas mendocina大鼠E選擇(E-Selectin/CD62E)
雙環(huán)林地蘑菇Pseudomonas mendocina大鼠甲基化(Methylase)
枯草芽孢桿菌Pseudomonas mendocina大鼠甲基化(Methylase)
圓紅球菌Pseudomonas mendocina大鼠抗增殖核抗原抗體(PCNA)
泡盛曲霉Pseudomonas mendocina大鼠抗增殖核抗原抗體(PCNA)
熒光假單胞菌Pseudomonas mendocina大鼠脂蛋白脂(LPL)
解幾丁質(zhì)類芽孢桿菌Pseudomonas mendocina大鼠脂蛋白脂(LPL)
黑曲霉Pseudomonas mendocina大鼠抗性磷5b(TRACP-5b)
鈉線菌屬Pseudomonas mendocina大鼠抗性磷5b(TRACP-5b)
裂褶菌Pseudomonas mendocina大鼠葡萄糖依賴性胰島釋放多肽(GIP)
嗜果刀孢Pseudomonas mendocina大鼠葡萄糖依賴性胰島釋放多肽(GIP)
少根根霉原變種Pseudomonas mendocina大鼠糖原磷化同工II(GP-II)
泡盛曲霉Pseudomonas mendocina大鼠糖原磷化同工II(GP-II)
新月彎孢Pseudomonas mendocina大鼠糖原磷化同工MM(GP-MM)
胰脂肪抗體香菇總抗氧化能力(T-AOC)比色法測試盒(FRAP法)
磷脂磷水解2抗體刺孢吸水鏈霉菌昆明變種總抗氧化能力(T-AOC)比色法測試盒(ABTS化學(xué)法)
視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤樣蛋白p7抗體紫色直絲鏈霉菌總抗氧化能力(T-AOC)比色法測試盒
受磷蛋白/心臟磷蛋白抗體弗氏鏈霉菌維生E(VE)比色法測試盒
VEGFR1/2/3抑制劑(Tivozanib)釀酒酵母 -3-O-(2',6'-二-O-反式-對-香豆酰基)-beta-D-吡喃葡萄糖
小單孢 檸檬黃
土生類諾卡氏 3-龍膽二糖
嗜鞣管囊酵母 3-O-(6''-沒食子?;?-beta-D-吡喃葡萄糖
金針菇(毛柄、冬菇) 8-甲氧基; 8-甲氧基莰非
鏈霉 7,8-二羥基升麻
假單胞 葫蘆二烯
節(jié)桿屬 alpha-香樹精; alpha-香樹脂
枯草芽孢桿 丁酰鯨魚
雞冠蘑 二乙酰氧基-6-姜二
尖孢鐮孢 1-脫氫--姜酮
不動桿屬 6-羥基 3,6-二葡萄糖
杰氏假單胞 6-羥基
灰白翅孢殼 5,7-二羥基色原酮 7-蕓香糖
總狀毛霉 樺褐孔