中文名稱：IGF-1R抑制劑(AXL1717)
英文名稱：AXL1717
產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
貨號：FS-X10690
產(chǎn)品介紹:
AXL1717是一種有效的胰島素樣生長因子1型受體(IGF-1R)抑制劑，IC50值為1nM。
注：本品僅可用于科研實驗，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！
號：477-47-4
別名：Picropodophyllot
中文名稱：IGF-1R抑制劑(AXL1717)
英文名稱：AXL1717
產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
貨號：FS-X10690
產(chǎn)品介紹:
AXL1717是一種有效的胰島素樣生長因子1型受體(IGF-1R)抑制劑，IC50值為1nM。 注：本品僅可用于科研實驗，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！ 號：477-47-4 別名：Picropodophyllotoxin;Picropodophyllin;PPP 純度：99.58% 分子量：414.41 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學(xué)檢測。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min； 2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜； 5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
平滑假絲酵母骨橋蛋白（多肽抗原）Anti-CA5B AntibodyToll樣受體8(TLR8)
小月菌TNF家族B激活因子抗原Anti-CA6 AntibodyToll樣受體10(TLR10)
多量毛霉腫瘤抑制基因（抗原）Anti-CA6 AntibodyTolloid樣蛋白1(TLL1)
杰丁塞伯林德納氏酵母腺環(huán)化激活肽-27/38（抗原）Anti-CABLES1 AntibodyTNF受體關(guān)聯(lián)因子6(TRAF6)
香蕉腺環(huán)化激活肽-38（抗原）Anti-CABLES2 AntibodyTNF受體關(guān)聯(lián)因子5(TRAF5)
根瘤菌BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白抗原Anti-CABP1 AntibodyTNF受體關(guān)聯(lián)因子3(TRAF3)
鏈霉菌腺環(huán)化激活肽6-38Anti-CABP2 AntibodyTLX1鄰位子(TLX1NB)
煙曲霉腺環(huán)化激活肽/血管活性腸肽受體（抗原）Anti-CABP7 AntibodyThy1表面抗原(Thy1)
繩生毛殼腺環(huán)化激活肽受體（抗原）Anti-CABP7 AntibodyThimet脫寡肽1(THOP1)
大腸埃希菌關(guān)節(jié)炎相關(guān)基因Anti-CACNA1B AntibodyTGFβ誘導(dǎo)早期應(yīng)答基因1(TIEG1)
Acinetobacter bereziniae Nemec et al. 血小板源性生長因子-1（抗原）Anti-CACNA2D1 AntibodyTescalcin蛋白(TSC)
黑木耳血小板源性生長因子-B（抗原）Anti-CACNA2D1 AntibodyTERF1相互作用核因子2(TINF2)
釀酒酵母血小板源性生長因子受體-A（抗原）Anti-CACNA1I AntibodyTectonic3蛋白(TCTN3)
綠曲霉血小板源性生長因子受體-B（抗原）Anti-CACNA1H AntibodyTectonic2蛋白(TCTN2)
青色鏈霉菌外周髓鞘蛋白-22多肽Anti-CACNA2D2 AntibodyTectonic1蛋白(TCTN1)
香菇磷脂酰肌激（抗原）Anti-CACNA2D3 AntibodyTBP結(jié)合轉(zhuǎn)錄向下調(diào)節(jié)因子1(DR1)
原鈣粘附蛋白α8抗體Roseivivaxisoporae大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞
鈣粘蛋白相關(guān)神經(jīng)受體8抗體Roseivivaxhalodurans小鼠主動脈內(nèi)皮細胞
原鈣粘蛋白15抗體Gramellaechinicola大鼠嗜堿性細胞白血病細胞
原鈣粘蛋白β2抗體海洋海棲菌人急性淋巴白血病細胞
IGF-1R抑制劑(AXL1717)擬青霉 2-氟-4-羥基Q熱
香菇 3-辛基噻吩間粘附分子1
釀酒酵母 3-環(huán)己烯-1-羧甲酯尿白三烯
燼灰鏈霉 三異基硅烷CD4分子
釀酒酵母 N-[3-(乙酰巰基)-(2S)-甲基酰基]-L-脯CD8分子
淺玫瑰鏈霉 1,2-二溴-4,5-二氟苯傳染性胸膜肺炎抗體
干草鞘氨單胞 1,10-二氨基癸烷魏氏梭(D型)抗體
金黑小單孢 4-甲基戊魏氏梭(A型)抗體
4-甲乙型腦炎病抗體
曲霉 順式-二苯乙烯沙眼衣原體
*紅城紅球 二乙縮氨基乙肺炎衣原體IgM抗體
產(chǎn)二鏈霉 1-(2-均苯)-1,3-丁烷二酮沙眼衣原體抗體
鏈格孢 蘋果?；?/span> 六氟磷四乙銅(I)邊蟲病抗體
玉大斑病 3,4,5-氧苯海綿狀腦病
尖孢鐮孢 鄰乙伏馬
