Syk抑制劑(PRT062607)正在熱銷的產(chǎn)品：PABA(Human para-aminobenzoic acid) ELISA Kit 人對氨苯氧化釔 99.999% metals basis
LPA(Human L-phenylalanine) ELISA Kit 人苯氨氧化釔 99.99% metals basis ,50nm
Irna(Human Immune RNA) ELISA
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
中文名稱：Syk抑制劑(PRT062607)
英文名稱：PRT062607 Hydrochloride
產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
貨號：FS-X10849
產(chǎn)品介紹:
PRT062607 hydrochloride是一種有效的純化的Syk抑制劑，IC50為1-2nM。 注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！ 號：1370261-97-4 別名：P505-15 Hydrochloride 純度：99.20% 分子量：429.91 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大?。?/span> 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min； 2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜； 5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
惡臭假單胞菌大鼠糖原磷化同工MMAnti-PLA2G4C Antibody人血管生成4(ANG-4)
灰綠鏈霉菌小鼠水通道蛋白1Anti-PLA2G4E Antibody人血管生成4(ANG-4)
枯草芽孢桿菌人癌基因蛋白質(zhì)p190/bcr-ablAnti-PLA2G1B Antibody人可溶性肌球蛋白重鏈1(sMHC-1)
平滑假絲酵母人膀胱腫瘤抗原Anti-PLAGL1 Antibody人可溶性肌球蛋白重鏈1(sMHC-1)
鏈霉菌小鼠水通道蛋白0Anti-PLCG1 Antibody人熱休克因子1(HSF-1)
蘇云金芽胞桿菌大鼠糖原磷化同工BBAnti-PLA2G4D Antibody人熱休克因子1(HSF-1)
雞傷門氏菌小鼠水通道蛋白2Anti-PLCB3 Antibody人血管活性肽抑制劑(VPI)
釀酒酵母大鼠甲狀腺抗體Anti-PLD1 Antibody人血管活性肽抑制劑(VPI)
杉葉散斑殼(都不提供）人中期因子Anti-PLCG2 Antibody人心肌肌凝蛋白輕鏈1(CMLC-1)
間型假絲酵母大鼠抗促甲狀腺受體抗體Anti-PLCXD1 Antibody人心肌肌凝蛋白輕鏈1(CMLC-1)
突尼斯葉桿菌人BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白Anti-PLD4 Antibody人缺血修飾白蛋白(IMA)
大豆慢生根瘤菌小鼠甲狀腺球蛋白Anti-PLEKHG4 Antibody人缺血修飾白蛋白(IMA)
康寧木霉小鼠抑制AAnti-PLGRKT Antibody人8-異構(gòu)前列腺F2α(8-epi-PGF2α)
鏈霉菌大鼠兒茶Anti-PLG Antibody人8-異構(gòu)前列腺F2α(8-epi-PGF2α)
彩色豆馬勃人B淋巴瘤因子2Anti-PLG Antibody人血管內(nèi)皮鈣粘著蛋白復(fù)合體(VE-cad)
蚜蟲莫氏黑粉菌大鼠白介27Anti-PLK5 Antibody人血管內(nèi)皮鈣粘著蛋白復(fù)合體(VE-cad)
粘液樣脂肪肉瘤蛋白FUS1抗體球毛殼霉腦膜炎奈瑟菌
血小板源性生長因子A相關(guān)蛋白2抗體平田頭菇-2人毛囊角質(zhì)細胞
腫瘤壞死因子配體超家族成員13抗體燕麥嗜菌西瓜亞種大鼠脊髓前角運動神經(jīng)元瘤細胞
T細胞白血病同源盒蛋白3抗體葡萄炭疽刺盤孢菌人白血病細胞耐藥株
Syk抑制劑(PRT062607)鹽反硝化枝芽孢桿 MiddleBrook7H瓊脂硫肝糖蛋白
匍匐曲霉原變種 MiddleBrook7H11瓊脂硫類肝
大豆慢生根瘤 曲霉瓊脂基礎(chǔ)(AFPA)硫軟骨
青色鏈霉 假單胞分離瓊脂
淡紫灰吸水鏈霉 knudson糜蛋白
釀酒酵母 TGE培養(yǎng)基球蛋白A
MMO-MUG培養(yǎng)基球蛋白E
葡萄牙棒孢酵母 硫細培養(yǎng)基球蛋白G
假單胞屬 GVPC瓊脂基礎(chǔ)球蛋白G1
栗酒裂殖酵母 霉培養(yǎng)基球蛋白G2
藤黃微球 ASS瓊脂球蛋白G2a
乳片球 AC肉湯球蛋白G2b
阿納托利亞正青霉 細L型增液球蛋白G3
核盤 細L型分離瓊脂球蛋白G4
平菇 溶血瓊脂基礎(chǔ)球蛋白M
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
