GSK-3抑制劑(LY2090314)正在熱銷的產(chǎn)品：CCR1(Human CC-chemokine receptor 1 ELISA Kit 人CC趨化因子受體1N,N-二酰 99%
CX3CR1(Human CX3C-chemokine receptor 1) ELISA Kit 人CX3C趨化因子受體12,4-二 97%
PARC/CCL18(Human pulmonary activa
中文名稱：GSK-3抑制劑(LY2090314)
英文名稱：LY2090314
產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
貨號：FS-X10695
產(chǎn)品介紹:
LY2090314是一種有效的GSK-3抑制劑，能夠作用于GSK-3α和GSK-3β，IC50值分別為1.5nM和0.9nM。 注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！ 號：603288-22-8 純度：99.75% 分子量：512.53 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min； 2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜； 5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
福氏志賀氏菌神經(jīng)生長因子受體的一種（抗原）Anti-CCDC88A AntibodySciellin蛋白(SCEL)
運動節(jié)桿菌重組生長分化因子8/肌肉抑制Anti-CCDC106 AntibodySATB同源框蛋白1(SATB1)
總狀毛霉原變型神經(jīng)生長因子受體的一種（抗原）Anti-CCL14 AntibodySarcosynapsin蛋白(SRYP)
粗毛栓菌神經(jīng)生長因子受體的一種（抗原）Anti-CCDC88A AntibodySalusinβ蛋白(Salusinβ)
曲霉促甲狀腺受體（抗原）Anti-CCL20 AntibodySalusinα蛋白(Salusinα)
芽孢桿菌半胱蛋白8抗原Anti-CCL15 AntibodySaitohin蛋白(STH)
芽孢桿菌屬促甲狀腺受體（抗原）Anti-CCL2(MCP-1) AntibodySacsin蛋白(SACS)
枯草芽孢桿菌酪羥化（抗原）Anti-CCL20 AntibodyS100鈣結合蛋白B(S100B)
金色鏈霉菌微管蛋白（抗原）Anti-CCL27 AntibodyS100鈣結合蛋白A9(S100A9)
大腸埃希氏桿菌質(zhì)膜微囊蛋白-1抗原Anti-CCL3 AntibodyS100鈣結合蛋白A8(S100A8)
釀酒酵母 β-連環(huán)蛋白抗原（β-β鏈接）Anti-CCL4L1 AntibodyS100鈣結合蛋白A7(S100A7)
硬結節(jié)桿菌磷化β-連環(huán)蛋白抗原Anti-CCNA1 AntibodyS100鈣結合蛋白A6(S100A6)
固氮菌微管蛋白（抗原）Anti-CCNA1 AntibodyS100鈣結合蛋白A5(S100A5)
黃曲霉核凋亡誘導因子蛋白1(多肽)Anti-CCNA1 AntibodyS100鈣結合蛋白A2(S100A2)
淺黃褐蠟傘組織蛋白B抗原Anti-CCNA2 AntibodyS100鈣結合蛋白A14(S100A14)
枯草芽孢桿菌組織蛋白L抗原Anti-CCNB1 AntibodyS100鈣結合蛋白A13(S100A13)
細胞膜鈣ATP4抗體越南伯克霍爾德氏菌小鼠單核巨噬細胞白血病細胞
細胞膜鈣ATP4B抗體西伯利亞庫特氏菌人B淋巴細胞瘤細胞
細胞膜鈣轉(zhuǎn)運ATP抗體Viridibacillusarenosi小鼠主動脈血管平滑肌細胞
溶質(zhì)載體蛋白家族21成員2抗體Rummeliibacillusstabekisii人高轉(zhuǎn)移肝癌細胞
GSK-3抑制劑(LY2090314)Pantoea eucalypti 2-(2-乙氧基)乙脂肪甘油三酯水解
傘枝梨頭霉 2--5-脂聯(lián)
淡青鏈霉 4-丁過氧化物體增殖因子活化受體γ
詹氏桿 己二二甲酯巴貝斯抗體
黑木耳 己二二甲酯雙芽巴貝斯抗體
大腸埃希 N.N-二甲基對苯二草鹽鈣激活中性蛋白1
貝葉多孔 3-鹽鹽新孢子蟲病
馬賽 2-乙基胰島樣生長因子
蠟狀芽孢桿 3--1-羥基自由基
解淀粉芽孢桿 3-溴-1-25羥基維生D
pET-22(b) 4-溴苯肼單鹽鹽α半乳糖基抗原
玫煙色棒束孢 基三苯基溴化膦α半乳糖抗原
總狀共頭霉 1-苯基-1-丁炔中性粒趨化因子1
茶藨子葡萄座腔 2,2,2-三氟乙基三氟磺酯鈣;鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激激2
短小芽孢桿 對甲苯異酯CD3分子
