產(chǎn)品介紹:
英文名稱:Veliparib 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg Veliparib是一種有效的PARP抑制劑,抑制PARP1和PARP2,Ki分別為5.2和2.9nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! 號(hào):912444-00-9 別名:ABT-888 純度:98.0% 分子量:244.29 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
中文名稱:PARP抑制劑(Veliparib)
英文名稱:Veliparib
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg
貨號(hào):FS-X10498
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng): 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大??; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng); 5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng); | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min; 2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜; 5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
培養(yǎng)操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
間型彎孢線粒體二羧載體蛋白抗體Anti-GLO1 Antibody纖維蛋白(FBL)
葡萄座腔菌類固受體激活蛋白1抗體Anti-GLI3 Antibody纖溶抑制因子(TAFI)
葡萄座腔菌S100A14/15抗體Anti-GLRX2 Antibody纖溶原激活物抑制因子2(PAI2)
大豆慢生根瘤菌組蛋白甲基轉(zhuǎn)移SMYD2抗體Anti-GLRX Antibody纖溶原激活物抑制因子1(PAI1)
加里福尼亞鏈霉菌沉默調(diào)節(jié)樣蛋白SirT7抗體Anti-GLRX2 Antibody纖溶/抗纖溶復(fù)合體(PAP)
大腸埃希氏菌沉默調(diào)節(jié)相關(guān)蛋白6抗體Anti-Glycine decarboxylase/GLDC Antibody纖溶(Fbn)
枯草芽孢桿菌磷化沉默調(diào)節(jié)相關(guān)蛋白6抗體Anti-GLRX3 Antibody仙掌(Cactin)
Pseudomonas torakense指轉(zhuǎn)錄因子Slug抗體Anti-GNAQ Antibody夏科雷登氏結(jié)晶蛋白(CLC)
磷化腦質(zhì)膜單轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白PMAT抗體Anti-GNB1 Antibody(PB1121)下丘泌受體2(HCRTR2)
枯草芽孢桿菌突觸蛋白6抗體Anti-Glypican 5/GPC5 Antibody下丘泌受體1(HCRTR1)
豌豆根瘤菌腦質(zhì)膜單轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白PMAT抗體Anti-Glutaminase/GLS Antibody周期Y(CCNY)
馬德里青霉超氧化物歧化4抗體Anti-GNG11 Antibody周期T2(CCNT2)
大腸埃希氏菌可溶性載質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2B1抗體Anti-GNG2 Antibody周期T(CCNT)
松口蘑磷化外紡錘體樣蛋白1抗體Anti-GNG4 Antibody周期O(CCNO)
木賊鐮孢小跨膜糖化蛋白抗體Anti-GNS Antibody周期M4(CCNM4)
谷棒桿菌鈉通道蛋白10α抗體Anti-Golm1/GOLPH2 Antibody周期M3(CCNM3)
唾液結(jié)合免疫球蛋白樣凝集9抗體膨端青霉人腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞
心血管調(diào)節(jié)肽Salusin-α抗體粟酒裂殖酵母人臍靜脈平滑肌細(xì)胞
絲/蘇激36融合同源蛋白抗體降短桿菌人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞
S100鈣結(jié)合蛋白A7抗體格氏李斯特氏菌人心肌成纖維細(xì)胞
PARP抑制劑(Veliparib)黑曲霉 正鋯宿主蛋白殘留
產(chǎn)克雷伯氏 3,4,5-三氟芐抗雙鏈DNA抗體;天然DNA抗體
尖鐮孢 5-氟啉瘦
彎孢 核γ干擾
平臍蠕孢 1,2-二-4-氟-5-白介2
球形阜孢 5-氟-3-甲白介4
谷棒桿 2鹽鹽硫氧化還原蛋白
匍枝根霉原變種(可訂購) (S)-(+)-1,2,3,4-四氫-1-萘尿微量白蛋白
枯草芽孢桿 5-溴基異萘前列腺E2
枯草芽孢桿 6,7-二甲氧基-1,2,3,4-四氫異喹啉 鹽鹽皮質(zhì)
棕褐橙鏈霉 3-氨基-L-酪孕酮
銀色鏈霉 雙甘肽 鹽鹽雌二
韓國(guó)游動(dòng)微 DL-氨酰-DL-正纈睪酮
克里布所島津氏 五聚乙二單癸皮質(zhì)
黑曲霉 利托君鹽鹽細(xì)小病抗體