PARPl和PARP2抑制劑正在熱銷(xiāo)的產(chǎn)品：Nogo R 軸索過(guò)度生長(zhǎng)抑制因子受體（多肽抗原）2-硫 96%
Bad (BCL-xL/BCL-2-associated death promoter) 相關(guān)死亡促進(jìn)因子Bad抗原四氫噻吩 99%
Bad (BCL-xL/BCL-2-associated death promoter) 相關(guān)死亡促進(jìn)因子Bad抗原咪唑-4，5-二羧 98%
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培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；
4．將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
中文名稱(chēng)：PARPl和PARP2抑制劑
英文名稱(chēng)：PJ34 hydrochloride
產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg
貨號(hào)：FS-X10500
產(chǎn)品介紹:
英文名稱(chēng)：PJ34 hydrochloride 產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg PJ34hydrochloride是一種有效的特異的PARPl/2抑制劑，IC50值分別為110nM和86nM。 注：本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！ 號(hào)：344458-15-7 純度：98.44% 分子量：331.8 儲(chǔ)存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min； 2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜； 5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
光帽鱗傘絲/蘇蛋白激17A/DAP凋亡誘導(dǎo)蛋白激1抗體Anti-GRB14 Antibody周期D1(CCND1)
里亞氏須腹菌碳?xì)溻c協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4-A7抗體Anti-GRB2 Antibody周期C(CCNC)
蠟狀芽孢桿菌微管卷曲蛋白SYNC抗體Anti-GRB10 Antibody周期B3(CCNB3)
角微菌磷化SH2結(jié)構(gòu)含磷肌SHIP1抗體Anti-GRB7 Antibody周期B2(CCNB2)
腐皮鐮孢菌磷化沉默調(diào)節(jié)蛋白1抗體Anti-GRB7 Antibody周期B(CCNB)
長(zhǎng)枝木霉線粒體促凋亡蛋白抗體Anti-GREM1 Antibody周期A1(CCNA1)
鏈球菌(不定種)墨蝶蛉還原抗體Anti-GREM1 Antibody周期A(CCNA)
北方蜜環(huán)菌核突觸蛋白α+β抗體Anti-GRIA1 Antibody粘附分子1(CADM1)
枯草芽孢桿菌內(nèi)質(zhì)網(wǎng)脂質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)蛋白2抗體Anti-GRIA1 Antibody(PB0201)因子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制因子3(SOCS3)
糙孢籃狀菌絲消旋Anti-GRIA3 Antibody因子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制因子1(SOCS1)
大腸埃希氏菌鈣結(jié)合樣蛋白/神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤標(biāo)記物抗體Anti-GRIA4 Antibody因子受體樣因子1(CRLF1)
匍枝根霉(黑根霉)絲/蘇蛋白激SRPK7抗體Anti-GRIA3 Antibody維甲結(jié)合蛋白2(CRABP2)
假絲酵母屬磺基葡糖硫抗體Anti-GRIA2 Antibody(PB0202)外信號(hào)調(diào)節(jié)激2(ERK2)
黑柄多孔菌免疫球蛋白μ鏈結(jié)合蛋白2抗體Anti-GRID2 Antibody外信號(hào)調(diào)節(jié)激1(ERK1)
柱枝雙孢霉痙攣性截癱相關(guān)蛋白21抗體Anti-GRIN1 Antibody外基質(zhì)金屬蛋白誘導(dǎo)因子(EMMPRIN)
產(chǎn)黃青霉G蛋白結(jié)合蛋白3抗體Anti-GRIK1 Antibody外基質(zhì)蛋白1(ECM1)
絲/蘇/酪激STYK1抗體腸沙門(mén)氏菌腸亞種人臍動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞
絲/蘇蛋白激SRPK1抗體摩氏摩根氏菌人主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞
導(dǎo)向蛋白3B抗體腸沙門(mén)氏菌腸亞種旺茲沃思血清型人冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞
硫酯1抗體熱生腫塊芽孢桿菌人臍動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞
PARPl和PARP2抑制劑秦氏蜜環(huán) 位十二內(nèi)酯血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子A
Sphingopyxis baekryungensis 1,7-菲羅啉載脂蛋白A
赭曲霉 特布他林半硫鹽載脂蛋白B100
巴氏醋桿（現(xiàn)1） 雙聯(lián)(2-甲基-2,4-戊二)酯增殖核抗原抗體
Acinetobacter chengduensis 4-溴咪唑腫瘤壞死因子α
植物乳桿 4-噁唑羧乙酯3β羥基類(lèi)固脫氫
圍小叢殼 4-噁唑甲P450膽固側(cè)鏈裂解
根霉 1-氨基-4-溴萘α干擾
聚生殼 4-異喹啉甲α肌動(dòng)蛋白
黑木耳(黑耳9號(hào)) 2,4-噻唑烷二酮γ干擾
寒冷桿 5--2-甲氧基苯磺酰白蛋白
硬水黃桿 1-乙基化吡啶鎓白介12
高溫黃灰鏈霉 2-溴-5-甲氧基白介2
淡紫灰鏈霉 2-溴-4-吡啶白介4
玉黑粉 3-噻吩甲甲酯白介6
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
