操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無(wú)菌 PBS、Hanks 液或無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量Trypsin-EDTA solution,略蓋過(guò)細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來(lái),吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng),未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來(lái)。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品貨號(hào) |
SAR245409 | 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg | FS-X10935 |
產(chǎn)品介紹:
SAR245409是一種有效的PI3K抑制劑,抑制p110α,p110β,p110γ和p110δ,IC50分別為39,113,9和43nM,也抑制DNA-PK(IC50=150nM)和mTOR(IC50=157nM)。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! 號(hào):934493-76-2 別名:Voxtalisib;XL765 純度:98.93% 分子量:270.29 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開(kāi)蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長(zhǎng)時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測(cè)結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來(lái)配制待檢測(cè)藥物。如果待測(cè)藥物有還原性,則測(cè)定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對(duì)較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè)。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測(cè),MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
紅球菌人蛋白激BBacillus licheniformis小鼠膠原I(Collagenase I)
貝葉多孔菌人血紅氧合2Bacillus licheniformis小鼠磷化蛋白激C(P-PKC)
黑曲霉人激M2型同工Bacillus licheniformis小鼠磷化蛋白激C(P-PKC)
白黃小脆柄菇人甲狀腺過(guò)氧化物Bacillus licheniformis小鼠磷化外信號(hào)調(diào)節(jié)激(pERK)
彩色豆馬勃人αL巖藻糖Bacillus licheniformis小鼠磷化外信號(hào)調(diào)節(jié)激(pERK)
弗卡分枝桿菌人內(nèi)皮型一氧化氮合成Bacillus licheniformis小鼠鈣通道阻滯劑(CCB)
臘狀芽胞桿菌人血紅氧合1Bacillus licheniformis小鼠鈣通道阻滯劑(CCB)
戊糖乳桿菌人誘導(dǎo)型一氧化氮合成Bacillus licheniformis小鼠轉(zhuǎn)/谷轉(zhuǎn)(ALT/GPT)
香菇人磷脂A2Bacillus licheniformis小鼠轉(zhuǎn)/谷轉(zhuǎn)(ALT/GPT)
豬鏈球菌人一氧化氮合成Bacillus licheniformis小鼠骨形成蛋白(BMPs)
乳乳球菌NZ9000人端粒Bacillus licheniformis小鼠骨形成蛋白(BMPs)
色串孢人基質(zhì)金屬蛋白5Bacillus licheniformis小鼠視黃結(jié)合蛋白4(RBP-4)
褐球固氮菌人基質(zhì)金屬蛋白4Bacillus licheniformis小鼠視黃結(jié)合蛋白4(RBP-4)
波卓鏈霉菌人基質(zhì)金屬蛋白9/明膠BBacillus megaterium小鼠6前列腺F1a(6-keto-PGF1a)
肺炎鏈球菌人神經(jīng)特異性烯化Bacillus megaterium小鼠6前列腺F1a(6-keto-PGF1a)
黑曲霉人肌激同工MBBacillus licheniformis小鼠戊糖(Pentosidine)
鋅指蛋白ZBTB8A抗體薄花邊傘8-3倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞,二氫葉還原缺陷
鋅指蛋白916B抗體灰葡萄孢菌人視網(wǎng)膜上皮細(xì)胞
鋅轉(zhuǎn)運(yùn)體8蛋白抗體總狀毛霉小鼠心房肌細(xì)胞
鋅指蛋白503抗體鐮刀菌屬中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞
PI3K抑制劑(SAR245409)珊瑚色諾卡氏 鹽沙拉沙星葡萄糖-6-磷
金黑小單孢 瑞替加濱葡萄糖-6-磷脫氫
宋氏志賀氏
蘆葦黃桿 硝苯吡啶葡萄糖脫氫
草木樨中華根瘤 安息香葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4
月季黑斑病* G羥甲基戊二單酰
惡臭假單胞 間三聯(lián)苯羥脯
產(chǎn)氨短桿 茚去甲腎上腺
Rhizobium cellulosilyticum 異(正+反)熱休克蛋白-70
球托霉屬w5株 百清熱休克蛋白90
庫(kù)德里阿茲威氏畢赤酵母 環(huán)辛烯絨毛膜促性腺
枯草芽孢桿 二十二烷溶
釀酒酵母 代苯肉堿脂酰轉(zhuǎn)移
木霉(加詞待譯) 2,6-二乙基苯(DEA)肉堿脂酰轉(zhuǎn)移1
運(yùn)動(dòng)節(jié)桿 二十三烷狀腺原