Hoechst33342/PI細(xì)胞凋亡染色試劑盒正在熱銷的產(chǎn)品：JAM1/CD321 連接粘附分子1醋丁纖維 35-39%
p300/KAT3B 轉(zhuǎn)錄接頭蛋白EP300抗體醋丁纖維 44-50%
KCNA5 電壓閥門通道混合器相關(guān)亞家族成員5抗體醋丁纖維 50-54%
KCNG4/KV6.3 離子通道蛋白G蛋白4抗體2-氨-8-萘-6-磺 90%，工業(yè)級(jí)
KCNA7 電壓閥門通道混合器相
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；
4．將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
中文名稱：Hoechst33342/PI細(xì)胞凋亡染色試劑盒
英文名稱：
產(chǎn)品規(guī)格：100T
貨號(hào)：FS-X9885
產(chǎn)品介紹:
用途： 流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡與細(xì)胞壞死 注意事項(xiàng)： Hoechst33258能被活細(xì)胞攝取，與DNA結(jié)合，在紫外線下呈藍(lán)色熒光。PI使死細(xì)胞著色產(chǎn)生紅色熒光。在散點(diǎn)圖上結(jié)果為：正常細(xì)胞呈低藍(lán)/紅光，凋亡細(xì)胞呈高藍(lán)/低紅光，壞死細(xì)胞呈低藍(lán)/高紅光。 儲(chǔ)存條件：-20℃，避光，12個(gè)月 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min； 2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜； 5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
波羅的海萊茵海默氏菌頂體前體蛋白抗體Human MBIP 小鼠中性粒彈性蛋白(NE)免疫試劑盒
擬莖點(diǎn)霉黑色瘤缺失樣蛋白1抗體Human MARS 小鼠脂氧A4(LXA4)免疫試劑盒
大腸埃希氏桿菌未知糖基化轉(zhuǎn)移AER61抗體Human MARVELD2 小鼠脂聯(lián)(ADP)免疫試劑盒
副豬嗜血桿菌鐵蛋白Fe65抗體Human MAEA 小鼠脂肪合成(FASN)免疫試劑盒
貪噬菌屬抑癌基因ras同源家族1抗體Human MARVELD3 小鼠脂多糖/內(nèi)(LPS)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌轉(zhuǎn)錄激活蛋白2α/TFAP2α/AP-2α抗體Human MAGEA10 小鼠脂蛋白脂(LPL)免疫試劑盒
釀酒酵母心鈉抗體Human MAGEA1 小鼠脂蛋白相關(guān)磷脂A2(Lp-PLA2)免疫試劑盒
黑曲霉酰tRNA合成2抗體Human MAGEA11 小鼠脂蛋白α(Lp-α)免疫試劑盒
冬菇絲抑制蛋白激C底物抗體Human MAGEA3(Melanoma-associated antigen 3) 小鼠正常T表達(dá)和分泌因子(RANTES/CCL5)免疫試劑盒
木糖葡糖醋桿菌*核突觸蛋白α抗體Human MAGEA4 小鼠整合αM(Itgam/CD11b)免疫試劑盒
食紅球菌自噬相關(guān)蛋白4B抗體Human MAGEA6 小鼠整合α-IIb(Itga2b/CD41)免疫試劑盒
嗜線蟲致病桿菌整合樣金屬蛋白與凝血1型-12抗體Human MAGEA8 小鼠整合α5(Itgax/CD11c)免疫試劑盒
果生鏈核盤菌α-輔肌動(dòng)蛋白4(內(nèi)參)抗體Human MAGEB1 小鼠粘蛋白/粘液7(MUC7)免疫試劑盒
裂褶菌堿性磷抗體Human MAGI1 小鼠粘蛋白/粘液5B(MUC5B)免疫試劑盒
棒彎孢AU1 tag標(biāo)簽抗體Human MAGIX 小鼠粘蛋白/粘液5AC(MUC5AC) 免疫試劑盒
Phoma medicaginis var. medicaginis脂肪增強(qiáng)結(jié)合蛋白1Human MAGEB18 小鼠粘蛋白/粘液2(MUC2)免疫試劑盒
糙皮側(cè)耳Pleurotus│ostreatus 質(zhì)量規(guī)格：15U/mg,進(jìn)口表達(dá)于SiSo系的受體結(jié)合型腫瘤抗原試劑盒2-O-乙酰山椒子烯
型副傷門菌Salmonella│paratyphi A 質(zhì)量規(guī)格：>98%,進(jìn)分變腎上腺試劑盒柚皮-7-O-葡萄糖
IFO14056資源名稱: 印度斯坦鏈異壁菌 質(zhì)量規(guī)格：>99%,AR鞭毛蛋白試劑盒茵芋堿
Hoechst33342/PI細(xì)胞凋亡染色試劑盒虎皮粘蓋牛肝 2-氨基-3-甲基-5-吡啶產(chǎn)幽門螺桿抗體IGG
枯草芽孢桿 乙酰酮化鈰(III) 水合物二酰
松針散斑殼 醋己定琥珀酰
枯草芽孢桿 4-氟-2-(三氟甲基)溴芐傷寒IgM抗體
大腸埃希氏 異丁香蘭酯跨膜蛋白97
嚙蝕艾肯氏 5-溴-2-間二甲苯絲酮氨基轉(zhuǎn)移
星孢鏈霉 2,5-二肉桂胖
大腸埃希氏桿 4-甲基噻唑-5-甲乙酯;4-甲基-5-乙氧羰基噻唑脂肪因子
凝結(jié)芽孢桿 D-焦谷叔丁酯1,3-
蘇云金芽孢桿 1-Boc-2-羥甲基哌1,2-
枯草芽孢桿 5-苯并噻吩核糖核L
產(chǎn)氨棒桿 1-溴-4-異丁基苯甲血清白蛋白結(jié)合物
釀酒酵母 3-苯甲酰內(nèi)皮受體A
紅球 D-葡糖-gamma-內(nèi)酯酮內(nèi)皮受體B
挪威假絲酵母 4-異基芐Tafazzin蛋白
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
